169870. lajstromszámú szabadalom • Eljárás véralvadást gátló oligopeptid-származékok előállítására
11 169870 12 (12 mmol) N-metil-morfolint és —10 C°-on 1,6 ml (12 mmol) klórszénsav-izobutilésztert. A reakcióelegyet 10 percig keverjük — 10 C°-on, majd ezen a hőmérsékleten hozzáadjuk a fenti dimetilformamidos oldatot. 5 A reakcióelegyet hűtés mellett keverjük egy órán át, majd szobahőmérsékleten állni hagyjuk. Az oldószereket vákuumban lepároljuk, a maradékot vízzel eldörzsöljük, a csapadékot szűrjük, és mossuk vízzel, 5%-os nátrium-hidrogén-karbonát-oldattal, majd ismét vízzel 10 és végül kevés etanollal. Szárítás után 4,5 g (71%) cím szerinti terméket kapunk. Ri° 0,3—0,35. 3. lépés: benziloxikarbonil-glicil-L-valil-NG -p-nitrobenziloxikarbonil-L-argininaldehid 2,0 g (3,2 mmól) védett tripeptid-laktámot (6. példa, 2. lépés) 32 ml tetrahidrofuránban feloldunk és redukáljuk az 1. példa 3. lépésében megadott módon azzal az eltéréssel, hogy 6,1 ml hidrid-oldatot használunk. A terméket a redukciós elegyből butanollal vonjuk ki, majd a butanolos oldat bepárlása után a maradékot izopropanollal eldörzsöljük, szűrjük és szárítjuk. 1,6 g (80%) cím szerinti terméket kapunk. R| 0,60—0,65. 4. lépés: benziloxíkarbonil-glicil-L-valil-NG -p-nitrobenziloxikarbonil-L-argininaldehid-szemikarbazon A 6. példa 3. lépésében kapott védett tripeptid-aldehidet feloldjuk 4 ml meleg 75%-os vizes etanolban, majd hozzáadunk 0,44 g (4 mmól) szemikarbazid-hidrokloridot és 0,56 g (7 mmól) vízmentes nátrium-acetátot, és egy órán át forraljuk. A reakcióelegyet vízzel hígítjuk, amíg a szemikarbazon kiválása megindul, majd lehűtjük, és a kiülepedett olajról az oldószert leöntjük. Az olajos maradékot vízzel elkeverjük, a vizet dekantáljuk, és a maradékot előbb acetonnal, majd izopropiléterrel eldörzsöljük. A nyers terméket dioxán-izopropiléter elegyből kétszer átoldjuk. 1,5 g (83%) cím szerinti védett tripeptid-aldehid-szemikarbazont kapunk. R| 0,47— 0,53.. 5. lépés: glicil-L-valil-L-argininaldehid-szemikarbazon-hidroklorid A 6. példa 4. lépésében kapott termékről a védőcsoportokat eltávolítjuk a 4. példa 5. lépésében leírt módon azzal az eltéréssel, hogy 30 ml 50%-os vizes metanol és 9,1 ml 1 n sósav elegyében oldjuk. A terméket az oldószer lepárlása után izopropanolos eldörzsöléssel izoláljuk. 0,44 g (70%) cím szerinti tripeptid-aldehid-szemikarbazon-hidrokloridot kapunk. R| 0,45—0,55. 6. lépés: glicil-L-valil-L-argininaldehid-hidroklorid A 6. példa 5. lépésében kapott szemikarbazonból az aldehidet felszabadítjuk a 4. példa 6. lépésében leírt módon azzal az eltéréssel, hogy a szemikarbazont 14 ml metanolban oldjuk és 1,4 ml 1,8 n metanolos sósavat, valamint 0,7 ml 40%-os formalin-oldatot használunk. 0,3 g (99%) cím szerinti terméket kapunk. R| 0,6—0,7. 7. példa L-Fenilalanil-L-valil-L-argininaldehid-hidroklorid előállítása 1. lépés: benziloxikarbonil-L-fenilalanil-L-valil-NG -p- 55 -nitrobenziloxikarbonil-L-arginin-laktám 5,0 g (8,8 mmól) védett dipeptid-laktámot (6. példa, 1. lépés) dekarbobenzilezünk a szokásos módon (6. példa, 2. lépés), és a kapott terméket feloldjuk 10 ml dimetil- 60 formamidban, majd hozzáadunk 25 ml (18 mmól) trietilamint, és — 10 C°-on az alábbi vegyes anhidridhez adjuk. 3,6 g (12 mmól) benziloxikarbonil-L-fenilalanint feloldunk 15 ml tetrahidrofuránban, hozzáadunk 1,34 ml 65 2. lépés: benziloxikarbonil-L-fenilalanil-L-valil-NG -p-nitrobenziloxikarbonil-L-arganinaldehid-szemikarbazon 3,13 g (4 mmól) védett tripeptid-laktámot (7. példa, 1. lépés) 40 ml tetrahidrofuránban feloldunk és az 1. példa 3. lépésében leírt módon redukáljuk azzal az eltéréssel, hogy 7,7 ml hidrid-oldatot használunk és az aldehid-származékot butanollal vonjuk ki. A butanol-oldat párlási maradékaként kapott védett tripeptid-aldehidet 6,5 ml 75%-os vizes etanolban feloldunk és szemikarbazonná alakítjuk a 6. példa 4. lépésében leírt módon azzal az eltéréssel, hogy 0,69 g szemikarbazid-hidrokloridot és 0,88 g vízmentes nátrium-acetátot használunk. 2,15 g (65%) cím szerinti terméket kapunk. Rf 0,23—0,27. 3. lépés: L-fenilalanil-L-valil-L-argininaldehid-hidroklorid 1,63 g (2 mmól) védett tripeptid aldehid-szemikarbazont (7. példa, 2. lépés) hidrogénezünk a 4. példa 5. lépésében leírt módon, azzal az eltéréssel, hogy oldószerként 30 ml 50%-os vizes metanol és 8,6 ml 1 n sósav elegyét használjuk. Az oldószer lepárlása után kapott szabad tripeptid-aldehid-szemikarbazont (R| 0,35—0,45) feloldjuk 20 ml metanolban és a tripeptid-atdehidet felszabadítjuk a 4. példa 6. lépésében leírt módon azzal az eltéréssel, hogy 1,86 ml 1,8 n metanolos sósavat és 0,93 ml 40%-os formalin-oldatot használunk. A metanol-kloroformos oldat párlási maradékát izopropiléterrel eldörzsöljük, szűrjük és szárítjuk. 0,75 g (80%) cím szerinti anyagot kapunk. R| 0,45—0,55. 8. példa Benzoil-L-fenilalanil-L-valil-L-argininaldehid-hidroklorid előállítása 0,83 g (1 mmól) védett tripeptid-aldehid-szemikarbazont (7. példa, 2. lépés) hidrogénezünk a 4. példa 5. lépésében leírt módon azzal az eltéréssel, hogy oldószerként 15 ml 50%-os vizes metanol és 4,3 ml 1 n sósav elegyét használunk. A katalizátor kiszűrése és az oldószer elpárologtatása után a maradékot feloldjuk 4 ml dimetílformamidban, lehűtjük —5 C°-ra, és hozzáadunk 0,115 ml (1 mmól) benzoil-kloridot és 0,42 ml (3 mmól) trietilamint. A reakcióelegyet hűtés mellett keverjük 3 órán át, majd bepároljuk. A maradékot kevés vízzel eldörzsöljük, szűrjük, kevés hideg vízzel és éterrel mossuk, majd szárítjuk. A kapott anyagot (Rf 0,47— 0,53) feloldjuk 9 ml metanolban, és a 4. példa 6. lépésé-20 25 30 35 40 45 60 65 6
