169870. lajstromszámú szabadalom • Eljárás véralvadást gátló oligopeptid-származékok előállítására
169870 9 10 -prolint (H. N. Rydon és munkatársai.: J. Chem. Soc. 1956. 3642) feloldunk 10 ml dimetilformamidban, majd — 10 C°-on hozzáadunk 1,4 ml (10 mmol) trietilamint és 1,0 (10 mmol) klórszénsav-etilésztert. Tíz perc keverés után egyesítjük a fenti dimetilformamidos oldattal. A reakcióelegyet fél órán át hűtés mellett keverjük, majd szobahőmérsékleten állni hagyjuk éjszakán át. A kapott szuszpenziót vákuumban bepároljuk, a maradékot feloldjuk metilén-kloridban, az oldatot mossuk 5%-os nátrium-hidrogén-karbonát-oldattal, vízzel, 1 n citromsav-oldattal, majd ismét vízzel, és nátrium-szulfáton szárítjuk. Bepárlás után a maradékot éterrel eldörzsöljük, szűrjük, éterrel mossuk és szárítjuk. 4,6 g (74%) cim szerinti terméket kapunk. Rj 0,58—0,63. 3. lépés: benziloxikarbonil-glicil-L-prolil-NG -p-nitrobenziloxikarbonil-L-argininaldehid. 4,0 g (6,4 mmól) védett tripeptid-laktámot (4. példa, 2. lépés) feloldunk 64 ml tetrahidrofuránban és az 1. példa 3. lépésében megadott módon redukáljuk azzal az eltéréssel, hogy 12,2 ml hidrid-oldatot használunk. 3,0 g (75%) cím szerinti terméket kapunk. R, 0,7—0,8. 4. lépés: benziloxikarbonil-glicil-L-proliI-NG -p-nitrobenziloxikarbonil-L-argininaldehid-szemikarbazon 1,0 g (1,6 mmól) védett tripeptid-aldehidet (4. példa, 3. lépés) feloldunk 2 ml etanolban, és hozzáadunk 0,22 g (2 mmól) szemikarbazid-hidrokloridot, valamint 0,28 g (3,5 mmól) vízmentes nátrium-acetátot, és az oldatot fél órán át forraljuk. Ezután vízzel hígítjuk, amíg a szemikarbazon kiválása megindul. Az emulziót hűtjük, a kiülepedett olajról az oldószert leöntjük, előbb vízzel, azután acetonnal, majd éterrel eldörzsöljük, szűrjük és éterrel mossuk. Szárítás után 1,0 g (87%) cím szerinti védett tripeptid-aldehid-szemikarbazont kapunk. Rf 0,5—0,6 g. 5. lépés: glicil-L-prolil-L-argininaldehid-szemikarbazon-hidroklorid 0,9 g (1,25 mmól) védett tripeptid-aldehid-szemikarbazont (4. példa, 4. lépés) feloldunk 18 ml 50%-os vizes metanolban, majd 5,34 ml 1 n sósav hozzáadása után csontszenes palládium katalizátor jelenlétében hidrogénezzük. Egy óra eltelte után a katalizátort kiszűrjük, 50%-os vizes metanollal mossuk, az oldatot bepároljuk, és a maradékot izopropiléterrel eldörzsöljük. 1,4 g (70%) cím szerinti terméket kapunk. Rj 0,5—0,55. 6. lépés: glicil-L-prolil-L-argininaldehid-hidroklorid 0,2 g (0,43 mmól) tripeptid-aldehid-szemikarbazont (4. példa, 5. lépés) feloldunk 4 ml metanolban, hozzáadunk 0,4 ml 1,8 n metanolos sósavat, majd 0,2 ml 40%-os formalin oldatot, és szobahőmérsékleten keverjük 3 órán át. A reakcióelegyet 5%-os nátrium-hidrogén-karbonát oldattal pH 5—6 értékig semlegesítjük, bepároljuk, a maradékot kloroform-metanol-elegyben (5 ml) szuszpendáljuk, és a nem oldódó részt kiszűrjük. Az oldatot bepároljuk, a maradékot etilacetáttal eldörzsöljük, szűrjük, etilacetáttal mossuk és szárítjuk. 0,15 g (90%) cím szerinti terméket kapunk. R? 0,4— 0,45. 5. példa Glicil-L-prolil-L-argininol-hidroklorid előállítása 5 0,3 g (0,78 mmól) glicil-L-prolil-L-argininaldehid-hidrokloridot (4. példa) feloldunk 6 ml metanolban, és hűtés közben hozzáadunk 0,04 g nátrium-bór-hidridet. A reakcióelegyet 6 órán át keverjük, majd 1 n sósavval savanyítjuk és bepároljuk. A maradékot 5 ml kloro-10 form-metanol (1:1) elegyben szuszpendáljuk, a nem oldódó részt kiszűrjük, az oldatot bepároljuk és acetonnal eldörzsöljük, majd szűrjük, acetonnal mossuk és szárítjuk. 0,3 g (100%) cím szerinti terméket kapunk. R? 0,28— 0,33. 6. példa 20 Glicil-L-valil-L-argininaldehid-hidroklorid előállítása 1. lépés: benziloxikarbonil-L-vaIil-NG -p-nitrobenziloxikarbonil-L-arginin-laktám 25 4,85 g (10,4 mmól) védett arginin-laktámot (4. példa, 1. lépés) feloldunk 20 ml kb. 20% hidrogén-bromidot tartalmazó jégecetben, fél órán át szobahőmérsékleten hagyjuk állni, majd éterrel hígítjuk. A kivált csapadékot kiszűrjük, éterrel mossuk és szárítjuk. A terméket fel-30 oldjuk 10 ml dimetilformamidban, hozzáadunk 2,8 ml (20 mmól) trietilamint, és —10 C° hőmérsékleten az alábbi vegyes anhidrid-oldathoz öntjük. 3,6 g (14,25 mmól) benziloxikarbonil-L-valint feloldunk 10 ml dimetilformamidban, — 10 C°-on hozzá-35 adunk 1,58 ml (14,25 mmól) N-metil-morfolint és 1,88 ml (14,25 mmól) klórszénsav-izobutilésztert. Az elegyet 10 percig keverjük — 10 C° hőmérsékleten. Az arginin-laktám oldatával való egyesítés után a reakcióelegyet éjszakán át szobahőmérsékleten állni hagyjuk, majd 40 vákuumban bepároljuk. A maradékot eldörzsöljük vízzel, 5%-os nátrium-hidrogén-karbonát-oldattal és vízzel. A kapott olajos terméket etanolos eldörzsöléssel kristályosítjuk. 3,7 g (80%) cím szerinti védett dipeptid-laktámot kapunk. Rj° 0,44—0,48. 2. lépés: benziloxikarbonil-glicil-L-valil-NG -p-nitrobenziloxikarbonil-L-arginin-laktám 50 3,75 g (6,55 mmól) védett dipeptid-laktámot (6. példa, 1. lépés) benziloxikarbomilezünk 10 ml 20% hidrogén-bromidot tartalmazó jégecettel. Az éteres kicsapás, szűrés, éteres mosás és szárítás után kapott terméket fel-55 oldjuk 15 ml piridinben, hozzáadunk 2,32 g (6 mmól) benziloxikarbonil-glicin-triklórfenilésztert és 1,68 ml (12 mmól) trietilamint. A reakcióelegyet szobahőmérsékleten állni hagyjuk éjszakán át, majd vákuumban bepároljuk. A maradékot feloldjuk kloroformban és mossuk 60 5%-os nátrium-hidrogén-karbonát-oldattal, vízzel, 1 n citromsavval és ismét vízzel, majd nátrium-szulfáton szárítjuk és bepároljuk. A párlási maradékot éterrel eldörzsöljük, szűrjük, éterrel mossuk és szárítjuk. 2,75 g (73%) cím szerinti védett tripeptid-laktámot kapunk. 65 R)° 0,15—0,20. 5
