169799. lajstromszámú szabadalom • Eljárás akuleacin antibiotikumok előállítására
169799 10 víz (75 : 25). A ninhidrines színreakciót a 33. ábra mutatja, amelyen L-treonin és öt ismeretlen, ninhidrinre pozitív komponens található. A 34. ábra a papír-elektroforézis eredményét mutatja, ezt szűrőpapírral (Toyo szűrőpapír 51 sz., a Toyo Rbshi Co., Tokio gyártmánya), 2000 V-tal 30 percig végeztük (pH 1,8 hangyasav-ecetsav pufferben). Kontrollként L-treonint és L-hisztidint alkalmaztunk. L-treonint és öt ismeretlen, ninhidrines pozitív komponenst találtunk. A 33. és 34. ábrán a következő rövidítéseket alkalmaztuk: Vio: ibolya, Y—G: sárgászöld, Y—O: narancssárga, D—Vio: sötétibolya, Y: sárga, Or: narancs, Thr: L-treonin és His: L-hisztidin. A 32., 33. és 34. ábrán az akuleacin—A hidrolizátumának sajátosságait szemlélteti. Idő (perc) 16 22 37 118 128 132 138 142 146 158 182 256 273 Szín V V V Y Y Y Y Y V V Y V V Aminosav UK XJK NH, UK UK UK UK UK UK Thr Pro UK UK A + + _ + + + _ + Tr ' M B + — + — — + + — + + — Tr — • e C + —. + — — + + — — + — Tr + o CS D —' + + — — + + + — + — Tr + 3 E — + + — — — + + — + + Tr — < F — + + — + — + + — + — Tr — G — + + + — — + + — + — Tr -Rövidítések: Szín: Y = sárga (erős abszorpció 440 mpL-nál) V = ibolya (erős abszorpció 570 m[jL-nál) + : pozitív csúcs — : nincs csúcs Tr: elmosódott csúcs Uk = ismeretlen aminosav Lis = 17,5 perc His = 24 perc Asp =148 perc lie =288 perc Leu =297 perc Az akuleacinok olyan peptid-antibiotikumok, amelyek fizikai-kémiai tulajdonságaiknak megfelelően vízben kissé oldódnak. Az eddig ismert, metanolban 277 m[i,-nál ultraibolya 35 abszorpciós maximumot mutató antibiotikumok közül a miroridin (45—12276 sz. japán szabadalmi leírás), az atlesztatin (41—12668. sz. japán szabadalmi leírás), a monilin [Takeda Institute Annual Report, 14, 8—10 (1955)], az orizamicin (38—2800 sz. japán szabadalmi 40 leírás), a szaramicetin (Antimicrobial Agents and Chemotherapy, 1961, 436—444], az unamicin [J. Antibiotics, Ser. A, 13, 14—220 (I960)] és a vengicid (764 198 sz. nagy-britanniai szabadalmi leírás) hasonlók az akuleacinokhoz. Az akuleacinok azonban a következőkben 45 különböznek ezektől az antibiotikumoktól. A miroridin bázikus, vízoldható antibiotikum, amely így eltér az akuleacintól. Az atlesztatin az akuleacinokhoz hasonló fizikai-kémiai és biológiai tulajdonságokkal rendelkezik, de az atlesztatin összegképlete C3 2H 58 N 5 0 12 50 és ultraibolya abszorpciós maximumai 278 és 225 mp.nál vannak, így ebben eltér az akuleacinoktól. A monilin bázikus nukleozid és nitrogéntartalma az elemanalízis szerint magasabb, mint az akuleacinoké. Az orizamicin savas jellegű olajos anyag. A szaramicetin hidro- 55 lízise aszparaginsavat, cisztint, glicint és treonint eredményez és az unamicin savas polién vegyület. A vengicid a monilinhez hasonlóan nukleozid típusú anyag. A fentiek alapján látható, hogy az akuleacinok új antibiotikumok és tulajdonságaikban eltérnek az eddig 60 ismertektől. Az akuleacinok biológiai tulajdonságai a következők: 1. Baktériumellenes hatás: Vizsgálati közeg: glukóz-húslé-agar, 37 C°, 18 óra. 65 Majdnem egyáltalán nincs hatása baktériumok, például Staphylococcus aureus, Bacillus subtilis, Sarcina lutea és hasonlók ellen. 2. Élesztőgombák elleni hatás: Vizsgálati közeg: Sabouraud-agar, 30 C°, 48 óra. A minimális gátlási koncentrációt a következő táblázat mutatja. 3. Gombaellenes hatás: Mivel az akuleacinoknak fungicid hatásuk nincs, a gombákat akuleacinok bizonyos koncentrációját tartalmazó Sabouraud-agar táptalajra ráoltjuk, és a tenyészeteket 26 C°-on 7—14 napig inkubáljuk. Az akuleacinok 80%-os szaporodásgátló koncentrációját az óriás telep területének arányával mérjük és a kontrollt akuleacin nélkül vizsgáljuk. I. Az akuleacin—A 80%-os szaporodásgátló kon centrációja (ppm/ml) i) Dermatopatogén gombák Trichophyton asteroides 0,004 Trichophyton rubrum 0,006 Microsporum gypseum 0,008 ii) Fitopatögén gombák Fusarium exysporum f. lini 2,0 Cercospora kikuchii 4,0 Corynespora cassicola 2,0 Diaporthe phaseolorum 0,01 Sclerotium bataticola 0,08 Ascochyta soyaecola 0,08 Collectotrichum linicolum 0,4 Glomerella singulata 0,06 Helminthosporium oryzae 0,008 5
