169799. lajstromszámú szabadalom • Eljárás akuleacin antibiotikumok előállítására

3 169799 4 hossza 250—1000 [x, főleg 600—1000 jx tartományban. Szélesség 10—13 jx, világos sárgás-barna és a fal lágy és kissé tömött. Vastagság kb. 1,5—2 [x. A hólyag barna és gömbalakú vagy közel gömbalakú; átmérő 40—48 jx, főleg 50—70 (x. A szterigma egyágú és a 6—8 X 3—4 méretű közel vonalas. A konídium általában közel gömbalakú vagy gömbszerű, amely különböző alakokat mutat és 3,5—5 X 3—3,5 [x méretű, barna színű és a fal lágy. A Czapek-agar táptalajon világos színű, 5—7 X 2—3 [x méretű pálca alakú a konídium, és a lágy fal részben együtt képződik a fenti konídiummal. C) A szaporodás feltételei: A szaporodás hőmérséklete: 13—40 C°. A szaporodás pH-ja: 2—9. Optimális szaporodási hőmérséklet és pH: 29— 31 C°, pH =3—5. A fenti rendszertani vizsgálatok szerint ez a törzs az Aspergillus niger csoporthoz tartozik [lásd Jap. J. Agrical. Chem., 27, 806—809 (1953) és az Aspergillus genus 328—331 (1965)], amelynek konídiumai barnásfeketék. Ez a csoport az egyágú vagy kétágú szterigma szerint, két csoportra oszlik. Ez a törzs az egyágú törzshöz tartozik. Jelenleg az egyágú szterigmával rendelkező gombák Aspergillus japonicus-ként és Aspergillus aculeatusként ismertek és mivel az Aspergillus japonicusban a konídium gömbalakú vagy közel gömbalakú, 3—3,5 [x méretű és a hólyag 15—45 [x, főleg 20—35 (x méretű, és az Aspergillus aculeatusban a konídium közel gömbalakú vagy gömbszerű, 4,5—5 X 3—3,5 ß méretű és a hólyag 35—100 [x, főleg 60—80 /j, méretű, ez a törzs rendszertanilag hasonló az Aspergillus aculeatushoz. Továbbá, mivel az American Type Culture Collectionból kapott Aspergillus aculeatus ATCC 1034 és ez a törzs hasonlítanak egymáshoz, ezt a törzset Aspergillus aculeatus M 4214-nek neveztük el. A törzset az Institute for Industrial Fermentation and Technology, Agent of Industrial Science and Technology, Japan-nál deponáltuk és a FERM—P 2324 állandó deponálási számot kapta. A találmány tárgya a fentiek szerint iparilag előnyös eljárás akuleacin komplex és összetevői előállítására, amelyek antibiotikus hatásúak patogén gombákkal szemben. A csatolt rajzok a következőket mutatják be: 1. és 2. ábra: Akuleacin—A ultraibolya abszorpciós spektruma metanolban, 3. és 4. ábra: Akuleacin—A abszorpciós spektruma kálium-metanol oldatban, 5. ábra: Akuleacin—A infravörös abszorpciós spektruma, 6. ábra: Akuleacin—B ultraibolya abszorpciós spektruma metanolban, 7. ábra: Akuleacin—B ultraibolya abszorpciós spektruma 0,01 n KOH — 90%-os metanolos oldatban, 8. ábra: Akuleacin—C ultraibolya abszorpciós spektruma metanolban, 9. ábra: Akuleacin—C ultraibolya abszorpciós spektruma 0,01 n KOH — 90%-os metanolos oldatban, 10. ábra: Akuleacin—D ultraibolya abszorpciós spektruma metanolban, 11. ábra: Akuleacin—D ultraibolya abszorpciós spektruma 0,01 n KOH — 90%-os metanol oldatbans 12. ábra: Akuleacin—E ultraibolya abszorpciós spektruma metanolban, 5 13. ábra: Akuleacin—E ultraibolya abszorpciós spektruma 0,01 n KOH — 90%-os metanolos oldatban, 14. ábra: Akuleacin—F ultraibolya abszorpciós spektruma metanolban, 15. ábra: Akuleacin—F ultraibolya abszorpciós spekt-10 ruma 0,01 n KOH — 90%-os metanolos oldatban, 16. ábra: Akuleacin—G ultraibolya abszorpciós spektruma metanolban, 17. ábra: Akuleacin—G ultraibolya abszorpciós spektruma 0,01 KOH — 90%-os metanolos oldatban, 15 18. ábra: Akuleacin—B infravörös abszorpciós spektruma, 19. ábra: Akuleacin—C infravörös abszorpciós spektruma, 20. ábra: Akuleacin—D infraövörös abszorpciós 20 spektruma, 21. ábra: Akuleacin—E infravörös abszorpciós spektruma, 22. ábra: Akuleacin—F infravörös abszorpciós spektruma, 25 23. ábra: akuleacin—G infravörös abszorpciós spektruma, 24. ábra: Akuleacin—B NMR spektruma, 25. ábra: Akuleacin—C NMR spektruma, 26. ábra: Akuleacin—D NMR spektruma, 30 27. ábra: Akuleacin—E NMR spektruma, 28. ábra: Akuleacin—F NMR spektruma, 29. ábra: Akuleacin—G NMR spektruma, 30. ábra: Akuleacin—B, —C, —D, —E, —F és —G aminosav analízisének vázlatos grafikonja, 35 31. ábra: Akuleacin—A NMR spektruma, 32. ábra: Akuleacin—A sósavas hidrolizátumának aminosav analízise, 33. ábra: Akuleacin—A sósavas hidrolizátumának kétdimenziós vékonyrétegkromatogramja, 40 34. ábra: Akuleacin—A sósavas hidrolizátumának magasfeszültségű papír-elektroforézise. Az akuleacin—A, —B, —C, —D, —E, —F és —G-t magában foglaló akuleacin csoportbeli antibiotikumok, amelyeket az Aspergillus aculeatus M 4214 FERM—P 45 2324 tenyésztésével nyertünk, erős gombaellenes hatással rendelkeznek, 277 mjx-nál ultraibolya abszorpciós maximumot mutatnak és aminosav-komponensként treonint tartalmaznak. A találmány szerint az akuleacinok az Aspergillus 50 aculeatus M 4214 FERM—P 2324 törzs alkalmas táptalajokon végzett tenyésztésével nyerhetők, az antibiotikumok gyártása szokásos módszerének megfelelően. A mikroorganizmus tenyésztése különböző módon végezhető, így folyékony vagy szilárd kultúrában. Egy 55 előnyös ipari eljárás során, az Aspergillus aculeatus M 4214 FERM—P 3234 spóra szuszpenziójának 1—2 napos tenyészetével beoltott kultúrát süllyesztett levegőztetésnek vetjük alá. Az akuleacinok gyártásához megfelelő táptalaj egy 60 asszimilálható szénforrást, így glükózt; egy asszimilálható szerves vagy szervetlen nitrogénforrást, így kukoricalekvárt, peptont és ammóniumszulfátot tartalmazhat és a táptalaj sókat, így foszfátot, magnéziumot, vagy káliumot is tartalmaz. 65 Az akuleacinok előállításához szükséges tenyésztési 2