169436. lajstromszámú szabadalom • Eljárás és analitikai reagens haptének kimutatására és meghatározására

MAGTAR NÉPKÖZTÁRSASÁG ORSZÁGOS TALÁLMÁNYI HIVATAL SZABADALMI LEÍRÁS Bejelentés napja: 1973. V. 10. (AO-364) Hollandiai elsőbbsége: 1972. V. 11. (72.06373) Közzététel napja: 1976. VI. 28. Megjelent: 1977. IX. 30. 169436 Nemzetközi osztályozás: G 01 N 33/16 Feltalálók: Di. Schuurs Antonius Hermanus Wilhelmus Maria vegyész, Van Weemen Bauke Klaas vegyész, Oss, Hollandia Tulajdonos: Akzo N.V., Arnhem, Hollandia Eljárás és analitikai reagens haptének kimutatására és meghatározására 1 A találmány tárgya javított eljárás haptének kimutatására és meghatározására haptént tartalmazó folyadékmintának egy haptén-enzim konjugáttal és egy hapten antitesttel való érintkeztetése által. Közelebbről a találmány tárgya javított eljárás 5 haptének meghatározására, ahol az antitest képzésére használt hapten és nagy molekulájú anyag közötti kötés természete eltér a haptén-enzim konjugát kötésének természetétől. A találmány tárgyát képezi az említett mód- 10 szerrel való meghatározáshoz használható kompozíció is. A 70.16396 számú közzétett holland szabadalmi bejelentés olyan kimutatási és meghatározási rendszert ismertet, amely szerint a hapténeket tar- 15 talmazó folyadékhoz, például testfolyadékhoz, így vérhez vagy vizelethez, amely ismeretlen mennyiségű haptént tartalmaz, egy enzim és az illető hapten kapcsolási termékének egy adott mennyiségét és az illető hapten elleni antitest oldhatat- 20 lanná tett alakjának egy adott mennyiségét adják. Az említett komponensek hozzáadása után kompetitív reakció megy végbe az antitestek és a meghatározni kívánt hapten, illetve, az enzimhez kötött hapten között. Minél nagyobb mennyiségű szabad 25 hapten van a folyadékban, annál nagyobb lesz annak a haptén-enzim konjugátnak a mennyisége, amely nem reagál az oldhatatlanná tett antitestekkel, és amely ennek következtében visszamarad a folyadékfázisban. így a haptén-enzim konjugát akti- 30 vitásának a folyadékfázisban való mérése vagy a szilárd fázisban levő reagált haptén-enzim konjugát aktivitásának mérése útján egy adott rendszerre vonatkozó dózis-reakció görbe segítségével meghatározható a vizsgálandó folyadékban levő haptének mennyisége. A 70.18838 számú közzétett holland szabadalmi bejelentés olyan módszert ismertet haptének kimutatására és meghatározására, amely az előbbi módszertől annyiban tér el, hogy a meghatározni kívánt haptént és az adott mennyiségű haptén-enzim konjugátot nem oldhatatlanná tett antitestekkel, hanem oldható antitestekkel reagáltatják, és a kompetitív reakció lezajlása után az antitestek oldhatatlanná tett antitestjeinek (anti-antitestjeinek) egy adott mennyiségét adják az oldathoz. Az első antitestekkel reagáltatott haptén-enzim konjugát azután az oldhatatlanná tett második antitesthez kötődik és a szilárd fázisba kerül, míg a haptén-enzim konjugátnak az a része, amely nem reagált, visszamarad a folyékony fázisban. A fentiekhez hasonló módon a vizsgálandó folyadékban levő hapten mennyisége ez esetben is egy dózis-reakció görbével határozható meg az enzim aktivitásának a folyékony vagy a szilárd fázisban való mérése után. A relatív dózis-reakciógörbét úgy határozzuk meg, hogy egy adott mennyiségű haptén-enzim konjugátot különböző hígítású antiszérummal (antitesteket tartalmazó szérummal) hozunk érintke-169436