169364. lajstromszámú szabadalom • Eljárás az FR-02A antibiotikum előállítására
169364 11 12 FR—02A hatóanyagtartalmát korlátozza az a körülmény, hogy csak oly mennyiségű hatóanyagot keverhetünk a vízbe, amely abból nem ülepszik ki túl gyorsan. Ilyen kiülepedés elkerülésére azonban emulgeátorokat vagy felületaktív anyagokat is adhatunk az ivóvízhez. Az FR-02A antibiotikum takarmányokban való felhasználására vonatkozólag fentebb előadottak csupán példaként értendők, a szakmában járatos szakemberek számára világos, hogy számos másfajta alkalmazási lehetőség is van, így például előállíthatunk olyan takarmányadalék-keverékeket, illetőleg kész takarmányokat is, amelyek az FR-02A hatóanyagot másfajta antibiotikumok, egyéb növekedés-gyorsító hatóanyagok, vitaminok és/vagy egyéb tápanyagok kíséretében tartalmazzák. Az FR-02A antibiotikum jó hatást mutat 5-100 mg/kg adagolásban a házi szárnyasok PPLO fertőzésével szemben is. Egyszeri adagként előnyösen 35—45 mg/kg hatóanyag-mennyiséget adunkbe. Ilyen fertőzések gyógykezelése esetén is előnyös az FR-02A antibiotikumot az állat táplálékában bekevert alakban alkalmazni. Ebben az esetben a takarmány FR-02A hatóanyag-koncentrációja előnyösen 0,0055 súly% és 0,02 súiy% között lehet. Csirkék légzsák-gyulladásának (sacculitis) kezelésére a hatásos adag (EDS0 ) 40-100 mg/kg. így az ilyen célokra szolgáló gyógyszerkészítményekben az FR—02A antibiotikumot adagolási egységenként előnyösen 10 mg és 150 mg közötti mennyiségekben alkalmazhatjuk. A csirkék légzsák-gyulladásának kezelésére az FR-02A antibiotikumot célszerűen vizes oldat vagy szuszpenzió alakjában alkalmazzuk, szubkután injekcióban. Az ilyen injekciók céljaira ampullázott készítményt állíthatunk elő, az alábbi ampullánként! összetételben: FR-02A antibiotikum 20 mg hígítószer: steril víz injekció céljaira 2 ml. Coccidiosis kezelésére az FR—02A antibiotikumot előnyösen az állatok takarmányához történő hozzákeverés útján alkalmazzuk. Az FR-02A antibiotikumot célszerűen 0,05 - 2 súly% mennyiségi arányban keverhetjük a kezelendő állatok takarmányához. Megjegyzendő, hogy az említett betegségek gyógykezelésére adott esetben alkalmazandó adagolás számottevő mértékben függ a kezelendő állatok testsúlyától és állapotától. Légzsák-gyulladás (sacculitis) kezelésére az FR-02A antibiotikumot előnyösen parenterális úton, PPLO-fertőzés és coccidiosis kezelése esetén viszont előnyösen orális úton alkalmazzuk. Az állatok fejlődésének elősegítésére történő alkalmazás esetén az FR-02A antibiotikumot előnyösen a takarmányhoz kevert alakban adjuk be az állatoknak. A találmány szerinti eljárás gyakorlati kiviteli módjait közelebbről az alábbi példák szemléltetik. Meg kell jegyezni, hogy a találmány köre semmiképpen sincs e példákra korlátozva, a szakértő számára nyilvánvaló, hogy a leírt konkrét kiviteli módoktól és kísérleti körülményektől igen sokféle eltérés és a szakmabeliek számára kézenfekvő változtatás lehetséges anélkül, hogy ezzel túllépnők a találmány kereteit. 1. példa Az FR—02A antibiotikum termelése Streptomyces lactamdurans NRRL 3802 mikroorganizmussal 10 végzett rázólombikos fermentáció útján. Inokulumként a Streptomyces lactamdurans NRRL 3802 törzs liofilizált kultúráját alkalmazzuk. Egy 250 ml-es, három-terelőlapos Erlenmeyer-15 -lombikba 40 ml első fokozatbeli inokulum-tápközeget viszünk be, amelynek összetétele az alábbi: Első fokozatbeli inokulum-tápközeg: primer élesztő 1% desztillált vízben 20 pH nátrium-hidroxiddal beállítva: 7,0. Ehhez az első fokozatbeli inokulum-táptalajhoz hozzáadjuk a liofilizált kultúrát, majd forgó rázó-25 készülékben, percenként 220 fordulattal rázatva, 28 C° hőmérsékleten inkubáljuk a kultúrát. Két napi inkubálás után 1 ml első* fokozatbeli inokulum-kultúrát átoltunk egy ugyanilyen 30 250 ml-es Erlenmeyer-lombikban levő 40 ml második fokozatbeli inokulum-tápközegbe, ennek összetétele: Második fokozatbeli inokulum-tápközeg: 35 Ardamine YEP (99F) tápanyag 1%, desztillált vízben pH nátrium-hidroxiddal beállítva: 7,0. 40 Ezt a második fokozatbeli inokulum-kultúrát egy napig inkubáljuk 28 C hőmérsékleten, a fentivel egyező módon rázatva, majd az így kapott kultúrából l-l ml mennyiséget oltunk át tíz közönséges 250 ml-es Erlenmeyer-lombikban elhelye-45 zett 40-40 ml termelő tápközegbe, ennek a tápközegnek az összetétele: Termelő tápközeg: 50 primer élesztő 1% cefresűrítmény 3% glicin 0,05% L-fenil-alanin 0,3% kukoricakeményítő 2,0% 55 dimetil-formamid 1,0 tf.% habzásgátló („Mobil par-S") 0,25 tf.% desztillált vízben, pH nátrium-hidroxiddal beállítva: 7,0. 60 12,5 g Na2S 2 0 3 • 5H 2 0 100 ml desztillált vízben történő feloldása útján nátrhim-tioszulfát-oldatot készítünk. Ezt az oldatot steril szűrőn történő átszűréssel sterilizáljuk, majd az oldatból 1—1 ml mennyiséget adagolunk a 10 termelő-kultúra mind-65 egyikéhez. 6
