169159. lajstromszámú szabadalom • Eljárás pszichofarmakológiailag aktív peptidek előállítására
39 169159 40 Dezamino-Met-Glu-D-His-Phe-Lys-Phe-OH-acetát, Dezamino-Met-Glu-D-His-Phe-D-Lys-Phe-OH-acetát. 16. példa Met- és dezamino-Met-peptidek szulfoxidjai 0,06 millimól Met-csoportot tartalmazó peptidet 5 ml ecetsavban oldunk, majd 15 yul 30%-os hidrogén-peroxidot adunk hozzá. Az elegyet 20 C° hőmérsékleten 1 óra hosszat keverjük, majd 20 mg platinakorom 2,5 ml jégecettel készített szuszpenzióját adjuk az elegyhez. További 30 perces keverés után a reakcióelegyet leszűrjük és a szűrletből az oldószert vákuumban ledesztilláljuk. A kapott maradékot 10 ml terc-butanol - víz elegyben oldjuk és az oldatot liofilizáljuk. Ily módon az alább felsorolt szulfoxidokat kapjuk acetát alakjában, (a megadott Rf-értékeket a 4 : 0,75 : 0,25 : 1 arányú Bu-Py-Ac-víz oldószer-elegyben határoztuk meg). Met(^0)-Glu-D-His-Phe-OH-acetát, Rf 0,22 Met(-0)-Glu-D-His-Phe-Lys-Phe-OH-acetát, Rf 0,15 Met(-*))-Glu-D-His-Phe-D-Lys-Phe-OH-acetát, Rf 0,14 Met(-0)-Glu-D-His-Phe-Lys-Tra-acetát, Rf 0,15 Met(^0)-D-Glu-His-Phe-Lys-Trp-OH-acetát, Rf 0,17 Dezamino-Met(->0)-Glu-D-Hís-Phe-Lys-Phe-OH-acetát, Rf 0,22 Dezamino-Met(-K))-Glu-D-His-Phe-Lys-Tra-acetát. Rf 0,22 Hozamok: 80% és 95% között. 17. példa A Met- és dezamino-Met-peptidek szulfonjai 10 15 20 25 30 35 40 45 50 0,2 millimól Met-csoportot tartalmazó peptidet 0,5 ml víz, 0,1 ml 4n perklórsav és 0,02 ml 0,5 mólos ammónium-molibdát-oldat elegyében oldunk, majd 0,06 ml 30%-os hidrogén-peroxidot adunk az oldathoz. Az elegyet 10-15 C° hőmérsékleten 2 óra hosszat keverjük, majd 25 ml terc-butanol-víz eleggyel hígítjuk. Ezután acetát-fázisú Dowex X-8 gyantát adunk hozzá és 30 percig keverjük, majd az ioncserélő gyantát kiszűrjük és a szűrletet liofilizáljuk. Ily módon az alább felsorolt szulfonokat kapjuk 55 acetát-alakban (a megadott Rf -értékeket szilikagélen, a 4 :0,75 :0,25 : 1 arányú Bu-Py-Ac-víz oldószer-rendszerben, illetőleg a * jellel megjelölteket a 4 : 1 : 1 arányú Bu-Ac-víz oldószer-rendszerben határoztuk meg): 60 tí-Met(-*02 )-GIu-D-His-Phe-Lys-Tra-acetát, Rf 0,20 H-Met(-»02 )-Glu-D-His-Phe-Lys-Phe-OH-acetát, Rf 0,16 65 H-Met(-K)2 )-Glu-D-His-Phe-D-Lys-Phe-OH-acetát, Rf x 0,25 H-Met(-*02 )-Glu-D-His-Phe-Lys-Phe-Gly-OH-acetát, Rf x 0,22 Dezamino-Met(->02 )-Glu-D-His-Phe-Lys-Phe-OH-acetát, Rf -X 0,32 Dezamino-Met(->02 )-Glu-D-His-Phe-Lys-Tra-acetát, Rf * 0,36 H-Meg(-02 )-D-Glu-His-Phe-Lys-Trp-OM-acetát, Rf 0,22 H-Met(-*02 )-D-Glu-His-Phe-Arg-Tra-acetát, Rf 0,16. Hozamok: 80% és 95% között. 18. példa N-Acetil-Met-Glu-D-His-Phe-Lys-Phe-OH-acetát A kiindulási anyagok előállítását szemléltető C) példa 4. szakaszában leírttal egyező módon, N-acetil-Met-N2 H 3 hidrazidot az úgynevezett azid-kondenzációs eljárással a C) példa 3. szakaszában leírt H-Glu(OtBu)-D-His-OMe • 2HC1 dipeptiddel kapcsolunk, majd az így kapott peptid-észtert az A) példa 4. szakaszában leírt eljárással a megfelelő hidraziddá alakítjuk. Ezt a hidrazidot azonnal oldjuk dimetil-formamidban, majd a 13. példa 1. szakaszában leírttal egyező módon az O) példa 4. szakaszában leírt H-Phe-Lys(Boc)-Phe-OH peptidhez kapcsoljuk. Az így kapott védett peptid védőcsoportjait azután a 13. példa 6. szakaszában leírt módon eltávolítjuk és így a kiindulási N-acetil-Met-N2 H 3 vegyületre számítva körülbelül 30%-os hozammal kapjuk a fenti acetátot, amelynek Rf-értéke (szilikagélen, a 4 :0,75 : 0,25 : 1 arányú Bu-Py-Ac-víz oldószer-rendszerben): 0,38. 19. példa H-Met(l,-0)-Glu-D-His-Phe-D-Lys-Phe-OH-acetát A J. Biol. Chem. 169, 477 (1947) közleményben ismertetett H-Met(l,-*0)-OH vegyületet Boc-aziddal való reagáltatás útján a Boc-Met(l .-O)-0H védett aminosavvá alakítjuk át, majd ezt diciklohexil-karboxiimiddel és szukcinimiddel való reagáltatás útján a megfelelő N-hidroxi-szukcinimido-észterré alakítjuk. Ezt a vegyületet azután további tisztítás nélkül a H-Glu(OtBu)-D-His-Phe-D-Lys(Boc)-Phe-OH peptiddel - amelyet a C.2. példa szerint kapott Z-Glu(OtBu)-D-His-N2H 3 és a P.4. példa szerint előállított H-Phe-D-Lys(Boc)-Phe-OtBu kapcsolása, majd a Z védőcsoport hidrogénezéssel történő eltávolítása útján állítottunk elő -reagáltatjuk N-etil-morfolin jelenlétében. így a Boc-Met(l,-+0)-Glu(OtBu)-D-His-Phe-D-Lys(Boc> -Phe-OtBu védett peptid-származékot kapjuk, amelynek Rf -értéke (szilikagélen, a 4:1:1 arányú Bu-Ac-víz oldószer-rendszerben): 0,48. A védőcsoportokat a 13. példa 6. szakaszában leírt módon eltávolítjuk és így a fenti peptid-ace-20
