169159. lajstromszámú szabadalom • Eljárás pszichofarmakológiailag aktív peptidek előállítására
35 169159 36 11. példa H-Met-D-Glu-His-Phe-Arg-Tra, H-Met-D-Glu-His-Phe-Lys-Phe-OH 1. 1,84 g Boc-M;t-D-Glu(OtBu)-His-N2H 3 és 3,2 millimól H-Phe-Arg-Tra (előállítva az M.2. példa szerint) kiindulási anyagok felhasználásával, a 2. példa 1. szakaszában leírttal egyező módon állítjuk elő a pentapeptid-amidot. A reakcióelegyet 0 C° hőmérsékleten 84 óra hosszat állni hagyjuk, majd szárazra pároljuk és a maradékot vizes etilacetáttal felvesszük. A kapott etilacetátos fázist vízzel háromszor mossuk, majd az elkülönített szerves oldószeres oldatot szárítjuk és vákuumban ledesztilláljuk az oldószert. A maradékot dimetil-formamidban oldjuk és ezt az oldatot cseppenként hozzáadjuk etilacetát és petroléter 1 : 1 arányú elegyéhez. A kivált terméket megszárítjuk. Ily módon 1,72 g terméket kapunk, amelynek Rf -értéke (szilikagélen, a 4:0,75:0,25:1 arányú Bu-Py-Ac-viz oldószer-rendszerben): 0,51. A terméket az előzőkben leírt módon trifluor-ecetsawal kezeljük, majd a kapott közbenső termék trifluoracetát-csoportjait az ugyancsak már leírt módon acetát-csoportokra cseréljük ki. Ily módon 82% termelési hányaddal kapjuk acetát-alakban a H-Met-D-Glu-His-Phe-Arg-Tra peptidet, amelynek Rf-értéke szilikagélen, a 4 : 0,75 : 0,25 : 1 arányú Bu-Py-Ac-víz oldószer-rendszerben: 0,17. 2. A fenti 1. szakaszban leírttal egyező módon, a Boc-Met-D-Glu(OtBu)-His-N2 H 3 és H-Phe-Lys(Boc)-Phe-OH (előállítva az O.4. példa szerint) kiindulási anyagokból állítjuk elő a H-Met-D-Glu-His-Phe-Lys-Phe-OH-acetátot, amelynek Rf-értéke (szilikagélen, a 4 : 0,75 : 0,25 : 1 arányú Bu-Py-Ac-víz oldószer-rendszerben): 0,19. 12. példa H-A-Glu-D-His-Phe-Lys-Tra 1. Boc-Met-Glu(OtBu)-D-His-Phé-Lys(Boc)-Tra 1,87 g Boc-Met-Glu(OtBu)-D-His-N2 H 3 hidrazidot 20 ml dimetil-formamidban oldunk, majd a 3. példa 1. szakaszában leírt módon aziddá alakítjuk és ezt az N.2. példa szerint előállított H-Phe-Lys(Boc)-Tra peptiddel kapcsoljuk. A reakcióelegy pH-értékét trietil-aminnal 7,2-re állítjuk be, majd az elegyet 0 C° hőmérsékleten 70 óra hosszat keverjük, azután leszűrjük. A szűrletből a trimetil-formamidot vákuumban ledesztilláljuk, a maradékot etilacetátban oldjuk, az etilacetátos oldatot vízzel, majd vizes 5%-os nátrium-hidrogén-karbonát-oldattal, végül ismét vízzel mossuk, majd az elkülönített etilacetátos fázist szárítjuk és az oldószert ledesztilláljuk. A maradékot etanolban oldjuk, ezt az oldatot cseppenként hozzáadjuk peroxidmentes éterhez és a képződött csapadékot elkülönítjük. Ily módon a fenti terméket kapjuk, amely bomlás közben 203 C°-on olvad. Hozam: 1,9 g. 2. A védőcsoportok eltávolítása 0,5 g fenti módon kapott védett pepiidet 25 ml 90%-os trifluor-ecétsavban oldunk és az oldatot 10 30 percig keverjük. Ezután a képződött trifluor-acetátot az előző példákban leírt módon elkülönítjük, megszárítjuk és acetáttá alakítjuk át. A reakcióelegy szűrletének liofilizálása útján kapjuk a H-Met-Glu-D-His-Phe-Lys-Tra-acetátot, amelynek 15 Rf-értéke (szilikagélen, a 4 :0,75 :0,25 : 1 arányú Bu-Py-Ac-víz oldószer-rendszerben): 0,22.' Hozam: 80%. A fent leírttal egyező módon állítjuk elő a megfelelő kiindulási anyagok egyenértékű mennyiségeinek felhasználásával az alább felsorolt peptidek acetátjait is (az Pf -értékeket szilikagélen, 4 : 0,75 : 0,25 : 1 arányú Bu-Py-Ac-víz oldószer --rendszerben határoztuk meg): 25 H-0-Ala-Glu-D-His-Phe-Lys-Tra-acetát, Pf 0,20 H-Val-Glu-D-His-Phe-Lys-Tra-acetát, Pf 0,22 H-Ala-Glu-D-His-Phe-Lys-Tra-acetát, Pf 0,23 Dezamino-Met-Glu-D-His-Phe-Lys-Tra-acetát, Pf 0,30. 13. példa H-Met-Glu-D-His-Phe-Lys-Phe-OH és származékai 1. Boc-Met-Glu(OtBu)-D-His-Phe-Lys(Boc)-Phe-OH A 9. példa 1. szakaszában leírt módon előállított Boc-Met-Glu(OtBu)-D-His-N3 azid (9,35 g hidrazidot alakítunk át aziddá és a kapott oldatot dimetil-formamiddal 50 ml térfogatra hígítjuk). 1/5 részét 3,2 millimól H-Phe-Lys-(Boc)-Phe-OH-val (előállítva az O.4. példa szerint) kapcsoljuk. A reakcióelegyet trietil-aminnal 7,3 pH-értékre állítjuk, majd 0 C° hőmérsékleten 70 óra hosszat keverjük. Az elegyet 4 Ph-értékre savanyítjuk, az így kapott dimetil-formamidos szuszpenziót azután nyolcszoros térfogatú vízbe öntjük. A kapott csapadékos elegyet 0 C° hőmérsékleten további 3 óra hosszat keverjük, majd a terméket szűréssel elkülönítjük. Ily módon 1,63 g peptidet kapunk, amely bomlás közben 188C°-on olvad. 2. Boc-Met-Glu(OtBu)-D-His-Phe-Lys(Boc)-Phe-NH2 Az 1. szakaszban említett azid-oldat további 1/5 részét 3,2 millimól H-Phe-Lys(Boc)-Phe-NH2 amiddal (előállítva az O.3. példa szerint) kapcsoljuk a reakcióelegyet megsavanyítás nélkül, az 1. sza-18
