169159. lajstromszámú szabadalom • Eljárás pszichofarmakológiailag aktív peptidek előállítására
25 169159 26 ezt a tetrapeptidet, a nyers termék etilacetát és petroléter elegyéből történő átkristályosítása után a hozam 75%. A kristályosítás előtt az etilacetátos oldatot vizes 5%-os citromsav-oldattal, majd vizes 5%-os 5 nátrium-hidrogén-karbonát-oldattal mossuk. A kapott védett tetrapeptid olvadáspontja 78-80 C°, Rf-értéke (szilikagélen, a 8 :2 arányú toluol-etanol oldószer-rendszerben): 0,85. 10 4. H-Phe^D-Lys(Boc)-Phe-Gly-OtBu A 3. szakaszban leírt módon kapott védett 15 tetrapeptid szokásos módon történő katalitikus hidrogénezése útján habszerű alakban kapjuk a H-Phe-D-Lys(Boc)-Phe-Gly-OtBu terméket. E termék Rf-értéke (szilikagélen, a 4 : 0,75 : 0,25 : 1 arányú Bu-Py-Ac-víz oldószer- 20 -rendszerben): 0,57. A találmány szerinti eljárás gyakorlati kiviteli módjait az alábbi példák szemléltetik: 25 1. példa H-Met-D-Glu-His-OH 30 1. Boc-Met-D-Glu(OtBu)-His-OH 2,34 g Boc-Met-D-Glu(OtBu)-His-OMe (előállítva az A.3. példa szerint) 50 ml 50%-os dioxánnal készített oldatához 2,5 ml 2 n nátrium-hidroxid- 35 -oldatot adunk, majd az elegyet 20 C° hőmérsékleten 30 percig keverjük. A reakcióelegyet ezután 7 pH-értékre semlegesítjük, majd vákuumban szárazra pároljuk és a maradékot etilacetát és víz elegyével felvesszük. A vizes réteg pH-értékét 2 n 40 sósavval 4-re állítjuk be. Az elkülönített vizes réteget szárazra pároljuk és a maradékot bekeverjük 25 ml abszolút metanolba, a képződött csapadékot szűréssel' elkülönítjük. A szűrletet szárazra pároljuk. Hozam: 1,9 g. 45 2. H-Met-D-Glu-His-OH-acetát 1 g fenti módon kapott tripeptidet 10 ml 50 90%-os trifluor-ecetsavban oldunk és az oldatot 30 percig keverjük. A reakcióelegyet azután belecsepegtetjük peroxidmentes éterbe, majd a képződött csapadékot szűréssel elkülönítjük és éterrel eldörzsöljük. A száraz maradékot szilárd kálium- 55 -hidroxid felett szárítjuk. Az így kapott terméket 25 ml 1:1 arányú terc-butanol-víz elegyben oldjuk, majd acetát-fázisban levő Dowex X—8 gyantát adunk hozzá, hogy a trifluor-ecetsavat ecetsavra cseréljük ki. Az így kapott elegy végső pH-értéke 60 5—5,4. Az ioncserélőt ezután kiszűrjük és a szűrletet liofilizáljuk. Hozam: 75%. Az így kapott termék Rf-értéke (szilikagélen, 4 : 0,75 : 0,25 : 1 arányú Bu-Py-Ac-víz oldószer-rendszerben): 0,13. 65 2. példa H-A-D-Glu-His-(N-fenil-alkil)-amidok (A = Met, dezamino-Met, 0-Ala, illetőleg Val) 1. Boc-Met-D-Glu(OtBu)-His-PEA 1,87 g Boc-Met-D-Glu(OtBu)-His-N2 H 3 tripeptid-hidrazidot - előállítva a A.4. példa szerint - 20 ml dimetil-formamidban oldunk. Az oldatot 0 C° hőmérsékletre hűtjük, majd 5,94 ml tetrahidrofurános 1,56 n sósavoldatot adunk hozzá, ezt az elegyet -20 C° hőmérsékletre hűtjük és 0,42 ml izoamil-nitritet adunk hozzá. Az ily módon képezett azidot azután hozzáadjuk 3,2 millimól fenil-etil-aminhoz és az elegy végső pH-értékét trietil-aminnal 7,2-re állítjuk. Az elegyet 0 C° hőmérsékleten 70 óra hosszat keverjük, majd vákuumban bepároljuk és a maradékot etüacetátban oldjuk. A szerves oldószeres oldatot vízzel, azután vizes 5%-os nátrium-hidrogén-karbonát-oldattal, végül ismét vízzel mossuk, szárítjuk és az oldószert vákuumban ledesztilláljuk. Ily módon 1,9 g olajszerű terméket kapunk, amelynek Rf-értéke (szilikagélen, 8 :2 arányú benzol- etanol oldószer-rendszerben): 0,51. 2. A fent leírttal egyező módon állítjuk elő a megfelelő komponensekből az alábbi hasonló vegyületeket: Boc-Met-D-Glu(OtBu)-His-Amf, Rr érték (szilikagélen, 8 : 2 arányú benzol-etanol oldószer-rendszerben): 0,49. Boc-Met-D-Glu(OtBu)-His-PPA, Rf-érték (szilikagélen, 8 : 2 arányú benzol-etanol oldószer-rendszerben): 0,51. 3. H-Met-D-Glu-His-(N-fenil-alkil)-amidok acetátjai Az 1. példa 2. szakaszában leírttal egyező módon 1 g Boc-Met-D-Glu(OtBu)-His-PEA peptidet vagy az 1. példa 2. szakaszában említett peptidek valamelyikének azonos mennyiségét trifluorecetsavval reagáltatjuk, majd az így kapott trifluor-acetátot a fent leírt módon acetáttá alakítjuk át. Hozam: 70% és 75% között. Az így kapott acetátok Rf-értékei (szilikagélen, a 4 : 0,75 : 0,25 : 1 Bu-Py-Ac-víz oldószer-rendszerben): H-Met-D-Glu-His-PEA-acetát, Rf = 0,39 H-Met-D-Glu-His-Amf-acetát, Rf = 0,36 H-Met-D-Glu-His-PPA-acetát, Rf = 0,38. 4. A 2. példa 1. szakaszában leírttal egyező módon a B) példában leírt eljárással előállított hidrazidok aziddá alakíthatók, az- így kapott azidokat fenil-etilaminnal kapcsoljuk, majd a védőcsoportokat trifluor-ecetsavval, a 2. példa 13
