169158. lajstromszámú szabadalom • Eljárás pszichofarmakológiailag hatásos peptidek előállítására - antidepresszáns
29 169158 30 át. Az így kapott azidot hozzáadjuk 1 millimól H-Phe-D-Lys(Boc)-PPA-hidrokloridhoz (amelyet az R.4. példában leírt módon állítunk elő), majd az elegy pH-értékét trietilamin hozzáadása útján 7,3-ra állítjuk be. A reakcióelegyet ezután 75 óra hosszat keverjük, majd bepároljuk és a maradékot vízzel háromszor elkeverjük. A végül kapott oldhatatlan részt további tisztítás céljából etilacetátban oldjuk és az oldatot egyenlő térfogatú petroléterbe Öntjük, így a peptid tisztított alakban újból kiválik. Hozam: 60%. Rf 0,31 szerben). 10 (szilikagélen, benzol-etanol 8 :2 rend- 15 H-Met-Glu-His-Phe-D-Lys-PPA-acetát Rf = 0,39 H-Met-Glu-His-Phe-D-Lys-PEA-acetát Rf = 0,38 H-Met-Glu-His-Phe-D-Lys-Amf-acetát Rf = 0,42 H-Met-Glu-His-Phe-D-Lys-HPEA-acetát R„ = 0.35 A fenti Rf -értékeket szilikagélen, a butanol-piridin-ecetsav-víz 2 : 0,75 :0,25 :1 rendszerben határoztuk meg. 11. példa 2. A védőcsóportok eltávolítása A fenti módon kapott védett peptidet az 1. példa 2. bekezdésében ismertetett módon trifluor-ecetsawal kezeljük, amikor is a szabad peptid trifluor-acetátját kapjuk. Ezt azután acetát fázisú Dowex X-8 gyantával történő kezelés útján alakítjuk át a megfelelő H-(a-Me)Ala-Glu-His-Phe-D-Lys-PPA-acetáttá. R{ 0,35 (szilikagélen, a butanol-piridin-ecetsav-víz 2 :0,75 : 0,25 : 1 rendszerben). 3. További hasonló peptidek előállítása: A fent leírttal egyező módon kapjuk az alább felsorolt peptidek acetátjait is: H<a-Me)Ala-Glu-His-Phe-D-Lys-Amf-acetát H<a-Me)Ala-Glu-His-Phe-D-Lys-PEA-acetát H-0-Ala-Glu-His-Phe-D-Lys-PPA-acetát Dezamino-Met-Glu-His-Phe-D-Lys-Amf-acetát R, = 0,33 Rf = 0,35 Rf = 0,30 R, = 0.45 A fenti Rf értékeket szilikagélen, a butanol-piridin-ecetsav-víz 2 : 0,75 : 0,25 :1 rendszerben határoztuk meg. 10. példa H-Met-Glu-His-Phe-D-Lys-fenilalkil-amidok A 9. példában leírttal egyező módon állítjuk elő a Boc-Met-Glu(OtBu)-His-N3 azid (amelyet az A.2. példa szerint előállított hidrazidnak a szokásos módon, izoamil-nitrittel való reagáltatása útján nyerünk) és az R.4. illetőleg R.5. példa szerint előállított dipeptid-amid-származékok egyikének a kondenzációja, majd a kapott termék védőcsoportjainak lehasítása útján az alább felsorolt peptidek acetátjait: • A Met- vagy Dezamino-Met-csoportot tartalmazó 20 peptidek szulfonjainak előállítása 1. 175 mg H-Met-Glu-His-Phe-D-Lys-Phe-OH pepiidet 0,5 ml víz, 0,1 ml 4 n perklórsav és 0,02 ml 0,5 mólos ammónium-molibdát-oldat elegyében oldunk, majd 0,06 ml 30%-os hidrogén-peroxidot adunk az oldathoz. Az elegyet 10 C° körüli hőmérsékleten 2 óra hosszat keverjük, majd terc-butanol és víz elegyének 25 ml-jével hígítjuk, azután acetát-fázisú Dowex X-8 gyantát adunk hozzá. 30 perces keverés után az"*ioncserélő gyantát szűréssel eltávolítjuk és a szűrletet liofilizáljuk. így a H-Met(-»02)-Glu-His-Phe-D-Lys-Phe-OH peptidet kapjuk, amelynek Rf-értéke 0,25 (szilikagélen, a butanol-ecetsav-víz 4:1:1 rendszerben). Hozam: 90%. 25 30 35 A fent leírttal egyező módon állítjuk elő az alább felsorolt további szulfonokat is: 40 45 50 55 60 Peptid: Rf H-Met(-*02 )-Glu-His-Phe-D--Lys-Phe-Gly-OH 0,23 H-Met(^02 )-Glu-His-Phe-D-Lys-PPA 0,32 Dezamino-Met(-+02 )-Glu-His-Phe-D-Lys-Phe-OH 0,33 Dezámino-Met(-K)2 )-Glu-His-Phe-D-Lys-Tra 0,37 (tisztaság: 55% körül) Dezamino-Met(-K)2 )-Glu-His-Phe-D-Lys-Amf 0,42 Dezamino-Met(->-02 )-Glu-His--Phe-D-Arg-Trp-Gly-OH 0,27 (tisztaság: 65% körül) H-Met-(-K)2 )-Gln-His-Phe-D-Lys-Phe-OH 0,29 65 Hozam: 82% és 95% között változik. A fenti Rf értékeket szilikagélen, a butanol-ecetsav-víz 4:1:1 rendszerben határoztuk meg. 15
