169158. lajstromszámú szabadalom • Eljárás pszichofarmakológiailag hatásos peptidek előállítására - antidepresszáns
31 169158 32 12. példa A Met- illetőleg Dezamino-Met-csoportot tartalmazó peptidek szulfoxidjának előállítása 50 mg oxidálandó pepiidet 5 ml ecetsavban oldunk és 0,015 ml 30%-os hidrogén-peroxidot adunk az oldathoz. Az elegyet 20 C°-on 1 óra hosszat keverjük, majd 40 mg platinakorom jégecettel készített szuszpenzióját adjuk hozzá és további 30 percig keverjük. A reakcióelegyből azután kiszűrjük a katalizátort és a szűrletből az ecetsavat vákuumban ledesztilláljuk. A , kapott maradékot terc-butanol és víz 1:1 arányú elegyében oldjuk, majd liofilizáljuk. Ily módon az alábbi szulfoxidokat állítjuk elő a megfelelő peptidekből: Peptid-szulfoxid: R, H-Met(-*0)-Glu-His-Phe-D-Arg-OH H-Met(-+0)-Glu-His-Phe-D-Lys-OH H-Met(^0)-Glu-His-Phe-D-Lys-Trp-OH H-Met(-*0)-Glu-His-Phe-D-Arg-Trp-Gly-OH H-Met(-K))-Glu-His-Phe-D-Lys-Phe-OH H-Met(-K))-Glu-His-Phe-D-Lys-PPA H-Met(->0)-Glu-His-Phe-D-Lys-Tra Dezamino-Met(->0)-Glu-His-Phe-D-Lys-Phe-OH Dezamino-Met(->0)-Glu-His-Phe-D,-Lys-Tra Dezamino-Met(-H3)-Glu-His-Phe-D-Lys-PPA 0,23 0,22 0,26 10 15 Az említett kondenzációs reakciót N-etil-morfolin jelenlétében folytatjuk le. A kapott Boc-L-Met(l,-H))-Glu(OtBu)-His-Phe-D-Lys(Boc)-Phe-OH Rf-értéke 0,45 (szilikagélen, a butanol-ecetsav-víz 4:1:1 rendszerben). A védőcsoportok eltávolítása az előző példákban ismertetett módon, trifluor-ecetsawal való kezelés útján történik, a kapott terméket azután az előzőkben leírt módon acetáttá alakítjuk át. A kapott H-L-Met(l,-O)-Glu-His-Phe-D-Lys-Phe-0H-acetát Rf-értéke 0,23 (szilikagélen, a butanol-piridin-ecetsav-víz 2 :0,75 :0,25 :1 rendszerben). Ugyanilyen módon állítjuk elő Boc-L-Met(drK))-OH védett aminosavból kiindulva a H-L-Met(d,-K))-Glu-His-Phe-D-Lys-Phe-OH-acetátot. A kiindulási anyagként alkalmazott védett aminosav op.-ja: 135 C°. 25 0,16 0,20 0,19 0,17 0,19 30 0,24 0,17 20 14. példa Szilárd gyógyszerkészítmény előállítása 35 Hozam: 80% és 95% között változik. 40 A fenti Rf -értékeket szilikagélen, a butanol-piridin-ecetsav-víz 4 : 0,75 :0,25 : 1 rendszerben határoztuk meg. 45 13. példa H-Met(l,^0)-Glu-His-Phe-D-Lys-Phe-OH előállítása Boc-azid és H-L-Met(l,^0)-OH [vö. J. Biol. Chem, 169, 477, (1947) reagáltatása útján Boc-L-Met(l,-K))-OH-ot állítunk elő, op.: 68 C°, ta]0° = —58° (c = 1, dimetil-formamidban). Ezt az N-védett aminosavat diciklohexil-karbodiimiddel és N-hidroxi-szukcinimiddel való reagáltatás útján a megfelelő N-hidroxi-szukcinimido-észterré alakítjuk át. Az így kapott aktív észtert azután azonnal felhasználjuk a H-Glu(OtBu)-His-Phe-D-Lys(Boc)-Phe-OH védett peptiddel való kondenzációhoz. [Az említett védett pepiidet oly módon állítjuk elő, hogy Z-Glu(OtBu)-His-azidot H-Phe-D-Lys(Boc)-Phe-OH-val kondenzálunk, majd a Z-csoportot hidrogénezéssel lehasítjuk.] 50 55 60 65 2,5 mg karboximetil-cellulózból, 20 mg keményítőből és 68,5 mg tejcukorból, az említett anyagok összekeverése és a szokásos módon történő granulálása útján granulátumot készítünk, és ehhez 7,5 mg H-Met-Glu-His-Phe-D-Lys-Phe-OH peptidet, 1 mg talkumot és 0,5 mg magnézium-sztearátot keverünk, majd e keverékből 100 mg súlyú tablettát sajtolunk. 15. példa Injekciós készítmény előállítása 100 mg H-Met(^0 2)-Glu-His-Phe-D-Lys-Phe-OH peptidet 10 ml injekció céljaira alkalmas és nitrogéngázzal telített vízben oldunk, majd az oldat pH-értékét sósavvaj 4-re állítjuk. Az oldatot membrán-szűréssel sterilizáljuk. Az így kapott steril oldatból 0,5-0,5 ml-t 20 darab 2 ml-es ampullába töltünk és az ampullák tartalmát liofilizáljuk, majd az ampullákat lezárjuk. A fenti injekciós készítményhez külön ampullákban oldószert készítünk oly módon, hogy injekció céljaira alkalmas és nitrogéngázzal telített vízben 2 mg/liter nátrium-acetát *. 3 H2 O-t és 8 mg/ml nátrium-kloridot oldunk. Az oldatot membrán-szűréssel sterilizáljuk, ampullákba töltjük és az ampullákat 121 C° hőmérsékleten 30 percig autoklávban sterilizáljuk. « 116. példa N-acetil-Met-Glu-His-Phe-D-Lys-Phe-OH előállítása N-acetil-Met-hidrazidot az A. 1. példában leirt módon az azid-kondenzációs módszerrel a H-Glu(OtBu)-His-OMe • 2 HCl peptidészter-dihidrokloriddal kapcsolunk, majd a kapott peptidésztert az A.2. példában leírt módon hidraziddá alakítjuk. 16
