169157. lajstromszámú szabadalom • Eljárás pszichofarmakológiai hatású peptidek előállítására
169157 19 20 2. Hasonlóan állítjuk elő a következő vegyületeket: a) Boc-D-Met-Glu(OtBu)-His-Phe-Lys(Boc)-Phe-Gly(OH) (a B) példa 2. lépésében kapott peptidet a P) példa 3. lépésében kapott peptiddel kondenzáljuk), b) dezamino-Met-Glu(OtBu)-His-Phe-Lys(Boc)-Phe-Gly-OH (az F) példa 3. lépésében kapott peptidet a P) példa 3. lépésében kapott peptiddel kondenzáljuk), c) Boc-Met-Gln-His-Phe-Lys(Boc)-Phe-Gly-OH (a G) példában kapott peptidet a P) példa 3. lépésében kapott peptiddel kondenzáljuk), d) Boc-Gly-Glu(OtBu)-His-Phe-Lys(Boc)-Phe-Gly-OH (az E) példa 2. lépésében kapott peptidet a P) példa 3. lépésében kapott peptiddel kondenzáljuk). 3. Az 1. és 2. lépésben kapott peptidek védőcsoportjainak lehasítása A megfelelő peptidet 90%-os trifluorecetsavban oldjuk, és az oldatot 1 órán át szobahőmérsékleten keverjük. Az oldószert lepároljuk, a maradékot vízben felvesszük, majd liofilizáljuk. A terméket szilárd káliumhidroxid fölött szárítjuk, majd 1 : 1 arányú terc-butanol-víz elegyben oldjuk, az oldathoz acetát-formájú Dowex X 8 ioncserélő gyantát adunk, és a szuszpenziót körülbelül 1,5 órán át keverjük. Ezután az ioncserélő gyantát kiszűrjük, és a szűrletet liofilizáljuk. A következő peptideket acetátjait kapjuk: a) H-Met-Glu-His-Phe-Lys--Phe-Gly-OH • HAc Rf = = 0,27 b) H-D-Met-Glu-His-Phe-Lys-Phe-Gly-OH • HAc Rf = = 0,28 c) dezamino-Met-Glu-His-Phe-Lys-Phe-Gly-OH • HAc Rf = = 0,31 d) H-Met-Gln-His-Phe-Lys-Phe-Gly-OH • HAc Rf = = 0,29 e) H-Gly-Glu-His-Phe-Lys-Phe-Gly-OH • HAc Rf = = 0,25 Az Rf -értékeket szilikagél-lemezen 2 : 0.75 : 0,25 : 1 arányú butanol-piridin-ecetsav-víz elegyben határoztuk meg. 4. példa A fenilalanil-részen szubsztituált A-Glu-His-Phe-Arg-Pheáltalános képletű származékok előállítása HAc-sóként (A = Met, Val, Ala vagy dezamino-Met csoport) la) Boc-Met-Glu(OtBu)-His-Phe-Arg-Phe-OH 1,17 g Boc-Met-Glu(OtBu)-His-N2 H 3 (az A) példa 2. lépésében előállított termék) 20 ml dimetilformamiddal készített oldatához 0 C°-on 3 ml 2 n tetrahidrofurános sósavoldatot, majd —20 C°-on 0,27 ml izoamilnitritet adunk. Az elegyet 7 percig keverjük. Ezután az elegyhez 1,58 g H-Phe-Arg-Phe-OH-acetátot (az N) példa 4. lépésében kapott ter-5 mék) adunk, és az elegyet trietilaminnal pH = 7 értékre lúgosítjuk. Az elegyet 70 órán át 0 C°-on keverjük, majd az oldószert vákuumban bepároljuk. A maradékot etilacetátban felvesszük, az oldatot vízzel mossuk, és a szerves fázist szárazra pároljuk. 10 A maradékot etilacetátból átkristályosítjuk. A kapott termék Rf-értéke 0,20 (8 :2 arányú benzol-etanol elegyben). lb) Boc-Met-Glu(OtBu)-His-Phe-Arg-15 -Phe-származékok Az A példa 2. lépésében előállított Boc-Met-Glu(OtBu)-His-N2 H 3 -t a fenti eljárást követve H-Phe-Arg-Phe-NH2 -vei (N) példa 4.2 lépés) vagy 20 H-Phe-Arg-Phe-N(CH 3) 2 -vel (N) példa 4.3 lépés) vagy H-Phe-Arg-Phe-OMe-vel (N) példa 4.1 lépés) kondenzáljuk. A következő termékeket kapjuk: Boc-Met-Glu(OtBu)-His-Phe-25 -Arg-Phe-NH2 Rf = 0,29 Boc-Met-Glu(Ot Bu)-His-Phe-Arg-Phe-N(CH3 ) 2 Rf = 0,32 Boc-Met-Glu(OtBu)-His-Phe-Arg-Phe-OMe Rf = 0,37 30 Az Rf -értékeket szilikagél-lemezen 8 :2 arányú benzol-etanol elegyben határoztuk meg. 1 c) Boc-A-Glu(OtBu)-His-Phe-Arg-Phe-OH 35 általános képletű vegyületek (A = Val vagy Ala) A C) példa 2. lépésében előállított Boc-Val-Glu(OtBu)-His-N2 H 3 -t vagy az F) példa l.lépésé-40 ben előállított Boc-Ala-Glu(OtBu)-His-N2 H 3 -t a fenti eljárást követve H-Phe-Arg-Phe-OH-val [N) példa 4.4 lépés] kondenzáljuk. A következő vegyületeket kapjuk: 45 Boc-Val-Glu(OtBu)-His-Phe-Arg-Phe-OH, és Boc-Ala-Glu(OtBu)-His-Phe-Arg-Phe-OH. 1 d) Dezamino-Met-Gl u( Ot Bu)-His-Phe-Arg-Phe-OH 50 Az F) példa 3. lépésében előállított dezamino-Met-Glu(OtBu)-His-N2 H 3 -t a fenti eljárást követve H-Phe-Arg-Phe-OH-val [N) példa 4.4 lépés] kondenzáljuk. Dezamino-Met-Glu(OtBu)-His-Phe-Arg-Phe-55 -OH-t kapunk. 2. A védőcsoportok lehasítása 250 mg, a fenti módon előállított peptidet 60 10 ml 90%K)s trifluorecetsavban oldunk, és az oldatot 1 órán át 20 C°-on keverjük. Az oldószert lepároljuk, a maradékot vízben felvesszük és liofilizáljuk. A terméket szilárd káliumhidroxid fölött szárítjuk, majd 1 :1 arányú terc-butanol: víz elegy-65 ben oldjuk, és az oldathoz acetát-formájú Dowex 10
