169157. lajstromszámú szabadalom • Eljárás pszichofarmakológiai hatású peptidek előállítására
23 169157 24 alakítjuk, majd az L) példa 1. lépésében előállított H-Phe-Lys(Boc)-Amf, a K) példa 4. lépésében előállított H-Phe-Lys(Boc)-PPA, az L) példa 2. lépésében előállított H-Phe-Lys(Boc)-PEA vagy az L) példa 3. lépésében előállított H-Phe-Lys(Boc)-HPEA peptiddel kondenzáljuk. A kapott peptideket 90%-os trifluorecetsawal kezeljük, majd az aniont Dowex X 8 ioncserélő gyanta (acetát-forma) felhasználásával acetát-ionra cseréljük. A következő peptideket kapjuk: 7. példa Szulfoxid-vegyületek előállítása 1. 45 mg, a 4. példa 2. lépésében előállított H-Met-Glu-His-Phe-Arg-Phe-OH 4 ml ecetsavval készített oldatához 15 iA 30%-os hidrogénperoxidot adunk. Az elegyet 1 órán át körülbelül 20 C°-on keverjük, majd 20 mg platinakorom 2,5 ml jégecettel készített szuszpenzióját adjuk hozzá, és a keverést 30 percig folytatjuk. Az elegyet szűrjük, és a szűrletet vákuumban szárazra pároljuk. A maradékot 10 ml terc-butanol-víz elegyben felvesszük és liofílizáljuk. A kapott H-Met(^0)-Glu-His-Phe-Arg-Phe-OH Rf-értéke 0,20 (szilikagél-lemezen, 4 :0,75 : 0,25 : 1 arányú butanol-piridin-ecetsav-víz elegyben). Hozam: 90%. Hasonlóan állítjuk elő a következő peptid-szulfoxidokat, 85-95%-os hozammá: H-Met(^0)-Glu-His-Phe-Lys-PPA H-Met(-+0)-Glu-His-Phe--Arg-Phe-Gly-OH H-D-Met(-0)-Glu-His-Phe-Lys-Phe-OH dezamino-Met(-K))-Gln-His-Phe-Lys-Amf dezamino-Met(->0)-Glu-His-Phe-Arg-Phe-OMe Rf = 0,36 Rf = 0,28 Rf = 0,19 Rf = 0,41 Rf = 0,34 10 Peptid Kiindulási Rf anyag H-Met-Glu-His-Phe-15 -Lys-PPA • HAc A.2 + K.4 0,40 H-dezamino-Met-Glu-His-Phe-Lys-Amf • HAc F.3 + L.1 0,45 H-0-Ala-Glu-His-Phe-Lys-PPA • HAc D.2 + K.4 0,38 20 H-Met-Glu-His-Phe-Lys-Amf • HAc A.2+L.1 0,39 H-Val-Glu-His-Phe-Lys-PEA • HAc C.2 + L.2 0,43 H-Ala-Glu-His-Phe-25 -Lys-PEA • HAc F.l + L.2 0,42 H-Met-Glu-His-Phe-Lys-HPEA • HAc G +L.3 0,41 Az Rf-értékeket 2 :0,75 :0,25 : 1 arányú buta- 30 nol-piridin-ecetsav-víz elegyben határoztuk meg, szilikagél-lemezen. 35 40 45 50 (Az Rf-értékeket a fenti adszorbensen, a fenti oldószer-eleggyel határoztuk meg.) 8. példa Szulfon-vegyületek előállítása 1. 175 mg, az 5. példa 2. lépésében előállított H-D-Met-Glu-His-Phe-Lys-Phe-OH-t 0,5 ml víz, 0,1 ml 4 n perklórsav, és 0,02 ml 0,5 m ammónium-molibdát elegyében oldunk, és az elegyhez 0,06 ml 30%-os hidrogénperoxidot adunk. Az elegyet 2 órán át körülbelül 10C°-on keverjük, majd acetát-formájú Dowex X 8 ioncserélő gyantát adunk hozzá. A szuszpenziót 30 percig keverjük, a gyantát kiszűrjük, és a szűrletet liofílizáljuk. A kapott H-D-Met(-+0 2)-Glu-His-Phe-Lys-Phe-OH Rf-értéke 0,22 (szilikagél-lemezen, 4:1:1 arányú butanol-ecetsav-víz elegyben). Hozam: 95%. 2. Hasonlóan állítjuk elő az alábbi peptid-szulfonokat 85-95%-os hozammal: H-Met-(->-02 )-Glu-His-Phe-Arg--Phe-Gly-OH Rf = 0,29 dezamino-Met-(-02 )-Glu-His--Phe-Lys-Phe-Gly-OH Rf = 0,29 dezamino-Met(-K)2 )-Glu-His-Phe-Lys-Phe-OMe Rf = 0,38 H-Met(-*)2 )-Glu-His -Phe-Lys-PPA Rf = 0,38 H-dezamino-Met(-02 )-Glu-His-Phe-Lys-Amf Rf = 0,43 Az Rf-értékeket 4:1:1 arányú butanol-ecetsav-víz elegyben határoztuk meg, szilikagél-lemezen. 55 60 65 9. példa H-L-Met(l,^0)-Glu-His-Phe-Arg-Phe-OH előállítása HAc Boc-azid és H-L-Met(l,-K))-OH reakciójával [lásd: J. Biol. Chem. 169, 477 (1947)] Boc-L-Met(I,^0)-OH-t állítunk elő (op.: 68 C°, [a]l° = -58° (c=l, dimetilformamidban)]. A kapott N-védett aminosavat diciklohexilkarbodiimiddel és borostyánkősavval reagáltatjuk. Az így kapott N-hidroxi-szukcinimidoésztert N-etil-morfolin jelenlétében H-Gl u(OtBu)-His-Phe-Arg-Phe-OH-val kondenzáljuk (az utóbbi vegyület előállítása során Z-Glu(OtBu)-His-azidot H-Phe-Arg-Phe-OH-val kondenzálunk, majd a Z védőcsoportot hidrogénezéssel lehasítjuk). A kapott Boc-L-Met(l,^0)-Glu-(OtBu)-His-Phe-Arg-Phe-OH Rr értéke 0,18 (szilikagél-rétegen, 8 :2 arányú benzol-etanol elegyben). A kapott peptidet a korábban leírt módon trifluorecetsawal kezeljük, majd acetátjává alakítjuk. A kapott H-L-Met(lrO)-Glu-His-Phe-Arg-Phe-OH-HAc Rr értéke 0,28 (szilikagél-lemezen, 4 :0,75 : 0,25 : 1 arányú butanol-piridin-ecetsav-víz elegyben). 12
