169156. lajstromszámú szabadalom • Eljárás a vazopresszin 1-5 fragmentjét tartalmazó, pszichofarmakológiailag hatásos peptidek előállítására
13 169156 14 E. A védőcsoport lehasítása a D. lépés szerint előállított peptidekről Oxigénmentes nitrogén atmoszférában 100 mg D. lépés szerint előállított peptidet feloldunk 50 ml 5 száraz folyékony ammóniában, majd az oldathoz a kék szín fennmaradásáig nátriumot adunk. Az oldatot ammóniumklprid hozzáadásával elszíntelenítjük, az ammóniát hagyjuk elpárologni, a kapott párlási maradékot oxigénmentes nitrogén atmoszférában 50 ml oxigénmentes 0,02 n sósavval elegyítjük és az elegy- 10 ml-ét liofilizáljuk. A maradékot nitrogén atmoszférában tároljuk. Ezzel az eljárással az alábbi vegyületet állítottuk elő közel 100%-os hozammal, nátriumkloriddal szennyezett állapotban: Peptid-dimerek F. 1. H-Cys-Tyr-Phe-Glu(NH2 )-Asp(NH 2 )-OH I H-Cys-Tyr-Phe-Glu(NH2 )-Asp(NH 2 )-OH F.2. H-Cys-Tyr-Phe-Glu(NH2 )-Asp(OH>OH I H-Cys-Tyr-Phe-Glu(NH2)-Asp(OH)-OH F.3. H-Cys-Tyr-Phe-Glu(OH)-Asp(OH>OH I H-Cys-Tyr-Phe-Glu(OH)-Asp(OH)-OH F.4. H-Cys-Tyr-Phe-Glu(OH)-Asp(NH2 )-OH I H-Cys-Tyr-Phe-Glu(OH)-Asp(NH2 )-OH F.5. H-Cys-Tyr-Phe-Glu(OH)-Asp(NHCH3 )-OH I H-Cys-Tyr-Phe-Glu(OH)-Asp(NHCH3)-OH F.7. H-Cys-Tyr-Phe-Glu(NH2 )-Asp(OH)-N(CH 3 ) 2 I H-Cy s-Tyr-Phe-Glu(NH2 )-Asp(OH>N(CH3 ) 2 F.6. H-Cys-Tyr-Phe-Glu(NH2 )-Asp(OH)-NH 2 I H-Cys-Tyr-Phe-Glu(NH2)-Asp(OH>NH 2 F.8. H-Cys-Tyr-Phe-Glu(NH2 >Asp(OH)-OCH 3 I H-Cys-Tyr-Phe-Glu(NH2)-Asp(OH)-OCH 3 F.9. H-Cys-Tyr-Phe-Glu(NH2 )-Asp(OH)-OC 1 1H 2 3 I H-Cys-Tyr-Phe-Glu(NH2 )-Asp(OH)-OC j, H2 3 Összehasonlítás céljából közöljük az E.2., E.3., F.2. és F.3. jelű peptidek sziliicagél-adszorbensen, F. Dimerek előállítása az E. lépésben előállított peptidekből Az E. lépésben előállított 40 ml pentapeptid-oldatot dimer készítésére használjuk fel. A dimerizálást úgy végezzük, hogy két molekula peptapeptidet oxidálunk és így a peptideket —S—S— híddal összekötjük egymással. A fenti 40 ml oldat pH-ját 6,6-ra állítjuk be, majd a tiol-csoportok semleges reakciójáig levegőt buborékoltatunk az oldaton keresztül, s így a peptapeptidet dimerizáljuk. Az oldat pH-ját ezután ecetsavval 4-re állítjuk be, ekkor a dimer vegyület főtömege leválik, míg a szervetlen anyag oldatban marad. A kivált szilárd anyagot leszűrjük és szárítjuk. Ilyen módon az alábbi pentapeptid-dimereket állítottuk elő 75-95%-os hozammal: A peptid-dimerek Rf -értéke butanol— —piridin-ecetsav—víz 4:3/4:1/4:1 arányú elegyében végzett rétegkromatografálás során, szilikagélen 0,15 0,10 0,08 0,13 0,13 0,16 0,16 0,16 0,18 4:1:1 arányú butanol—ecetsav—víz eleggyel meghatározott Rf-értékeit is. 7
