169119. lajstromszámú szabadalom • Eljárás nem-patogén bovin rhinotracheitis vírustörzs és élő legyengített bovin rhinotracheitis virus-vakcina előállítására

7 169119 8 Az IBR RLB 106 törzs hőmérséklet-érzékeny jellegének állandóságát in vitro és in vivo körülmények között vizsgáltuk. A következő kísérleteket hajtottuk végre: a) Vizsgálatok in vitro körülmények között: Az IBR RLB 106 törzset primer embrionális bovin vese (PFBK) sejttenyészeten 30C°-on, 38 C°-on, illetve 39 C°-on sorozattenyésztésnek vetettük alá. Az eredményeket a 2. táblázatban közöljük. A táblázat adataiból megállapítható, hogy a 5 törzs hőmérséklet-érzékeny jellege 30 C°-on és 38 C°-on végzett 9 sorozattenyésztési lépés után is fennmaradt, míg a törzs 39 C°-on végzett két tenyésztési lépés után már nem növekedett. 2. táblázat Sorozattenyésztés hőmérséklete Tenyésztési lépés száma Vírus-faktor (TCIDso egységekb 30 C°-on )log10

/0,lml en 39 C°on Faktorkülönbség 30 C° 1. 5,75 <0,5 >5,25 3. 4,75 <0,5 >4,25 9. 5,25 <0,5 >4,75 38 C° 1. 2,50 <0,5 >2 3. 2,25 <0,5 >1,75 9. 3,75 <0,5 >3,25 39 C° 1. 0,75 <0,5 >0,25 3. 0 0 0 b) Vizsgálatok in vivo körülmények között 35 hőmérsékleten (35 C° és 37 C°) és meg nem engedett hőmérsékleten (39 C°) titráljuk. Az eredmé-Az IBR RLB 106 törzzsel 3-4 hónapos nőstény nyéket a 3. táblázatban közöljük. A táblázat adaborjakat („Middle Belgium" faj) oltunk be, majd a taiból kitűnik, hogy az IBR RLB 106 törzs in vivo törzseket a beoltott állatok orrából újra elkülönít- körülmények között is megtartja hőmérséklet-érzéjük. Az újra elkülönített törzseket megengedett 40 kény jellegét. 3. táblázat Állatszám 1 Kezelés és elkülönítés közötti idő, nap Forrás 35 C°-on Vírus-faktor (TCIDso) log! 0/0,1

ml egységekben 37C°-on 39C°-on 72 10 orrkenet nv 4,7 0 74 9 orrkenet nv 4,3 0,3 88 6 orrkenet nv 4,3 0,2 2 5 orrkagylócsont 5,5 nv 1,5 1 5 orrkagylócsont 5,5 nv 1,2 2 5 mandula 5 nv 0 5 6 orrkagylócsont 4,25 nv 0 nv = nem vizsgáltuk 65 4