169032. lajstromszámú szabadalom • Eljárás O-szubsztituált 7béta-amino-3-cefem-3-ol-4-karbonsav- származékok előállítására
49 169032 50 léten keverjük, majd csökkentett nyomáson bepároljuk. A 7j3-(D-a-terc-butil-oxi-karbonil-amino-a-fenil-acetil-amino)-cefam-3-on-4|-karbonsav-difenil-metil-észtert tartalmazó maradékot 150 ml metanolban oldjuk, melyhez 0C°-ön, a maradandó sárga színe- 5 ződésig dietil-éteres diazo-n-bután oldatot adunk. A reakcióelegyet 15 perc után csökkentett nyomáson bepároljuk és a maradékot preparatív vékonyréteg-kromatográfiával (szilikagél, vastagság 1,5 mm, 16 x 100 cm-es lemezek, rendszer: toluol és etil-ace- 10 tát 75 :25) tisztítjuk. Az Rf = 0,35 értéknél ultraibolya fény alatt látható zóna a 3-n-butil-oxi-70-- ( D -a - terc-bütil-oxi-karbonü-amino-a-Senil-acetil-amino)-3-cefem-4-karbonsav-difenil-metil-észter, melyet szilikagélen ismételten kromatografálva tisztítunk és 15 dioxánból liofilizálunk. Kitermelés: 1,58 g. [aß0 = +11° ± 1° (c = 0,98, kloroformban), ultraibolya abszorpciós spektrum (95%-os vizes etanolban): *max=264mju (e = 6100), 20 infravörös abszorpciós spektrum (metilén-kloridban): jellemző sávok 2,88 ß, 5,63 ß, 5,84 ß (váll), 5,88 ju, 6,26 fi és 6,71 ß. 11. példa 0,5 g 3-n-butil-oxi-7j3-(D-a-terc-butil-oxi-karbonil-amino-a-fenil-acetil-amino)-3-cefem-4-karbonsav-dife- 30 nil-metil-észter, 1 ml anizol és 15 ml trifluor-ecetsav elegyét 15 percig 0 C°-on állni hagyjuk, majd 200 ml hideg toluollal hígítjuk és csökkentett nyomáson bepároljuk. A maradékot dietil-éterrel elkeverjük és a porszerű, színtelen maradékot szűrjük, 35 dietil-éterrel mossuk és nagyvákuumban szárítjuk. Ilyen módon a 3-n-butil-oxi-7/3-(D-a-fenil-glicil-amino)-3-cefem-4-karbonsav trifluor-acetát sóját kapjuk, melyet 5 ml vízben oldunk. Az oldatot kétszer, egyenícént lOml etil-acetáttal mossuk és a vizes 40 fázist metanolban oldott trietil-amin hozzáadásával 5,0 pH-ra beállítjuk.Az oldatot ezután csökkentett nyomáson bepároljuk, a maradékot kis mennyiségű acetonban felvesszük és a zavarosodásig dietil-éterrel hígítjuk. A belső só formában levő 3-n-butil- 45 -oxi-7/3-(D-a-fenil-glicil-amino)-3-cefem-4-karbonsavat mint kristályos csapadékot kapjuk, melyet leszűrünk. Olvadáspont: 141-142 C°, vékonyréteg-kromatogram (szilikagél): 50 Rf~0,21 (rendszer: etil-acetát, piridin, ecetsav, víz 62:21 :6: 11), ultraibolya abszorpciós spektrum (0,1 n vizes nátrium-hidrogén-karbonát oldatban): *max = 267 m/x (e = 7300). Kitermelés: 0,085 g. 55 12. példa •10 ml metanolban oldott 0,2 g 3-metoxi-7j3-fenil- 60 ácetil-amino-3-cefem-4-karbonsavat 0 C°-on, a' maradandó sárga színeződésig diazo-metán dietil-éteres oldatává reagáltatunk, majd csökkentett nyomáson bepároljuk. A maradékot szilikagélen kromatografáljuk és a 3-metoxii 7/3-fenil-acetil-amino-3-cefem4- 65 -karbonsav-metil-észtert 3:1 arányú toluol és etil-acetát eleggyel eluáljuk, majd metilén-klorid és hexán elegyből átkristályosítjuk. Olvadáspont: 171-174 C°, [aß0 = +102° ± 1° (c = 0,95, kloroformban), ultraibolya abszorpciós spektrum (95%-os vizes etanolban): Amax =265mM (e = 6250), infravörös abszorpciós spektrum (metilén-kloridban): jellemző sávok 2,94 ß, 5,62 ß, 5,76 ß, 5,93//, 6,24 ß és 6,65 ß. Kitermelés: 0,12 g. 13. példa 2 ml acetonban 0,02 g nyers 7/3-(D-a-terc-butil-oxi-karbonil-amino-a-fenil-acetil-amino)-cefam-3-on-4£-karbonsav-difenil-metil-észterhez 0,1 ml dimetil-szulfátot és 0,005 g vízmentes kálium-karbonátot adunk, és az elegyet 16 óra hosszat nitrogénatmoszférában, szobahőmérsékleten keverjük. A reakcióelegyet csökkentett nyomáson bepároljuk, a maradékot metilén-kloridban felvesszük, telített vizes nátrium-klorid-oldattal mossuk, nátrium-szulfáton szárítjuk és csökkentett nyomáson bepároljuk. A maradékot preparatív rétegkromatográfiával, szilikagélen tisztítjuk. Ultraibolya fény alatt (X = 254 mß) látható mindkét zónát elkülönítjük. Ilyen módon Rf~0,61 értékkel (szilikagél, rendszer: dietil-éter) a 3-metoxi-7/3-(D-a-terc-butil-oxi-karbonil-amino-a-fenil-acetil-amino)-2-cefem4a-karbonsav-difenil-metil-észtert, metilén-klorid «s pentán elegyből átkristályosítva olvadáspont 166—168 C°, (kitermelés: 0,005 g) és Rf ~0,31 (szilikagél, rendszer: dietil-éter) értékkel az amorf 3-metoxi-7/3-(D-a-terc-butil-oxi-karbonü-amino-a-fenil-acetil-amino)-3-cefem4-karbonsav-difenil-metil-észtert (kitermelés: 0,008 g) kapjuk. 14. példa 8,2 g 7|3-(D-a-terc-butil-oxi-karbonil-amino-a-fenil-acetil-amino)-3-metilén-cefam4a-karbonsav-difenil-metil-észter és 800 ml metilén-klorid —70 C°-ra hűtött oldatát 34 percig oxigén-ózon gázzal (0,49 mól ózon/perc) kezeljük, majd^ az elegyhez 3,5 ml ,dimetil-szulfldot adunk, 1 óra hosszat -70 C°-on és 2 óra hosszat szobahőmérsékleten keverjük. A reakcióelegyet csökkentett nyomáson bepároljuk, majd az olajos maradékot, mely a 7ß-(D-a^terc-butil-oxi-karbonil-amino-a-feniliacetil-ammo)-cefam-3-on4£-karbonsav-difénil-metil-észtert tartalmazza, 300 ml benzolban oldjuk, 3,28 g l-etil-3-(4-metil-fenil)-tria: zent adunk hozzá, 1 óra hosszat nitrogénatmoszférában visszafolyatás közben melegítjük, és azután csökkentett nyomáson bepároljuk. A maradékot 360 g szilikagélen kromatografáljuk, az amorf 3-eto x i - 7 ß -(D-a-terc-butil-oxi-karbonil-amino-a-fenil-acetil-amino)-3-cefem4-karbonsav-difenil-metil-észtert 4:1 arányú toluol és etil-acetát eleggyel eluáljuk. Kitermelés: 3,42 g. 25
