169032. lajstromszámú szabadalom • Eljárás O-szubsztituált 7béta-amino-3-cefem-3-ol-4-karbonsav- származékok előállítására
169032 45 46 •acetát 3:1 arányú eleggyel eluálva az amorf 3-metoxi-7/3-(D-a-terc-butU-oxi-karbonil-amino-a-fenil-acetil-amino)-3-cefem-4-karbonsav-difenil-metil-észtert kapjuk. Kitermelés: 2,13 g. Vékonyréteg-kromatogram (szilikagél): Rf = 0,22 (rendszer: toluol és etilacetát 3:1), infravörös abszorpciós spektrum (metilén-kloridban): jellemző sávok 2,94 ß, 5,62 M, 5,85 M, 6,23 ju és 6,70/1-A kiindulási anyagot a következő módon állítjuk elő: egy kromatografáló oszlopot (átmérő 3 cm) 350 g szemcsés cinkkel megtoltunk, melyet 10 percig 0,1 n sósavban oldott higany(II)-klorid 0,1 mólos oldatával amalgámozunk, majd bő vízzel és végül kis mennyiségű 1 n sósavoldattal mosunk. 55 g zöld króm(in)-klorid-hexahidrát, 55 ml víz és 11 ml 2 n kénsav oldatát a redukálócsőbe öntjük, és az átfolyás sebességét úgy szabályozzuk, hogy a króm(II)-klorid-oldat tiszta kék színnel az alatta levő, nitrogénatmoszférában tartott reakcióedénybe csepegjen. A kék króm(II)-klorid oldathoz végül 92 g nátrium-acetát és 180 ml levegőmentes víz oldatát adjuk, melynél az oldat vörösre színeződik és finom kristályos króm(II)-acetát kicsapódik. Az adagolás befejezése után a felső oldatot leöntjük és a króm(II)-acetátot kétszer, egyenként 250 ml levegőmentes vízzel mossuk. A nedves króm(II)-acetáthoz 10,0g 3-acetil-oxi-metil-7j3-(D-a-terc-butil-oxi-karbonil-amino-a-fenil*acetil-amino)-3-cefem4-karbonsav és 200 ml dimetil-szulfoxid oldatát adjuk és a reakcióelegyet 15 óra hosszat nitrogénatmoszférában szobahőmérsékleten keverjük. A feldolgozáshoz a reakcióelegyet 30 percig levegőztetjük, majd 1000 g nátrium-formájú polistirol-szulfonsav ioncserélő gyanta (Dowex 50 W) és 1000 ml víz hozzáadásával 1 óra hosszat keverjük. Az ioncserélő gyanta eltávolítása után az oldatot 6 n sósavval 2 pH-ra beállítjuk és a vizes fázist háromszor egyenként 2000 ml etil-acetáttal extraháljuk. A szerves extraktumot 1000 ml telített, vizes nátrium-klorid-oldattal mossuk, magnézium-szulfáton szárítjuk és bepároljuk. A kapott nyers terméket 100 ml metanolban oldjuk, 30 ml benzolban oldott 6g difenil-diazo-metánt adunk hozzá és 1 óra hosszat szobahőmérsékleten keverjük. A bepárlás után kapott nyers terméket 500 g szilikagélen kromatografáljuk, a 3-metilen-7ß-(D-a-terc-butil-oxi-karbonil-amino-a-fenil-acetil-amino)-cefam-4a-karbonsav-difenil-metil-észtert és petrolétert 4 :1 arányú elegyével eluáljuk, majd metilén-klorid és hexán elegyből átkristályosítjuk. Olvadáspont: 156-158 C°, [ [a]D = -50° ± 1° (c = 0,713, kloroform), ultraibolya "abszorpciós spektrum (95%-os vizes metanolban): Xmax = 258 m/u (? = 990), infravörös abszorpciós spektrum (metilén-kloridban): jellemző sávok 2,94 ju, 5,64 ju, 5,74 ß, 5,88 ß (váll) és 6,71 ju. 5. példa 2,44 g 3-metoxi-70-(D-a-terc-butil-oxi-karbonil-amino-a-fenil-acetil-amino)-3-cefem-4-karbonsav-dife-5 nil-metil-észter, 2,1 ml anizol és 41 ml trifluor-ecetsav elegyét 5 percig szobahőmérsékleten állni hagyjuk, majd bepároljuk. A maradékot 200 ml toluol és kloroform 3:1 arányú elegyében felvesszük, bepároljuk és nagyvákuumban szárítjuk. A maralt dékot dietil-éterrel többször digeráljuk, leszűrjük és szárítjuk. A kapott világosbarna, porszerű 3-metoxi-7j3-(D-a-fenil-glicil-amino)-3-cefem4-karbonsav-trifluor-acetátot 5 ml metanol, 5 ml dietil-éter és 0,5 ml víz elegyében oldjuk, majd 3%-os trietil-amin éteres 15 oldat becsepegtetésével az oldatot 4 pH-ra beállítjuk, amikor pelyhes, barna csapadék válik ki. To- , vábbi dietil-éter hozzáadásával a kicsapást teljessé tesszük, a csapadékot leszűrjük, majd háromszor etanolban oldjuk és dietil-éterrel kicsapjuk. Ilyen 20 módon a 3-metoxi-7j3-(D-a-fenil-glicil-amino)-3-cefem-4-karbonsav amorf, belső sóját kapjuk. Vékonyréteg-kromatogram (szilikagél) Rf = 0,14 (rendszer: etil-acetát, n-butanol, piridin, ecetsav, víz 42:21:21:6:10). Kitermelés: 25 1,61 g. 6. példa 25,7 g 3-metilén-7|8-(D-a;-terc-butil-oxi-karbonil-30 -amino-a-fenil-acetil-amino)-cefam-4a-karbonsav-difenil-metil-észter és 2500 ml metilén-klorid oldatát —60C°-ra hűtjük és 110 percig 0,45 mmól ózon/ /perc sebességgel oxigén-ózon gázzal kezeljük. A reakcióelegyhez ezután 8 ml dimetil-szulfidot 35 adunk, 1 óra hosszat —70 C°-on, és 2 óra hosszat szobahőmérsékleten keverjük éss csökkentett nyomáson bepároljuk. A maradékot 200 ml metanolban oldjuk és a 7/?-(D-a-terc-butil-oxi-karbonil-amino-a-fenil-acetil-amino)-cefam-3-on-4|-karbonsav-dife-40 nil-metil-észtert tartalmazó oldathoz 0 C°-on, a maradandó sárga színeződésig, diazo-metán dietil-éteres oldatot adunk. A reakcióelegyet 15 percig keverjük, majd csökkentett nyomáson bepároljuk és a maradékot 1100g szilikagélen kromatografáljuk. A 45 3-metoxi-7j3-(D-a-terc-butil-oxi-karbonil-amino-a-fenil-acetfl-amino)-2-cefem-4a-karbonsav-difenil-metil-észtert dietil-éterrel eluáljuk, majd metilén-klorid és pentán elegyből átkristályosítjuk. Olvadáspont: 166-168 C°, kitermelés: 4,21 g. 50 [a]l° = +178° + 1° (c = 0,771, kloroformban), vékonyréteg-kromatogram (szilikagél, előhívás jódgőzzel): Rf ~0,61 (rendszer: dietil-éter), ultraibolya abszorpciós spektrum (metanolban): 55 *max = 257 m/u (e = 3550), infravörös abszorpciós spektrum (metilén-kloridban): jellemző sávok 2,96 ju, 5,63 ju, 5,74 p, 5,85 ß (váll), 5,92 ß, 6,16 ju, 6,64 ju (váll) és 6,72 ß. 60 Dietil-éterrel tovább eluálva az' amorf 3-metoxi- 7ß -( D -a -1 e r c-butü-oxi-karbonil-amino-a-fenil-acetil-amino)-3-cefem-4-karbonsav-difenil-metil-észtert kapjuk, melyet dioxánból liofilizálunk. Kitermelés: 65 9,93 g. 23
