168901. lajstromszámú szabadalom • Eljárás 7-[D-alfa-amino-alfa-(p-hidroxifenil)-acetamido]-3-(1,2,3-triazol-5-il-tiometil)-3-cefém-4-karbonsav-1,2-propilén-glikolát előállítására
11 168901 12 szulfáton átvezetve vízmentesítjük az elkülönített etilacetátos oldatot, majd 15-20 ml térfogatra töményítjük. Ezt a tömény oldatot keverés közben, cseppenként körülbelül 400 ml, Erlenmeyer-lombikban levő ciklohexánhoz adjuk. 0,5 órán át keverjük az oldatot, a kivált szilárd halmazállapotú terméket szűréssel elkülönítjük. Az elkülönített szilárd halmazállapotú 7-[D-a-terc-butoxi-karbonilamino-a(p-hidroxtfenü)-acetamido]-3-(l,2,3-triazol-5-il-tiometil)-3-cefém-4-karbonsavat levegőn szárítjuk. A termék súlya 1,75 g. 80 ml 98-100%-os hangyasavban 3,5 g 7-[D-a-terc-butoxi-karbonüamino-a-(p-hidroxifenil)-acetamido]-3-(l,2,3-triazol-5-il-tiometil)-3-cefém4-karbonsavat oldunk, az oldatot 2 órán át szobahőmérsékleten keverjük. A hangyasavat csökkentett nyomáson, legfeljebb 40 C° külső hőmérsékleten desztillációval eltávolítjuk, végül 3 x 30 ml toluollal azeotrop desztillációt végzünk. A desztillációs maradékként kapott szilárd halmazállapotú terméket foszforpentoxid jelenlétében, erősen csökkentett nyomású térben szárítjuk. így 3,5 g habos anyagot kapunk. 2g habos terméket keverés közben víz és metanol 8 : 2 arányú elegyének 300 ml-ében oldunk. Elkülönítjük az oldószert a 0,3 g súlyú szilárd halmazállapotú anyagtól, 700 mg Darko KB aktív szénnel derítjük, Celite diatomaföldből készült szűrőágyon át szűrjük, majd fagyasztva szárítjuk, amiután 0,9 g nyers 7-[D-a-amino-a-(p-hidroxifenil)-acetamido]-3<l,2,3-triazol-5-il-tiometil)-3-cefém-4-karbonsavat kapunk. A termék kristályosítására a következők szerint járunk el. 6 ml 99%-os metanolban 0,2 g nyersterméket szuszpendálunk és felforraljuk a szuszpenziót. Azonnal megszakítjuk a melegítést, az olvadékot „beoltjuk". Ekkor az olvadék kristályos tömeggé dermed. így 0,400 g nyerstermékből összesen 0,211 g 7-[D-a-amino-a-(p-hidroxifenil)-acetamido]-3-( 1,2,3-triazol-5-il-tiometil)-3-cefém-4-karbonsavat kapunk. 56 C° hőmérsékleten, 0,1 Hgmm nyomáson, foszforpentoxid jelenlétében 20 órán át szárítjuk a terméket. Az így kapott anyag 200C°-nál magasabb hőmérsékleten, bomlás közben olvad. Az előállított termék infravörös abszorpciós és mágneses magrezonancia spektruma a várt szerkezetre utal. A mágneses magrezonancia spektrum szerint a termék 1/3 mól metanolt tartalmaz. Elemanalízis C18 H 18 N 6 O s S 2 • H 2 0 • l/3CH 3 OH képlet alapján: számított: C =44,83%, H = 4,38%, N =17,10%, S =13,09%, mért: C =43,97%, H = 4,36%, N =15,84%, S = 6,18%. 175 ml 98—100%-os vízmentes hangyasavban 6,5 g (11,55 mM) 7-[D-a-terc-butoxi-karbonilamino-a-(p-hidroxifenil)-acetamido]-3-(l,2,3-triazol-5-il-tiometil)-3-cefém-4-karbonsavat oldunk. 2,5 órán át szobahőmérsékleten keverjük az elegyet. Az oldat egy részét, 125 ml-t, csökkentett nyomáson desztilláljuk, desztillációs maradékként egy borostyán-5 kőszínű olajos terméket kapunk. 3 x 70 ml toluollal, csökkentett nyomáson azeotrop desztillációkat végzünk. A desztillációs maradékot 700 ml 80 : 20 arányú víz és metanol elegyben szuszpendáljuk, majd 0,5 órán át keverjük a szuszpenziót. Ekkor a 10 szilárd halmazállapotú anyag nagy része feloldódik. A nem oldódó részt szűréssel elkülönítjük. 1,5 g Darco aktív szénnel 20 percen át derítjük a szűrletet. Celite szűrőágyon át szűrve a szuszpenziót, elkülönítjük az aktív szenet, a szűrletet 9 15 darab 100 ml térforgatú gömblombikban fagyasztva szárítjuk. A fagyasztva szárított termék összsúlya 2,415 g. Ezt 0,200 g-onként, az előzőekben megadottak szerint eljárva, kristályosítjuk. így összesen 0,923 g 7-[D-a-amino-a-(p-hidroxifenil)-acetamido]-20 -3-(l ,2,3-triazol-5-il-tiometil)-3-cefém4-karbonsavat kapunk. Az előállított vegyület mágneses magrezonancia spektruma a várttal azonos, a spektrum szerint 1/3 mól metanolt tartalmaz. 25 EiemanalizisC18 H, 8 N 6 0 5 S 2 -H 2 0-l,3CH3 0H képlet alapján: 30 számított: C =44,83%, H = 4,38%, N =17,10%, S =13,09%, mért: C =45,77%, H = 4,44%, N =16,61%, S =13,01%, = 44,36%, = 4,34%, 35 =16,52%, =13,01%. A 7-amino-3-(l ,2,3-triazol-5-il-tiometil)-3-cefém-4--karbonsav (7-TACA) acilezését metilénkloriddal készült reakcióelegyben (D-(-)-p-hidroxifenil-gliciI-40 klorid-hidrogénkloriddal végezzük. A biológiai aktivitással számítva a BL—S640 metanolos szolvátjának kitermelése 45%. Az anyalúgban mintegy 15% aktivitás mérhető, az oldhatatlan szilárd halmazállapotú termék körülbelül 25%, ami utóbbi 45 nem reagált 7-TACA-ból és felhasad 0-laktám-gyűrűt tartalmazó 7-TACA bomlástermékekből áll. A találmány szerinti eljárás egyik előnyös kivitelezési változata szerint a 7-[D-o-amino-a-(p-hidroxifenil)-acetamido]-3-(l,2,3-triazol-5-U-tiometil)-3-50 -cefém-4-karbonsav tisztítására úgy járunk el, hogy a 7-TACA-at metilénkloriddal készült reakcióelegyben hexametilén-diszilazánnal szililezzük, 0C° és 5 C° közötti hőmérsékleten egy savklorid-HCl-dal acilezzük, majd metanolt adunk a reakcióelegyhez. 55 Ezután eltávolítjuk a metilénkloridot, a metanolos oldatot pedig Darco KB aktív szénnel derítjük. A szuszpenziót szűrjük, a szűrletet pedig csökkentett nyomáson töményítjük. Tömény ammóniumhidroxiddal 4,8 és 5,0 közötti értékre állítjuk be a 60 desztillációs maradék pH-ját, majd „beoltjuk" kristályokkal és kristályosítjuk. Az eljárást az A reakcióegyenlet-vázlaton mutatjuk be. A reakciókhoz 1,0 kg 7-TACA-ra számítva az 65 1. táblázatban megadott reagenseket használjuk. 6
