168901. lajstromszámú szabadalom • Eljárás 7-[D-alfa-amino-alfa-(p-hidroxifenil)-acetamido]-3-(1,2,3-triazol-5-il-tiometil)-3-cefém-4-karbonsav-1,2-propilén-glikolát előállítására

168901 25 26 nolátot adunk az oldathoz. 2,0-es pH-jú teljes, vagy közel teljes oldatot kapunk. 3. 10 C° hőmérsékletre hűtjük az oldatot. 4. 5 perc alatt, miközben igen erőteljesen keverjük a 3. lépésben lehűtött oldatot, 40%-os nátriumhidroxiddal 4,5-re állítjuk be a pH-ját. Amikor az oldat pH-ja 2,0 és 3,0 közötti értékre emelkedik, egy csapadék válik ki belőle, ami pH 4-4,5-ön újra oldódik. Az elegy hőmérsékletét a pH beállítása közben 27 C° alatt tartjuk. 5. A teljes vagy közel teljes oldatot 8 C° és 12 C° közötti hőmérsékletre hűtjük, majd erőteljes keverés közben 500-600 ml 8-12 C° hőmérsékletű vízhez öntjük. Ekkor csapadék válik ki az oldatból. 6. Három percen át 8 C° és 12 C° közötti hőmérsékleten keverjük a szuszpenziót. A színes és más szennyezőanyagok túlnyomó többségét, köztük a BL—S640-detriazol-származékot tartalmazó csapadékot csökkentett nyomáson kivitelezett szűréssel elkülönítjük. A szűrés lassú. A szűrési maradékot a lehető legnagyobb mértékben kiszárítjuk a szűrőn. 300 ml metanolba helyezzük a szűrőpapírt és a szűrési maradékot, és 4 órán át ott tartjuk. Ezután levegőn szárítjuk a papírt és a szűrési maradékot, homogenizáljuk a szilárd halmazállapotú terméket, és 24 órán át 50 C° hőmérsékletű csökkentett nyomású térben szárítjuk. így 5-25 g 200-700 egység/mg-os aktivitású, sárgásbarna színű, szilárd halmazállapotú terméket kapunk. Ezt újrafeldolgozásra eltesszük. 7. 15 g Darco G60 vagy KB aktív szenet adunk a 6. lépésben előállított szűrlethez. 0,5 órán át szobahőmérsékleten keverjük a szuszpenziót. 8. Szűréssel elkülönítjük a szenet, 40 ml vízzel mossuk a szűrési maradékot. A mosófolyadékot hozzáadjuk a szűrlethez. 9. 0,22 mikronos Millipore szűrőn sterilre szűrjük a szűrletet. A 4—9. lépéseket 4 ófan belül végezzük el. A 7-9. lépésekben a hőmérsékletet 24 C° alatti értéken tartjuk. 10. Azonos térfogatú (közelítőleg egy liter) steril, pirogén-mentes metanolt adunk a 9. lépésben kapott 4,5-ös pH-jú oldathoz, miközben keverjük azt. Egy percen belül kristályosodási folyamat indul meg. A szuszpenzió pH-ját 4,5-ön tartjuk. 11. Egy órán át 10 C° és 20 C° közötti hőmérsékleten keverjük a szuszpenziót. 12. Szűréssel elkülönítjük a fényes, fehér színű kristályokat, 175 ml steril, 50%-os vizes metanollal, majd 450 ml steril metanollal mossuk a szűrési maradékot, ami után 56 C° hőmérsékleten, 24 órán át csökkentett nyomású térben szárítjuk. 13. A fentiek szerint eljárva, a biológiai aktivitásra számítva 60-75%-os kitermelés mellett 55-60 gramm kristályos BL-S640-monometanolátot kapunk. A termék mg-onként 930-960 egység aktivitású. 7. példa A BL-S640-monopropilén-glikolát előállítása 1. 250-300 ml vízben 100 g piroszőlősavat oldunk. 2. Erőteljes keverés közben, 5 perc alatt 100 g BL-S640-propilén-glikolátot vagy BL-S640-meta-10 nolátot adunk az oldathoz. 2,0-es pH-jú teljes, vagy közel teljes oldatot kapunk. 3. 10C° hőmérsékletre hűtjük az oldatot. 4. 5 perc alatt, miközben igen erőteljesen kever,- jük a 3. lépésben lehűtött oldatot, 40%-os nátriumhidroxiddal 4,5-re állítjuk be a pH-ját. Amikor az oldat pH-ja 2,0 és 3,0 közötti értékre emelkedik, egy csapadék válik ki belőle, ami pH 4—4,5-ön újra oldódik. Az elegy hőmérsékletét a pH beállí„„, tása közben 27 C° alatt tartjuk. 20 J 5. A teljes vagy közel teljes oldatot 8 C° és 12 C° közötti hőmérsékletre hűtjük, majd erőteljes keverés közben 500-600 ml 8—12 C° hőmérsékletű _, vízhez öntjük. Ekkor csapadék válik ki az oldatból. 6. Három percen át 8 C° és 12C° közötti hőmérsékleten keverjük a szuszpenziót. A színes és más szennyezőanyagok túlnyomó többségét, köztük a BL—S640-detriazol-származékot tartalmazó csapadékot csökkentett nyomáson kivitelezett szűréssel elkülönítjük. A szűrés lassú. A szűrési maradékot a lehető legnagyobb mértékben kiszárítjuk a szűrőn. 300 ml metanolba helyezzük a szűrőpapírt 3 és a szűrési maradékot és 4 órán át ott tartjuk. Ezután levegőn szárítjuk a papírt és a szűrési maradékot, homogenizáljuk a szilárd halmazállapotú terméket, és 24 órán át 50 C° hőmérsékletű csökkentett nyomású térben szárítjuk. így 5-25 g 40 200-700 egység/mg-os aktivitású, sárgásbarna színű, szilárd halmazállapotú terméket kapunk. Ezt újrafeldolgozásra eltesszük. 7. 15 g Darco G60 vagy KB aktív szenet adunk a 6. lépésben előállított szűrlethez. 0,5 órán át 45 szobahőmérsékleten keverjük a szuszpenziót. 8. Szűréssel elkülönítjük a szenet, 40 ml vízzel mossuk a szűrési maradékot. A mosófolyadékot hozzáadjuk a szűrlethez. 50 9. 0,22 mikronos Millipore szűrőn sterilre szűrjük a szűrletet. A 4-9. lépéseket 4 órán belül végezzük el. A 5S 7-9. lépésekben a hőmérsékletet 24 C° alatti értéken tartjuk. 10. Azonos térfogatú (közelítőleg egy liter) steril, pirogén-mentes propilén-glikolt adunk a 9. gQ lépésben kapott 4,5-ös pH-jú oldathoz, miközben keverjük azt. Egy percen belül kristályosodási folyamat indul meg. A szuszpenzió pH-ját 4,5-ön tartjuk. 65 11. Egy órán át 10 C° és 20 C° közötti hőmérsékleten keverjük a szuszpenziót. 13