168901. lajstromszámú szabadalom • Eljárás 7-[D-alfa-amino-alfa-(p-hidroxifenil)-acetamido]-3-(1,2,3-triazol-5-il-tiometil)-3-cefém-4-karbonsav-1,2-propilén-glikolát előállítására

168901 23 24 A 4—9. lépéseket 4 órán belül végezzük el. 10. Azonos térfogatú (körülbelül 1 liter), steril, pirogén-mentes propilén-glikolt adunk keverés közben a 9. lépésben kapott 4,5 pH-jú oldathoz. Egy percen belül kristályosodási folyamat indul meg. A szuszpenzió pH-ját 4,5-ös értéken tartjuk. 11. Egy órán át 18C° és 23 C° közötti hőmérsékleten keverjük a szuszpenziót. 12. Szűréssel elkülönítjük a fényes, fehér színű kristályokat, 175 ml steril, 50%-os vizes propilén-glikollal, majd 450 ml steril metanollal mossuk a szűrési maradékot, majd 56 C° hőmérsékleten, 24 órán át csökkentett nyomású térben szárítjuk. 13. A fentiek szerint eljárva 70-80 g súlyú terméket kapunk. A BL-S640-mono-propilén-glikolát biológiai aktivitására számított kitermelés 75-85%. Az 5. példában megadott eljárással előállított monopropilén-glikolát egy mintáját analizáljuk. A következő eredményeket kaptuk. a. Biológiai aktivitás: 865 Mg/mgb. Az infravörös és a mágneses magrezonancia spektrum szerint a cefalosporin ikerion egy molekulája egy molekula propilén-glikolt tartalmaz. c. Víztartalom (Kari Fischer szerint): 0,3;'. d. Kristálymorfológia: jól elkülönített, oszlopos kristályok. e.[a)l3

(konc: 1%, 1 n HCl): + 55,9. f. A,termék a kémiai analízis eredményei szerint 15,6% propilén-glikolt tartalmaz. g. Egyéb oldószerek: 0,1%. h. Ultraibolya abszorpciós spektrum (0,1 n HCl): Xmax: 227 nm (a: 28,4)" és 272 nm (a: 16.6). A találmány szerinti eljárással előállított monopropilén-glikolát egy mintáját Röntgen-diffrakciós vizsgálatnak vetettük alá, az alábbiakban megadottak szerint. Eredmények: a minta nagymértékben kristályos, 35 mérhető diffrakciós jelet figyeltünk meg. Az oldatokat kettős sorközökben (d-spacing) és relatív intenzitásként adjuk meg. 3. táblázat Jel Kettős térköz (Á) Relatív intenzitás 1 10,11 65 2 9,26 32 3 7,83 18 4 7,33 51 5 6,88 82 6 6,28 56 7 5,71 42 8 5,27 3 -9 5,02 41 10 4,68 (5 2 11 4,46 99 12 4.30 59 13 4,13 35 14 3,91 90 15 3,80 100 16 3,63 37 17 3,47 49 18 3,35 13 3. táblázat folytatása Jel Kettős térköz (Ä) Relativ intenzitás 19 3,24 11 20 3,13 14 21 3,02 18 22 2,95 17 23 2,85 25 24 2,78 55 25 2,72 23 26 2,61 18 27 2,53 • 20 28 2,49 6 29 2,35 8 30 2,31 14 31 2,27 14 32 2,24 14 33 2,19 10 34 2,14 14 35 2,10 15 A Röntgen-diffrakciós tulajdonságok meghatározását a következő szerint végeztük. 25 Kismennyiségű mintát 0,2 mm átmérőjű, kevéssé visszaverő tulajdonságú üvegből készült kapilláris csőbe forrasztunk, a mintát 114,6mm átmérőjű Debye-Scherrer diffrakciós kamrában sugározzuk be. A besugárzási idő 4 óra, miközben egy Norelco 30 Röntgen-sugár generátort működtetünk 35 kV feszültségen és 20 mA áramerősség felvétele közben. A vizsgálatot standard fókusz réz-target Röntgen-csővel végezzük (CuKa, X : 1,5418 Ä). A felvételeket Kodak-No-Screen X-Ray Film-mel végezzük, 35 az előhívás 3 percen át, 20 C° hőmérsékleten Kodak Liquid X Ray előhívóban történik. A belső kalibrációra igen kismennyiségű kristályos nátriumfluoridot keverünk a mintákkal. Ezenfelül, hasonló cél érdekében tiszta nátrium-40 fluoriddal is végigcsináljuk a teljes eljárást. A filmeket egy Norelco Deby-Scherrer filmleolvasóban olvassuk le, a diffrakciós gyűrűk helyzetét 0,05 mm pontosságon belül határozzuk meg. Az adatokat a film zsugorodásának megfelelően át-45 számítjuk, a téren belüli közöket (d-spacings) az átszámított adatokból számítjuk. Minden számításhoz egy számítógépes programot (X-Ray, Zugenmaier) használunk. A kapott adatok hibája körülbelül 1%. 50 A filmeket Joyce-Loeblo Mark IIIC Recording Microdensitometer-rel (letapogatás aránya 5 : 1, 0,1 optikai denzitás csökkenés) olvassuk le. Mindegyik felismerhető diffrakciós gyűrűt 1-tól 100-ig terjedő számmal jelölt relatív intenzitással jellemzünk, a 55 csúcsintenzitásokat a háttérrel korrigálva adjuk meg. 6. példa 60 A tiszta BL-S640-monometanolát előállítása 1. 250-300 ml vízben 100 g pirosszőlősavat oldunk. 2. Erőteljes keverés közben 5 perc alatt 100 g 65 DL-S640-propilén-glikolátot, vagy BL-S640-meta-12