168868. lajstromszámú szabadalom • Eljárás új everninomicin-származékok előállítására
3 168868 4 tuálva. Előnyösen RÍ—12 szénatomos alkilcsoport, 3—12 szénatomos cikloalkil- vagy cikloalkil-(kevésszénatomos)-alkilcsoport, aril- vagy 6-12 szénatomos aralkil- vagy olyan heterociklusos csoport lehet, amely egy vagy két heteroatomot, például oxigén-, kén- vagy nitrogénatomot és legfeljebb 12, előnyösen legfeljebb 5 szénatomot tartalmaz. Ennek az R csoportnak a megfelelő RCHO általános képletű aldehidként kifejezett olyan példái, amelyekből az -N-CHR képletű nitron elő-0 állitható, a következők: alifás aldehidek, mint a formaldehid, acetaldehid, propanal, heptanal, dekánál és dodekanal, aliciklusos aldehidek, mint a ciklopropánkarbaldehid, ciklopentánkarbaldehid, ciklohexánkarbaldehid és 3-ciklohexil-propanal, aromás aldehidek, mint a benzaldehid, p-hidroxibenzaldehid, tolilkarbaldehidek, 3-fenil-propanal, 1-és 2-naftalin-karbaldehidek és heterociklusos aldehidek, mint a furfurol, tienilkarbaldehid, tiazolilkarbaldehid, pirazinilkarbaldehid és piranilkarbaldehid. Azokat az I általános képletű vegyületeket, amelyek képletében Y hidroxilcsoportot és Z CH3 / —CH képletű csoportot jelent, nitrózo\ OCH3 everninomicin B-nek, illetőleg amikor X nitrózovagy hidroxiaminocsoportot (vagy ennek megfelelő nitronszármazékot) jelent, hidroxiaminoeverninomicin B-nek nevezzük. Hasonlóképpen, amikor Y és Z egyaránt hidrogénatomot jelentenek, az I általános képletű vegyületek a megfelelő everninomicin C-származékok, és amikor Y hidrogén-CH3 / atomot és Z egy -CH képletű csoportot \ OCH3 jelent, a vegyületek a megfelelő everninomicin D származékok. Az I általános képletű vegyületek egy savtermészetű fenolos hidroxilcsoportot tartalmaznak, és ezért könnyen a megfelelő, farmakológiailag elfogadható sóvá alakíthatók. A találmány körébe tartozó farmakológiailag elfogadható sók a fémsók, mint az alkálifémsók, például nátrium- és káliumsók, az alkáliföldfémsók, például kalciumsók, az alumíniumsók, az aminsók, mint a tri-(kevés szénatomos)-alkilaminok (például trietilamin), prokain, dibenzilamin, N-benzU-0-fenetilamino-, N,N'-dibenzil-etiléndiamin-, N,N'-bisz-dehidroabietil-etiléndiamin-, N-(kevés szénatomos)-alkü-piperidinek (például N-etilpiperidin) és az N-metil-glutamin sói. A találmány szerinti vegyületek előállítására az ismert everninomicin B, C és D vegyületeket redukáljuk. A kiindulási anyagok és a végtermékek szerkezetének felderítése során kitűnt, hogy redukció közben egy nitrocsoport a megfelelő nitrózovagy hidroxiaminocsoporttá redukálódik, és az utóbbi csoport könnyen átalakítható a megfelelő nitroncsoporttá. A találmány szerint az everninomicin B, C vagy 5 D kiindulási anyagot egy kevés szénatomos alkanol vizes oldatában alumíniumamalgámmal redukáljuk, majd a reakcióterméket elkülönítjük. A kevés szénatomos alkanol célszerűen 1-4 szénatomos alkanol, előnyösen etanol lehet. Az alkanol és víz aránya 10 nem lényeges, és attól függ, hogy milyen alkanolt választunk, és hogy a kiindulási everninomicin a választott alkanol-víz-rendszerben mennyire oldódik, ez az arány minden esetben könnyen kiszámítható. Etanol-víz-rendszer esetén azt találtuk, hogy 60 :40 15 és 40 :60 közötti térfogat/térfogat-arány előnyösen alkalmazható, és mi 50:50 arányt alkalmaztunk. Az alumíniumamalgám és a kiindulási anyagként használt everninomicin alumíniumként számított súlyaránya 0,2 :1. 20 A redukciót alkalmasan szobahőmérsékleten hajtjuk végre. Az everninomicin kiindulási anyagnak alumíniumamalgámmal történő redukciója során a reakciókeveréket előnyösen mechanikus ke-25 verővel keverjük, és a reagáltatást az amágám eltűnéséig folytatjuk. Bár a reakció levegő jelenlétében is végbemegy, előnyös, ha iners atmoszférában, például nitrogén- vagy argonatmoszférában redukálunk. Az alumíniurnarnalgárnot ismert módon 30 állítjuk elő, rendszerint úgy, hogy az alumíniumfóliát nátriumhidroxiddal maratjuk, majd az előkészített fóliát egyszer vagy többször higany(II)klorid-oldattal kezeljük, és végül az alumíniurnarnalgárnot mossuk. Az alumíniumfólia alumínium-35 tartalma előnyösen 98-99,5%, és réz, szilícium és vas szennyezés közül legalább egyet nyomokban tartalmaz. Előnyösnek bizonyult egy 99,35% alumíniumot és 0,12% rezet tartalmazó minőség. Az amalgám készítésekor az alumíniumfóliát célszerűen 40 0,5 cm2 -es négyzetekre vágjuk, és golyó alakúvá hajtjuk össze. A redukció elősegítésére előnyös, ha az alumíniumamalgámot közvetlenül a felhasználás előtt frissen állítjuk elő. 45 Amint már említettük, az everninomicin B, C és D kiindulási anyagok a Micromonospora carbonacea mikroorganizmus fajnak a 3 499 078 számú Amerikai Egyesült Államok-beli szabadalmi leírás szerinti tenyésztésével állíthatók elő. Az everni-50 nomicin B, C és D elkülönítése és tisztítása ismert módon, különösen a 3 499 078 számú Amerikai Egyesült Államok-beli szabadalmi leírásban az everninomicin B, C és D-re vonatkozóan ismertetett eljárás segítségével végezhető. Bár kiindulási anyag-55 ként kívánt esetben nyers everninomicin B, C vagy D, illetőleg everninomicin B, C és D keveréke is használható, előnyös ha a kiindulási anyag tisztított everninomicin B, C vagy D. Ennek érdekében az everninomicin B, C és D keverékek elválasztása 60 kromatografálással végezhető, például kovasavgéloszlopon benzol-aceton eluáló rendszer használatával kromatografálunk. A tisztítást oldószeres kicsapással és kromatografálással hajtjuk végre. így például az everninomicin D tisztítását célszerűen 65 úgy végezzük, hogy az anyagot acetonban oldjuk, 2
