168849. lajstromszámú szabadalom • Eljárás glükoprotein-elegy előállítására

MAGYAR NÉPKÖZTÁRSASÁG ORSZÁGOS TALÁLMÁNYI HIVATAL SZABADALMI LEÍRÁS Bejelentés napja: 1973. II. 13. (RO-704) Franciaországi elsőbbsége: 1972. II. 15. (72-05016) Közzététel napja: 1976. II. 28. Megjelent: 1977. III. 31. 168849 Nemzetközi osztályozás: C 07 G 7/00,17/00, C 12 D 13/06 Feltalálók: Hirsch Jean farmakológus, Párizs, Buret Jean-Pierre farmakológus, Osny, Franciaország Tulajdonos: Roussel Uclaf cég, Párizs, Franciaország Eljárás glükoprotein-elegy előállítására 1 A találmány táígya glükoprotein-elegy előállítása. A találmány szerinti eljárással tisztított és az eddig ismert glükoproteinnél lényegesen hatásosabb glükoprotein elegyet állíthatunk elő. A találmány újdonságát a kapott glükoprotein elegy 5 fokozott tisztasága és az eddig ismertnél nagyobb hatása jelenti. Az a- és /3-glükoprotein-elegy előállítását a 162 857 számú magyar szabadalmi leírás írja le. Az eljárás során sejtbontásnak alávetett mikroorganiz- 10 mus tenyészetből indulnak ki. Glükoproteineket állítanak elő a 2 043 475 számú francia bejelentés szerint is. Az eljárás során a mikroorganizmusokat szilárd, vagy folyékony táptalajon tenyésztik, a kapott tenyészetet kémiai, 15 fizikai vagy enzimetikus bontásnak vetik alá. Ez követően a sejtmaradványokat eltávolítják, a tiszta oldatot extrahálják, majd a fehérjét szelektív kicsapásnak vetik alá. A glükoproteinek figyelemre méltó terápiás tu- 20 lajdonsággal rendelkeznek, jelentékeny gyulladásgátló hatásuk van, továbbá gyors, nem specifikus immunizáló tulajdonsággal rendelkeznek. További előnyük, hogy sem allergiát, sem hipertermiát nem okoznak, továbbá az injekció beadásának helyén 25 nem mutatkozik intolerancia. A glükoproteinek szerkezetére az elektroforetikus sűrűség gradiensből következtethetünk. Összehasonlításul más glükoprotein frakciókat alkalmazunk. A találmány szerinti és a kiinduláshoz 30 felhasznált glükoproteinek az elektroforézis során lassabban vándorolnak, mint az összehasonlító anyagként alkalmazott oroszomukoidok. Az oroszomukoidok a vérben levő glükoproteineknek egy frakciója, amely közepes vándorlási sebességgel rendelkezik a többi vér-glükoproteinhez viszonyítva. Ezért a találmány szerinti glükoproteineket, továbbá az előállításukhoz alkalmazott kiindulási anyagokat lassú glükoproteineknek is nevezik. A vegyületek kémiai természetét kémiai reakciókkal vizsgálták, így ellenőrizték a hexóz- és pentóz-tartalmat. A megközelítő mólsúly értékét szelektív kromatográfiás anyagok, így módosított cellulóz, Szefadex-gél vagy molekulaszűrő alkalmazásával állapították meg. Vizsgálták továbbá a hexózamin tartalmat, és a biruetogén képességet (162 857 számú magyar szabadalmi leírás). A találmány szerinti eljárásnál kiindulási anyagként felhasznált glükoprotein-elegyet a fent említett szabadalmi leírásban ismertetett eljárás szerint állítják elő. A hőálló glükoproteinek savban és ammóniumszulfát-oldatban oldhatók. A nevezett glükoproteinek hexóz-tartalma 50-60% között van. A találmány tárgya legalább 1 millió mólsúlyú, 60—65% hexóz-tartalommal, megközelítőleg 7 hexóz/fehérje aránnyal rendelkező tisztított glükoprotein-elegy előállítása, Pneumococcus, Streptococcus, Neisseria, Micrococcus, Staphylococcus, Klebsiella pneumoniae és Haemophilus influenzae 168849