168674. lajstromszámú szabadalom • Eljárás alfa-melanotropin, továbbá dibrómozott, illetve triciált származéka előállítására
MAGYAR NÉPKÖZTÁRSASÁG ORSZÁGOS TALÁLMÁNYI HIVATAL SZABADALMI LEÍRÁS SZOLGÁLATI TALÁLMÁNY Bejelentés napja: 1974. I. 11. (RE—546) Közzététel napja: 1976. I. 28. Megjelent: 1977- VIII. 31. 168674 Nemzetközi osztályozás: C 07 B 23/00 C 07 C 103/52 Feltalálók: dr. Medzihradszky Kálmán egyetemi tanár, oki. vegyész, dr. Teplán István oki. vegyész, Nikolics Károly oki. vegyész, Seprődi János oki. vegyész, Budapest Tulajdonos: Reanal Finomvegyszergyár, Budapest Eljárás «-melanotropin, továbbá dibrómozott, illetve triciált származéka előállítására i A találmány tárgya új eljárás az 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 Ac-Ser-Tyr-Ser-Met-Glu-His-Phe-Arg-Trp-Gly-Lys-Pro-Val-NH2 képletű x-melanotropin, továbbá a 2 helyen levő tirozin-csoportján 3,5-dibrómozott, illetve triciált származéka előállí- 5 tására. A képletben Ac acetilgyököt jelent, az 1—13 helyen feltüntetett szimbólumok pedig a peptidkémiában általánosan alkalmazott konvencionális rövidítések, s az egyes L-konfigurációjú aminosav-csoportokat jelölik. 10 A tríciummal jelzett biológiailag aktív polipeptidek fontos szerepet játszanak e polipeptidek biológiai hatásmechanizmusának tanulmányozásában. Az ily módon jelzett vegyületek nagy fajlagos radioaktivitással rendelkeznek (Curie/millimól nagyságrendben), s így e ve- 15 gyületek fiziológiás koncentrációban is jól észlelhetők. A trícium bevitelére általában használt Wilzbach-féle eljárás [J.A.C.S. 84 109 (1962)] egyrészt nem biztosít specifikus, adott funkciós csoporton kiépíthető radioaktív jelzést, másrészt a jelzés labilis, illetve nem kívá- 20 natos mellékreakciókkal {pl. racemizáció)jár. Specifikus jelzés érhető el triciált aminosavból kiinduló szintézissel, ez azonban esetenként körülményes lehet, a triciált vegyületet pedig nagy fajlagos radioaktivitása folytán tárolás során autoradiolízist szenvedhet. 25 A tríciummal való jelzés egyszerű módja az, ha a polipeptidet olyan aminosavszármazék beépítésével készítik el, (ún. prekurzor-aminosav), mely módot ad a trícium bevitelére a szintézis utolsó lépésében [Chem. Ber. 1373 (1963)]. így elkerülhető a radioaktív anyag- 30 gal végzett soklépéses szintézis kényelmetlensége, s arra is mód nyílik, hogy a triciált vegyületet csak olyan kis mennyiségben készítsük el, amennyit a jelzett vegyület alkalmazásakor rövid időn belül fel is használunk, ezáltal minimálisra csökkentve a tárolást, s így az autoradiolízis veszélyét. Ilyen prekurzor-aminosavnak találtuk a 3,5-dibróm-tirozint (Dbt). Célszerűen használjuk fel tirozint tartalmazó polipeptidhormonok (pl. melanotropin, adrenokortikotrop hormon, angiotenzin) prekurzorjainak szintézisére, mivel így azok a szintézis utolsó lépésében katalitikus (pl. palládium-csontszén katalizátor jelenlétében bázisos közegben történő) hidrogénezéssel könynyen a tirozint tartalmazó polipeptiddé, illetve tríciumot használva hidrogén helyett, a triciált tirozint tartalmazó polipeptiddé alakíthatók. így a tirozin brómozásával kapott 3,5-dibróm-tirozin [Z. physiol. Chem. 114, 275 (1921)] metilalkohollal tionilklorid jelenlétében 3,5-dibróm-tirozinmetilészter-hidrokloriddá alakítható, melyet a peptidszintézisben ismert módon acilezhetünk terc-butiloxikarbonil-szerin (BOC-Ser) védett aminosavval vagy származékával, pl. azidjával, s az így nyert BOC-Ser-Dbt-OMe dipeptidészter hidraziddá, majd aziddá alakítva a már korábban ismert [J.A.C.S. 79, 1636 (1957)] H-Ser-Met-OMe dipeptidészterrel a BOC-Ser-Dbt-Ser-Met-OMe védett tetrapeptidészterré kapcsolható. E tetrapeptidészterből a BOC-védőcsoportot acidolízissel eltávolítva, majd a szabaddá váló terminális aminocsoportot p-nitrofenilacetáttal acetilezve Ac-Ser-Dbt-Ser-Met-OMe képletű 168674 1
