168594. lajstromszámú szabadalom • Eljárás új cef-3- em-4- karbonsav- származékok, valamint az azokat tartalmazó gyógyszerek előállítására
13 168594 14 dási fokot. Zavarosság-mentesség antibakteriális hatást jelez. 100 [Ag/ml dózisnál az alábbi baktérium-kultúrák voltak zavarosodásmentesek: Klebsiella pneumoniae; Enterobacter aerogenes faj; Providencia; Serratia marcescens; Escherichia coli BE; Salmonella faj; Shigella faj; Proteus indolnegatív és indolpozitív faj; Pasteurella pseudotuberculosis; Brucella faj; Haemophilus influenzae; Bordetella bronchiseptica; Staphilococcus aureaus 133; Neisseria catarrhalis faj; Diplococcus pneumoniae faj; Streptococcus pyogenes W.; Enterococcus faj; Lactobacillus faj; Corynebacterium diphteriae gravis; Corynebacterium pyogenes M; Clostridium botulinum; Clostridium tetani;Borrelafaj;. b) In vivo kísérlet: A következő I. táblázatból látható az egyik találmány szerinti vegyület, amelyet a találmány szerinti vegyületek tipikus képviselőjének tekinthetünk, baktériumellenes hatása egy sor baktériummal szemben, fehéregereken végzett állatkísérlet alapján. A CFX törzsből származó fehéregereket intraperitoneálisan fertőztük meg a mindenkor megadott baktériumféleséggel. /. táblázat Állatkísérlet fehéregérrel A 24 óra utáni ED50 érték meghatározása A 6. példa szerinti Kórokozó cefalosporin dózisa mg/testsúlykg-ban (szubkután). Escherichia coli C 165 1 -200 Staphilococcus aureus 133 1-10 Klebsiella 1 -150 Kezelés: egyszeri, 30 perccel a fertőzés után. Az ED50 az a dózis, amelynél a fertőzött állatok 50%-a a fertőzés után 24 órával még él. A találmány szerinti vegyületek előállítását a következő példák szemléltetik. Az összes %-ban megadott kitermelés az elméleti kitermelés %-át jelenti. A hőmérsékleti adatokat °C-ban adjuk meg. A példákban felhasznált 7-(<x-amino-fenilacetamido)-3-metil-cef-3-ém-4-karbonsav mintegy 5% vizet tartalmaz, azonban vízmentes 7-(oc-amino-fenilacetamido)-3--metil-cef-3-ém-4-karbonsavat éppen olyan jól felhasználhatunk. A példákban felhasznált 7-(a-amino-fenilacetamido)-3-acetoximetil-cef-3-ém-4-karbonsav 8% vizet tartalmaz, de vízmentes 7-(a-amino-fenilacetamido)-3-acetoximetil-cef-3-ém-4-karbonsavat éppen olyan jól alkalmazhatunk. A cefalexin név a 7-(a-amino-fenilacetamido)-6-metil-cef-3-ém-4-karbonsavat, a cefaloglicin név a 7-(oc-amino-fenilacetamido)-3-acetoximetil-cef-3-ém-4-karbonsavat jelöli az oldalláncban D = R-konfigurációval. A cefalosporinok NMR-spektrumait, amennyiben a példákban mást nem adunk meg, deutero-metanolos (CD3 -OD) oldatban vettük fel. A zárójelben levő jelek jelentése a következő: s= szingulett m= multiplett d= dublett AB= AB-rendszer t= triple« AX= AX-rendszer q= kvartett A2 B 2 = A 2 B 2 -rendszer. 5 A cefalosporinok IR-spektrumait nujol-szuszpenzióban vettük fel. A cefalosporinok (3-laktám-tartalmát az IR-spektrum ß-laktam-karbonil-savjanak extinciójából, valamint az 10 NMR-spektrumból határoztuk meg. 1. példa 15 A) Nátrium-7-{D-a-[(2-oxo-imidazolidin-l-il)-karbonilamino]-fenilacetamido}-3-acetoximetil-cef-3-ém-4--karboxilát. (V). 1,3 súlyrész cefaloglicin-dihidrát 15 térfogatrész 80%-20 os, vizes tetrahidrofuránnal készített szuszpenzióját trietilaminnal 7,5 pH-ra állítjuk be, és részletekben, 10 perc alatt, 10és 20 °C hőmérséklet között 0,51 súlyrész l-klórkarbonil-2-oxo-imidazolidint adunk hozzá, miközben a pH-t trietilaminnal 7 és 8 között tartjuk. 25 Addig keverjük a reakcióelegyet, amíg a pH 7 és 8 között tartásához már nem kell több trietilamint beadagolni. Ekkor 20 térfogatrész vizet adunk hozzá, a tetrahidrofuránt rotációs bepárlóban szobahőmérsékleten lepároljuk, a vizes oldatot etilacetáttal egyszer extra-30 háljuk és szűrjük. Az oldat fölé rétegezünk 20 térfogatrész etilacetátot, és jeges hűtés közben 2n sósav-oldattal 2 pH-ra savanyítjuk az oldatot, amikoris a szabad cefalosporánsav, ami vízben és etilacetátban nehezen oldódik, kristályos csapadék formájában kiválik. Ezt 35 leszívatjuk és etilacetáttal mossuk. A terméket rotációs bepárlóban gyorsan megszárítjuk, azután 5 térfogatrész dimetilacetamidban feloldjuk és 1 mólos, éteres nátrium-2-etilhexanoát-oldatból, ami némi metanolt tartalmaz, 3 térfogatrészt adunk hozzá. Az oldatot ekkor bele-40 keverjük 30 térfogatrész éter-metanol-elegybe (a térfogatarány 10: 1) jeges hűtés közben. Ülepedni hagyjuk a reakcióelegyet, az oldószert dekantáljuk, a csapadékot éterrel felkeverjük és szárazra szívatjuk. A terméket foszfor-pentoxid és paraffin darabkákkal töltött ex-45 szikkátorban 24 óráig szárítjuk. A kitermelés nátrium-7-- {D-a-[(2-oxo-imidazolidin-1 -il)-karbonilamino]-fenüacetamido}-3-acetoximetil-cef-3-ém-4-karboxilátra80%. IR sávok: 3250, 3060, 1765, 1723, 1652, 1607, 1540, 1274,1235 és 1032cm-1 -nél. 50 NMR jelek x = 2,55 (s, 5H), 4,27 + 4,95 (AX, IH + 1H), 4,5 (s, IH), 5,2 (s, 2H), 6,05—6,8 (AX, 4H), 6,5 — 6,8 <AB, 2H) és 7,9 ppm-nél (s, 3H) (deutérium-oxidban). Az elektroferogram csak egy, Bacillus subtilis, Esche-55 richia coli és Pseudomonas aeruginosa ellenes hatással rendelkező foltot mutat. B) l-Klórkarbonil-2-oxo-imidazolidin. (Va). 60 3,5 súlyrész imidazolidin-2-on (Fischer és Koch, Ann. 232, 224. [1886] cikke szerint készült) 50 térfogatrész tetrahidrofuránnal (abszolút) készített, erősen kevert oldatához 15 perc alatt 4 súlyrész foszgén 10 térfogatrész 65 abszolút tetrahidrofuránnal készített oldatát csepegtet-7
