168293. lajstromszámú szabadalom • Eljárás magasabb B12-vitamin tartalmú fermentlé előállítására a baktérium populáció szinkronizálása útján
MAGTAB NÉPKÖZTÁRSASÁG 4r^ ORSZÁGOS TALÁLMÁNYI HIVATAL SZABADALMI LEÍRÁS SZOLGÁLATI TALÁLMÁNY Bejelentés napja: 1973. X. 26. (RI-524) Közzététel napja: 1975. X. 28. Megjelent: 1977. II. 28. 168293 Nemzetközi osztályozás: C 12 D S/06, C 07 D 405/14 ^^i'í.'iilíL-i Feltalálók: Dr. Johan Béla mikrobiológus 20%, Szemler László vegyészmérnök 18%, Szontagh Tamás mikrobiológus 11%, Kúti László vegyésztechnikus 9%, Simonovits Miklósné vegyészmérnök 9%, Békés Imréné vegyészmérnök 9%, Székely Dénes vegyészmérnök 8%, Kiss János vegyész 6%, Kovács Benedekné laboráns 5%, Hargitai Gáborné laboráns 5%, Budapest Tulajdonos: Richter Gedeon Vegyészeti Gyár Rt., Budapest Eljárás magasabb Bí2 -vitamin tartalmú fermentlé előállítására a baktérium populáció szinkronizálása útján 1 A találmány tárgya eljárás BJ2 -vitamint tartalmazó fermentlé előállítására metánt termelő vegyes baktérium populációval, anaerob, szeptikus körülmények között végzett fementáció útján. Ismeretes, hogy a B12 -vitamint általában vagy monokultúrás, steril fermentációval, vagy szennyvíziszap eredetű, speciális táptalajra adaptált, vegyes baktérium populációval állítják elő (153 740 számú magyar szabadalmi leírás). 10 Ismeretes az is, hogy a vegyes baktérium populációk alkalmazása esetén a Bi2 -vitamin hozam gyakorlatilag nem növelhető az egyes baktériumfajok egyedi termelőképességének fokozásával, 15 mint az a steril, monokultúrás fermentációk esetében ismert és használatos módszer. Vegyes populációkban az egyes mikroorganizmus fajok metabolizmusa nem független a többi jelenlevő fajétól. Ez a kölcsönhatás oly mértékben pozitív lehet, 20 hogy a kívánt metabolit termelését-esetleg nagy mértékben - emelheti, [B. Johan, A. Szabó, E. Keresztessy: Combined fermentation, Acta Microbiol. Acad. Sci. Hung. VI./4., (1959)], vagy negatív irányú is lehet, azt a szeptikus fermentációknál 25 tapasztaljuk, ahol a banális fertőző baktériumok fermentleveinkben nem képesek elszaporodni. A metántermelő vegyes baktérium populációkkal végzett fermentációk B12 -vitamin hozamának növelésére több eljárás ismeretes, ezek a módszerek 30 azonban általában csak 10,000-11 500 jug/1 B-vitamint tartalmazó fermentlé előállítására alkalmasak (159 356 és 163 342 számú magyar szabadalmi leírások). Találmányunk célkitűzése, a jelenleg használt szennyvízeredetű, félfolyamatosan fenntartott, az OKI-nál 76, 77, 78 és 79. szám alatt deponált Corynebacterium sp.-t (jelzése 24A1), Corynebacterium sp.-t (jelzés 62B9), Lactobacillus sp,-t (jelzése 244B(C1) és Propioni bacterium sp.-t (jelzése 239A1(6) tartalmazó baktérium populációval gazdaságosan, a fentinél nagyobb B12-vitamin termelés elérése volt. Ennek gyakorlati megoldásához az alábbi vizsgálati eredmények, illetve tények ismerete segített hozzá: 1. A Bi2 -vitamint termelő szenny vízeredetű metanobakteriális fermentáció vizsgálata kapcsán megállapítottuk [B. Johan: Acta Microbiol. Acad. Sci. Hung. 17, 319-328 (1970)], hogy a termelt B12-vitamin 93-97%-a a baktériumok testében van, a szupernatans folyadékba csak a baktériumok elhalása után kerül. Ha tehát a fermentáció Bj2 -vitamin hozamát emelni kívánjuk, úgy a termelő baktériumok számát kell emelni. 2. A szennyvíziszap eredetű metántermelő baktériumpopuláció baktériumainak (különösen a coccus-diplococcusoknak) oszlási (duplikálódási)ideje aránylag hosszú. A legtöbb baktérium 168293
