168223. lajstromszámú szabadalom • Eljárás
3 168223 4 szilidianin előállítására is. A definiált tiszta izomerek szilimarin, szilidianin, szilikrisztin stb. farmakológiájára sem közöltek még adatokat. Az eljárások elsősorban a Silybum termés enorm magas (20-30%) zsíros olaj tartalmának közvetlen 5 vagy közvetett eltávolítására irányultak. A flavonoid-tartalom 10-20-szorosát meghaladó lipofil oldható kísérőanyagok (telített és telítetlen zsírsavészterek) jelenléte a tisztítást megnehezítette és a szimultán zsíros olaj flavonoid extrakciók egyetlen 10 zsír-leválasztással nem vezethették zsírmentes nyerstermékhez. A flavon komponensek kezdeti 24 órás (etilacetát) extrakciós idejét később szakaszos műveleti lépésekkel és több napos áztatással, majd magasabb hőmérsékleten alkalmazott oldószer- 15 -elegyekkel csökkentették. Nem ismeretes azonban megoldás az egyes komponensek és színezőanyagok megosztására és elválasztására. A nyerstermékek összetétele mindenkor a nyersanyag (Silybum) drog flavonoid spektrumának függvénye volt. 20 Történtek ugyan javaslatok a Silybum marianum drogból való dúsított extraktumokelőállítása különféle módszerekkel, ezek azonban az eljárások hosszadalmas volta, valamint a termékek elégtelen megosztása miatt nem voltak célravezetőek és gazdaságosak. 25 A találmány célja olyan eljárás kidolgozása, amely lehetővé teszi zsírmentes flavonoid-keverék vagy tiszta főkomponens, így szilimarin vagy szilidianin gazdaságos előállítását. Találmányunk alapját az a felismerés képezi, 30 hogy mind a szilimarin, mind a szilidianin, illetve a gyógyászatilag hasznosítható flavonoidok a termés héjában fordulnak elő és szimultán extrakcióval a termés keményítő-zsíros-olaj tartalmától egyetlen lépésben elválaszthatók, valamint erősen poláris 35 oldószerben rendkívül jól oldódnak, és ezáltal új lehetőség nyílik a gyógyászatilag hasznosítható flavonoidok izolálására és tisztítására. Ezekre a poláris oldószerekre jellemző, hogy -OH tartalmú vegyületekkel hidrogén híd- (proton)kötésre ké- 40 pesek, a DKE értékük magas, és vízzel nem elegyedő szerves oldószerekkel (pl. butilacetát/formamid) sok esetben két fázisra különülnek. A találmány értelmében úgy járunk el, hogy a Silybum-fajok vagy -fajták vagy azok változatainak őrölt termését, adott esetben a maghéj valamely zsíroldószerrel, előnyösen 1,35-nél magasabb fajsúlyú halogénezett szénhidrogénnel végzett keményítő-zsír extrakciós dúsítása után, valamely erősen poláris oldószerrel feltárjuk, ezután acetonnal, metanollal vagy etilacetáttal kimerítően extraháljuk, etilacetát-poláris oldószer híg-vizes nátriumklorid-oldat rendszerben extrakcióval, célszerűen ellenáramú extrakcióval tisztítjuk, a flavonoidokat kalcium-klorid-os metanollal vagy kalcium-klorid-os etilénglikollal szénhidrogénekkel megosztva extraháljuk, az extraktumot vízben diszpergálva a flavonoidokat nyerstermék formájában lecsapjuk, majd kívánt esetben a fő flavonoidot kevés metanolból kristályosítjuk, adott esetben aceton-metanol elegyből vagy kalcium-klorid-os ' metanol-víz elegyből átkristályosítjuk, és adott esetben az anyalúgban maradó flavonoidokat oszlopkromatográfiával vagy frakcionált extrakcióval szétválasztjuk. Ismeretes, hogy a Máriatövis, Silybum marianum (L.) Gärtn., a Silybum eburneum Coss, et Dur. fajok (Compositae) és az előbbi lila és fehér virágú színváltozatainak flavonoid hatóanyagai a termésben (zsírosolaj 10-30%, összflavon 2—4%, szilimarin vagy szilidianin 1-3%, tartalmaz még szilikrisztin, taxifolin és kvercetin izomereket) fordulnak elő. A termést feltörve megkülönböztethető egy rendkívül kemény, drapposbarna színű maghéj (Mh.) (perycarpium) és szürkés-fehér színű, zsíros tapintású keményítő állomány (cotyledones) hántolt mag (Hm.). Az alábbi táblázatban összefoglalt eredményeink igazolták azt a feltevésünket, hogy a S. marianumnál a szilimarin, a S. eburneumnál a szilidianin főkomponensek a maghéjban feldúsulva fordulnak elő. Hasonló a helyzet a fehér virágú színváltozatnál is. Táblázat Mechanikusan szétválasztott Mh. és Hm. összetétele Vizsgálati adatok Silybum marianum lila virágú fehér virágú Mh. Hm. Mh. Hm. S. eburneum lila virágú Mh. Hm. megoszlás g/g 1,6 1,6 2,0 1,7 1,7 1,8 zsíros-olaj % 4,4 44,1 5,8 43,3 7,8 43,6 össz-flavon % 6,9 0,9 6,4 0,9 6,8 0,9 komponensek A 2,1 0,9 1,9 1,0 1,7 1,0 komponensek B 0,8 0,6 komponensek C 0,6 3,6 komponensek D 4,4 4> <t> 0,4 <t> komponensek E 4,3
