168055. lajstromszámú szabadalom • Eljárás szubsztituált karbonsavamidok előállítására
11 168Ü55 12 Gátlás Próba szám Vegyület % 13. 4-(2 '-hidroxi-3 '-metoxi-cinnamoilamino)-benzoesav 33,5 14. N-(2',3'-dimetoxi-cinnamoil)antranilsav 56,8 15. 3-(2' ,3 '-dime toxi- cinnamoilamino)-benzoesav 41,1 16. N-(3'-metoxi-4'-n-propoxi-cinnamoil)-antranilsav 52,2 17. N<3'-metoxi-4'-izopropoxi-cin-namoü)-antranilsav 47,1 18. N-(3',4'-dimetoxi-cinnamoil)antranilsav 46,1 19. N-(2',4',5'-trimetoxi-cinnamoil)antranilsav 56.8 20. N-(3',4'-dimetoxi-hidrocinnamoil)-antranilsav 55,4 21. N-(3',4'-dimetoxi-0-metil-cinnamoil)-antranilsav 66,2 22. N-[3'-metoxi-4'-(2,3-dihidroxipropoxi)-cinnamoil ]-antranilsav 9,0 23. N-(3 '-metoxW-karboxilmetoxicinnamoil)-antranilsav 0 10 15 20 25 A közölt eredmények világosan mutatják, hogy az új aromás karbonsavamid-származékok farmakológiai hatása csaknem azonos vagy nagyobb a klórfenezinénél. A szubsztituált fenilcsoportot tartalmazó 30 cinnamoil-amino-benzoesav-származékok hatása általában erősebb, mint a szubsztituálatlan cinnamoilamino-benzoesav-származékoké. Mindamellett egy hidrofilcsoporttal szubsztituált cinnamoil-amino-benzoesav-származéknak gyakorlatilag nincs hatása. 9. példa Szenzitizált hízósejtek szétesésére gyakorolt hatás Normális patkányokból elkülönített mezenterikus hízósejteket passzívan szenzitizáltunk patkány reagén antitesttel 37 C°-on inkubálva. Az inkubálás után a specifikus antigént (DNP-Ascaris) hozzáadtuk az inkubációs közeghez, majd ezeket a mezenterizált hízósejteket formaiinnal rögzítettük, és 0,1% toluidinkékkel (ecetsav-puffer, 4,6 pH) festettük. Az antigénantitest reakció következtében szétesett hízósejtek számát mikroszkópon megszámláltuk. A szétesett hízósejtek számát a specifikus antigén hozzáadása nélkül is megszámláltuk. Egy adott vizsgálati vegyületet 1%-os nátrium-hidrogén-karbonát-oldatban hozzáadtunk 10~5 g/ml koncentrációban az inkubációs közeghez 5 perccel az antigénnel való kezelés előtt, míg a kontrollcsoporthoz csak a hordozó közeget adtuk. A pozitív kontrollként használt dinátrium-kromoglukát általában jól ismert allergen reakció okozta hízósejtszétesés inhibitoraként. A vizsgált vegyületek hízósejtszétesést gátló hatá-(P-Q)-(R-Q) sát összehasonlítottuk a —(P_Q) X 100 képlet alapján számított százalékos értékkel. Ebben a képletben P a kontrollcsoport szétesett hízósejtjeinek százaléka, Q a spontán szétesett hízósejtek százaléka és R az adott vizsgálati vegyülettel kezelt csoportban a szétesett hízósejtek százaléka. 35 40 45 50 55 60 65 A módszer alkalmasnak látszik annak megállapítására, hogy egy adott vizsgált vegyület gátolja-e a hízósejtek szétesését és kémiai hatóanyagoknak a hízósejtekből való felszabadulását. A próbák eredményét a következő táblázat mutatja: n-'u - \/ -1 • Gátlás Próba szám Vegyület „ 1. kontroll 0 2. dinátriumkromoglukát 16 3. N-{3',4'-dimetoxi-cinnamoil)antranilsav 33 4. N-(3',4'-dimetoxi-0-metil-cinnamoil)-antranilsav 45 5. 3-(4'-metoxi-cinnamoilamino)benzoesav 18 6. N-(3'-metoxi-4'-n-propoxi-cinnamoü)-antranilsav 37 A közölt eredmények világosan mutatják, hogy a találmány szerinti új aromás karbonsavamid-származékok farmakológiai hatása csaknem azonos vagy nagyobb a dinátrium-kromoglukáténál. 10. példa Kísérleti asztma patkányokban Húsz 120-150 g-os normális hím patkányt 5-5 patkányonként beosztottunk négy csoportba. Minden csoportnak perorálisan beadtunk 0 mg/kg, 5 mg/kg, 10 mg/kg, illetve 20 mg/kg 2-(3',4'-dimetoxicinnamoil-amino)-benzoesavat tartalmazó 5 ml 1%-os vizes nátrium-hidrogén-karbonát-oldatot. Két óra elmúltával valamennyi patkányt passzívan szenzitizáltuk patkány reagin antitest intravénás befecskendezésével. A szenzitizálás után 24 órával kanült vezettünk be a légcsövükbe és a nyaki verőerükbe. A légzés ütemét és térfogatát és a szervezeti vérnyomást egyidejűen regisztráltuk a poligráfon. A próbák eredményét a csatolt ábrán mutatjuk be. A specifikus antigén (DNP-Ascaris) befecskendezésével kiváltott asztmatüneteket észleltük. Mint az ábrából kitűnik, a lélegzés ütemének csökkenése volt megfigyelhető a kontrollon az antigén befecskendezése utáni harmadik perctől. Másrészt a 33. számú vegyület 5 mg/kg vagy nagyobb adagban gátlóan hatott. A lélegzési térfogat csökkenése tekintetében ez a vegyület 10 mg/kg adagban mutatott gátlást. A vegyület nem gátolta a vérnyomáscsökkenést közvetlenül a kezelés után, de gátló hatást mutatott a későbbi csökkenésre. 11. példa Akut toxicitás A találmány szerinti új aromás karbonsav-amid származékok 50%-os letalis adagját (LDS0 ) meghatároztuk 6 hetes dd-törzsű hím és nőstény egereken perorális beadással és 7 hetes Wistar törzsű hím és nőstény patkányokon orális és intraperitoneális beadással. Minden kísérleti állatot légkondicionált szobában tartottunk 22 ± 1 C°-on és 55 ± 5% relatív páratartalomnál az egész kísérlet folyamán. Valamennyi állatnak sajtolt élelmiszer tablettákat adtunk, és víz korlátlanul állt rendelkezésre palackból. Tíz állatból álló 5 csoportot kezeltünk. 6
