168017. lajstromszámú szabadalom • Eljárás 7béta-amino-3-cefem-3-ol- 4-karbonsavszármazékok előállítására
61 168017 62 hatunk vízmentes kálium-karbonát jelenlétében, továbbá 1 -metil-3-(4-metil-fenil)-triazént, trimetil-oxónium-tetrafluoborátot diizopropil-etil-amin jelenlétében, vagy trifluor-metánszulfbnsav-metil-észtert diizopropil-etil-amin jelenlétében a kívánt 7-béta-amino-3-metoxi-3-cefem-4-karbonsav-difenil-metil-észter előállítása céljából. Ha diazo-n-butánt, l-etil-3-(4-metil-fenil)-triazént, illetve l-benzil-3-(4-metil-fenil)-triazént használunk, úgy hasonló módon 7-béta-amino-3-n-butil-oxi-3-cefem-4-karbonsav-difenil-metil-észtert, 7-béta-amino-3-et ü-oxi-3-cefem4-karbonsav-difenil-metil-észtert, illetve 7-béta-amino-3-benzil-oxi-3-cefem-4-karbonsavdifenil-metil-észtert kapunk. B) 30 ml metilénkloridban oldott 0,514 g 3-meto x i - 7 - b éta-fenil-acetil-amino-3 -cefem-4-karbonsav-difenil-metil-észtert lehűtünk -10°-ra és hozzáadunk 0,8 ml abszolút piridint és 8%-os metilénkloridos foszfor-pentaklorid-oldatót. A reakcióelegyet 1 óráig —10 és —5° között keverjük, majd lehűtjük —30°-ra és hozzáadunk 5 ml metanolt. 1 óráig keverjük -10 és -5° között, 1 óráig 0°-on és 1 óráig szobahőmérsékleten. Hozzáadunk 20 ml 0,5 M-os vizes kálium-dihidrogén-foszfát-oldatot, pH 2,4-en az elegyet 30 percig keverjük, felhígítjuk metilénkloriddal, a vizes fázist leválasztjuk és metilénkloriddal extraháljuk. Az egyesített szerves fázisokat telített vizes nátrium-klorid-oldattal mossuk, nátrium-szulfát felett szárítjuk és csökkentett nyomáson bepároljuk. A maradékot dietil-éterrel digeráljuk és 16 óráig 0°-on állni hagyjuk; a csapadékot leszűrjük, dietil-éterrel mossuk és szárítjuk. Világos homokszínű por formájában 7-bétaamino-3-metoxi-3-cefem-4-karbonsav-difenil-metilésztert kapunk. Rétegkromatogram (szilikagél; előhívás jódgőzzel): Rf~0,17 (rendszer: ecetsav-etil-észter); ultraibolya abszorpciós spektrum (95%-os vizes etanolban): Xmax = 258 mfi (£ = 5250) és 264 mp (£ = 5300), és \váll = 290 w (S = 5200); infravörös abszorpciós spektrum (dioxánban): jellemző sávok 2,87 (széles), 5,62, 5,85 és 6,26 /u-nál. C)1500 ml 10%-os vizes dikálium-hidrogén-foszfátban oldott 50 g cefalosporin C nátriumsót 1200 ml acetonnal felhígítunk és 0°-on 21 g benzoil-kloridot adunk hozzá. 30 percig 0°-on és 45 percig 20°-on keverjük, miközben a pH-t 50%-os vizes trikáliumfoszfát-oldat hozzáadása által állandóan 8,5-en tartjuk. Csökkentett nyomáson körülbelül fele térfogatra bepároljuk, ecetsav-etil-észterrel mossuk, pH-ját 20%-os vizes foszforsawal 2,0-re állítjuk be és ecetsavetil-észterrel extraháljuk. A szerves fázist megszárítjuk és csökkentett nyomáson bepároljuk; az acetonból átkristályosított maradék N-benzoil-cefalosporin C; olvadáspont 117—119°; rétegkromatogram (szilikagél): Rf = 0,37 (rendszer: n-butanol(ecetsav)víz 75:7,5:21) és Rf = 0,08 (rendszer: ecetsav-etil-észter(piridin/ecetsav)víz 62:21/6:11). 85 ml 0,5 mM-os vizes dikálium-hidrogén-foszfátoldatban oldott 4,7 g N-benzoil-cefalosporin C-t és 9 ml dimetil-formamidot 4,7 g alumínium-amalgámmal együtt 45 percig pH 6,0-nál és 45° -on keverjük, miközben a pH-t 20%-os vizes foszforsavoldat hozzáadása által állandó értéken tartjuk. Hozzáadunk 100 ml jeget, rárétegezünk hideg ecetsav-etil-észtert és tömény foszforsawal a pH-t 2,0-re állítjuk be. Az elegyet nátrium-kloriddal telítjük, a szerves fázist leválasztjuk és a vizes fázist kétszer átmossuk ecetsavetil-észterrel A telített vizes nátrium-klorid-oldattal mosott és nátrium-szulfát felett szárított, egyesített szerves ki-5 vonatok csökkentett nyomáson bepárolva csapadékot adnak, mely ecetsav-etil-észterrel kikristályosítható. Lassan felhígítjuk 15 ml ecetsav-etil-észter/hexán 2:3 eleggyel, 2 óráig —5°-on állni hagyjuk, szűrjük és ecetsav-etil-észter/dietil-éter 1:4 elegyből kikristályo-10 sítva 7-béta-(5-benzoil-amino-5-karboxi-valeril-amino)-3-metilén-cefam-4-alfa-karbonsavat kapunk. Olvadáspont 82-89° (bomlással); rétegkromatogram (szilikagél): Rf = 0,53 (rendszer: n-butanol/ecetsav/víz 75:7,5:21), és Rf = 0,08 (rendszer: ecetsav-etil-ész-15 ter/piridin/ecetsav/víz 62:21:6:11). A fent használt alumínium-amalgámot a következőképpen állíthatjuk elő: 3,3 g alumíniumdara és 100 ml 50%-os vizes nátrium-hidroxid-oldat elegyét 30 másodpercig rázzuk és a felülúszó folyadékot dekan-20 tálva 3 x 300 ml vízzel mossuk. A maradékot 3 percig 130 ml 0,3%os higany(H)-klorid-oldattal kezeljük és 3 x 300 ml vízzel mossuk. Az egész kezelést megismételjük és az alumínium-amalgámot végül háromszor mossuk tetrahidrofuránnal. A terméket mintegy 15 25 ml ecetsav-etil-észterrel visszük át a reakcióedénybe. 25 ml dioxánban oldott 2,3 g 7-béta-(5-benzoila minő - 5 -karboxi-valeril-amino)-3-metilén-cefam-4-alfa-karbonsavhoz 10 perc alatt cseppenként hozzáadunk 10 ml n-pentánban oldott 2,5 g difenil-diazo-30 metánt. 30 percig szobahőmérsékleten keverjük, a feles difenil-diazo-metánt néhány csepp ecetsavval (jégecet) elbontjuk és az oldatot csökkentett nyomás alatt bepároljuk. A maradékot 80 g szilikagélen kromatografáljuk; a 7-béta-(5-benzoil-amino-5-difenil-35 metoxi-karbonil-valeril-amino)-3- metilén-cefam-4-alfa-karbonsav-difenil-metil-észtert toluol/ecetsav-etilészter 3:1 eleggyel eluáljuk, majd ecetsav-metil-észter) ciklohexán-elegyből kikristályosítjuk. Olvadáspont 180-181°; rétegkromatográfia (szilikagél): Rf = 0,24 40 (rendszer: toluol) ecetsav-etil-észter 2:1); ultraibolya abszorpciós spektrum (95% vizes etanolból): nincs jellemző sáv; infravörös abszorpciós spektrum: (metilén-kloridban) jellemző sávok 5,66, 5,76 5,95, 6,03, 6,64 és 6,70 /Lí-nál. 45 150 ml metilén-kloridban oldott 1,59 g 7-béta-(5-b e n z o i 1 - a m i no-5-difenil-metoxi-karbonil-valeril-amin o) - 3-metilén-cefam -4-alfa-karbonsav-difenil-metilésztert lehűtünk —70°-ra és erőteljes keverés közben 12 percig és 43 másodpercig ózon- és oxigéngáz 50 eleggyel (0,2 mM ózon per perc), majd 1 ml dimetilszulfiddal kezeljük. 5 percig —70°-on és 30 percig szobahőmérsékleten keverjük, és csökkentett nyomáson bepároljuk. A 7-béta-(5-benzoil-amino-5-difenilmetoxi - karbonil - valeril - amino) - cefam - 3 - on - 4£ - kar -55 bonsav-difenil-metil-észtert tartalmazó csapadékot feloldjuk 40 ml metanolban, jeges fürdőben lehűtjük és maradandó sárga szineződésig dietil-éterben oldott diazo-metánt adunk hozzá. Á reakcióelegyet csökkentett nyomás alatt bepároljuk és a maradékot 100 g 60 szilikagélen kromatografáljuk. A 7-béta-(5-benzoila mi no-5-difenil-metoxi-karbonil-valeril-amino)-3-metoxi - 3 - cefem- 4- karbonsav - difenil - metil - észtert toluol/ecetsav-etil-észter 1:1 keverékkel eluáljuk és a kapott amorf terméket rétegkromatografáljuk (szi-65 likagél); Rf = 0,45 (rendszer: toluol-ecetsav-etüészter 31
