168017. lajstromszámú szabadalom • Eljárás 7béta-amino-3-cefem-3-ol- 4-karbonsavszármazékok előállítására
41 168017 42 oldatot metilénkloriddal extraháljuk és az egyesített szerves oldatokat telített vizes nátrium-klorid-oldattal mossuk, nátrium-szulfát felett szárítjuk, és csökkentett nyomás alatt bepároljuk. A maradékot preparatív rétegkromatográfiával tisztítjuk (szilikagél; rendszer: 5 dietil-éter; azonosítás X = 254 mju-os ultraibolyafénnyel; Rf~0,39). Rétegkromatográfiásan egységes 7-béta-[D-alfa -tercier-butil-oxi-karbonil-amino-alfa(1,4-ciklohexadien il)-acetil-amino]-3-metoxi-3-cefem-4-karbonsav-difenil-metil-észtert kapunk amorf ter- 10 mék formájában. Rétegkromatogram (szilikagél; azonosítás): Rf~0,39 (rendszer: dietil-éter); [a] 2£ = + 1° ± 1° (c = 0,745 kloroformban); ultraibolya abszorpciós spektrum (95%-os vizes etanolban): Xmax = 263 nvi (G = 6700) és Xváll = 280 nui (£ = 6300); 15 infravörös abszorpciós spektrum (metilénkloridban): jellemző sávok 2,96, 5,64, 5,86, 5,90 (váll), 6,27 és 6,23 Aí-nál. Ha a fenti eljárásnál 0,09 g D-alfa-terc-butil-oxikarbonil-amino-alfa-(l,4-ciklohexadienil)-ecetsavat, 20 0,038 ml N-metil-morfolin és t),052 ml klór-hangyasav-izobutil-észtert használunk, a keveréket 30 percig -15°-on nitrogénatmoszférában keverjük, hozzáadunk 0,125 g 7 beta-amino-3-metoxi-3-cefem-4-karbonsav-difenil-metil-észtert és 0,035 ml N-metil-mor- 25 fölint, 30 percig 10 és 30 percig 0°-on keverjük és a fentiek szerint dolgozunk, nyersterméket kapunk, melyet preparatív rétegkromatográfiával megtisztítunk (szilikagél; rendszer: dietil-éter; azonosítás X = 254 nvi-os ultraibolya-fénnyel). 0,51 Rf-értéket mu- 30 tató 7-béta-D-alfa-terc-butil-oxi-karbonil-oxi-karbonilamino - alfa - (1,4-ciklohexadienil)-acetil-amino - 3 -met -oxi-2-cefe m-4- alfa - karbonsav - difenil-metil-észtert kapunk. Olvadáspont 153-154° metilén-klorid/pentán elegyből átkristályosítva; rétegkromatogram (szilika- 35 gél; azonosítás jódgőzzel): Rf 0,51 (rendszer: dietiléter); [a]$ = + 176° ± 1° (c = 0,541 kloroformban); ultraibolya abszorpciós spektrum (95%-os víztartalmú etanolban): Xmax = 257 m/Lí (e = 3600); ultraibolya abszorpciós spektrum (metilén-kloridban): ^Q jellemző sávok 2,96, 5,64, 5,76, 5,92, 6,18 és 6,75 /u-nál; és a 7-béta-[D-alfa-terc-butil-oxi-karbonil-amino-alfa-)l ,4-ciklohexadienil)-acetil -amino] -3 -metoxicefem-4-karbonsav-difenil-metil-észter Rf~0,39 értékével, mely vegyület azonos a fent leírt eljárással 45 előállítható termékkel. 6. példa 0,200 g 7-béta-[D-alfa tercier-butil-oxi-karbonil amino-alfa(l,4-ciklohexadienil)-acetil-amino]-3-acet- 59 oxi-3-cefem-4-karbonsav-difenil-metil-észter, 0,5 ml anizoi és 10 ml előre lehűtött trifluor-ecetsav elegyét 15 percig 0°-on keverjük, majd hozzáadunk 50 ml hideg toluolt és csökkentett nyomás alatt bepároljuk. A maradékot elkeverjük dietil-éterrel és a por alakú csapadékot leszűrjük és megszárítjuk. A 7-béta-[D-alfa-amino-alfa-(1,4-ciklohexadienil) -acetil-amino]-3-metoxi-3-cefem-4-karbonsav és trifluor-ecetsav kapott sóját körülbelül 6 ml vízben feloldjuk, a pH-t 2 N sósavval 1,5-re állítjuk be, a vizes oldatot 20 ml ecetsav-etil-észterrel mossuk és pH-ját metanollal készített 20%-os trietanol-aminoldat cseppenkénti hozzáadása által 5,0-re állítjuk be. Felhígítjuk 20 ml acetonnal és 10 ml dietil-éterrel és az elegyet 16 óráig 0°-on állni hagyjuk. A kapott csapadékot leszűrjük, acetonnal és dietil-éterrel mossuk és szárítjuk. 7-béta[D-alfa amino-alfa-(l,4-ciklohexadienil)-acetil-amino]-3-metoxi-3-cefem-4-karbonsavat kapunk belső só formájában. Olvadáspont 170° (bomlással); rétegkromatogram (szilikagél; azonosítás jódgőzzel): Rf~ 0,26 (rendszer: n-butanol(ecetsav)víz 67:10:23) és Rf~0,58 (rendszer: izopropanol(hangyasav)víz 77:4:19); ultraibolya abszorpciós spektrum: Xmax = 267 mu (e = 6100) 0,1 N sósavban, és Xmax = 268 my. (=6600) 0,1 N vizes nátrium-hidrogén-karbonátoldatban. 7.példa 0,353 g D-alfa-terc-butil-oxi-karbonil-amino-alfa(4-hidroxi-fenil)-ecetsav 100 ml metilénkloriddal készült, 0°-ra lehűtött oldatát 30 percig 0,132 ml N-metil-morfolinnal és 0,180 ml klór-hangyasav-izobutil-észterrel nitrogén-atmoszférában keverjük, majd -10°-ra lehűtjük és egymás után hozzáadunk 0,400 g 7-béta-amino-3 -metoxi-3-cefem-4-karbonsav-difenilmetil-észtert és 0,110 ml N-metil-morfolint. A reakcióelegyet 30 percig -10°-on és 30 percig 0°on keverjük, hozzáadunk 30 ml vizet, és a pH-t 40%-os vizes dikálium-hidrogén-foszfátoldattal 7,9-re állítjuk be. A fázisokat szétválasztjuk, a vizes oldatot metilénkloriddal extraháljuk és az egyesített szerves oldatokat telített vizes nátrium-klorid-oldattal mossuk, nátrium-szulfát felett szárítjuk, és csökkentett nyomás alatt bepároljuk. A maradékot preperatív rétegkromatográfiával tisztítjuk (szilikagél; rendszer: toluol/ecetsav-etil-észter 1:1; azonosítás X = 254 m/i-os ultraibolya-fénnyel; Rf~0,32). Rétegkromatográfiásan egységes 7-béta-[D-alfa-terc-butil-oxi-karbonilamino-alfa-(4-hidroxi-fenil)-acetil-amino]-3- metoxi-3-cefem-4-karbonsav-difenil-metil-észtert kapunk. Rétegkromatogram (szilikagél; azonosítás jódgőzzel): Rf~0,35 (rendszer: toluol/ecetsav-etil-észter 1:1); [a] 2£= -1° ± 1° (c =0,566 kloroformban); ultraibolya abszorpciós spektrum (95%-os vizes etanolban): Xmax = 276 m/n (£ = 7400); infravörös abszorpciós spektrum (metilénkloridban): jellemző sávok 2,83, 2,96, 5,64, 5,68, 5,91 (váll), 6,23, 6,28, 6,65 és 6,72M-nál. 8. példa 0,095 g 7-béta-[D-alfa-terc-butil-oxi-karbonil-amino-alfa-(4-hidroxi-fenil)-acetil-amino]-3-metoxi-3-cefem-4-karbonsav-difenil-metil-észtert, 0,25 ml anizolt és 5 ml előre lehűtött trifluor-ecetsavat 15 percig 0°-on keverünk, majd hozzáadunk 50 ml hideg toluolt és csökkentett nyomáson bepároljuk. A maradékot dietil-éterrel elkeverjük és a por alakú csapadékét leszűrjük és megszárítjuk. A 7-béta-[D-alfa-(4-hi d r o xi - f e n il)-acetil-amino] -3-metoxi-3-cefem-4-kar-55 bonsav és a trifluor-ecetsav így kapott sóját feloldjuk körülbelül 5 ml vízben, az oldat pH-ját 2 n sósavval 1,5-re állítjuk be, a vizes oldatot 20 ml ecetsav-etilészterrel mossuk és pH-ját metanollal készített 20%-os trietil-amin-oldat cseppenkénti hozzáadásával 5,0-re 60 állítjuk be, miközben színtelen csapadék képződik. Felhígítjuk 8 ml acetonnal és az elegyet 16 óráig 0°-on állni hagyjuk. A csapadékot leszűrjük, acetonnal és dietil-éterrel mossuk és csökkentett nyomás alatt szárítjuk. 7-béta-[D-alfa-amino-alfa-(4-hidroxi-fe-65 nil)-acetil-amino]-3-metoxi-3-cefem4-karbonsavat ka-21
