168017. lajstromszámú szabadalom • Eljárás 7béta-amino-3-cefem-3-ol- 4-karbonsavszármazékok előállítására
39 168017 40 csoló, oldó és liofiléző eljárásokkal állíthatók elő és 0,1-1007c, különösen 1-50% hatóanyagot tartalmaznak. A leírással kapcsolatban megjegyzendő, hogy a „kisszénatomszámú" megjelölés - pontos meghatározás hiányában - legfeljebb 7, előnyösen 4 szénatomot jelent; acilcsoportok legfeljebb 20, előnyösen legfeljebb 12 és elsősorban 7 szénatomot tartalmaznak. A következő példák a találmány bemutatására szolgálnak; a hőmérsékletet Celsius-fokokban adjuk meg. 1. példa 0,250 g 7-béta-amino-3-metoxi-3-cefem-4-karbonsav-difenil-metil-észtert 25 ml metilénkloridban szuszpendálunk, hozzáadunk 0°-on, nitrogénatmoszférában 1 ml piridint és 0,5 ml fenil-ecetsavkloridot és 30 percig ezen a hőmérsékleten keverjük. A reakcióelegyet csökkentett nyomás alatt bepároljuk; a maradékot 10 percig 20 ml dioxán/víz 1:1 eleggyel keverjük és felhígítjuk metilénkloriddal. A vizes fázist elválasztjuk és metilénkloriddal extraháljuk. Az egyesített szerves fázisokat telített vizes nátrium-hidrogén-karbonát-oldattal és telített vizes nátrium-klorid-oldattal mossuk, nátrium-szulfát felett szárítjuk és csökkentett nyomás alatt bepároljuk. A nyersterméket preparatív rétegkromatográfiával tisztítjuk, melyhez oldószerként toluol/ecetsav-etil-észter 1:1 elegyét használjuk. A X = 250 m/i-os ultraibolya-fénynél látható zónát (Rf~0,35) aceton/metanol 4:1 eleggyel eluáljuk. A kapott termék 3-metoxi-7-béta-fenil-acetil-amin o - 3 - c efem-4-karbonsav-difenil-metil-észter. Rétegkromatogram (szilikagél): Rf~0,37 (rendszer: toluol/ecetsav-etil-észter 1:1); ultraibolya adszorpciós spektrum (95%-os vizes etanolban): Xmax = 258 rryi (£ = 6340), Xmax = 264 írui (E = 6350) és X váll = 281 m/i /= 5600); infravörös abszorpciós spektrum (metilén-kloridban): jellemző sávok 2,94, 3,02, 5,62, 5,83, 5,93, 6,26 és 6,70 M-nál. 2. példa 0,06 g 3-metoxi-7-béta-fenil-acetil-amino-3-cefem-4-karbonsav-difenil-metil-észter, 0,05 ml anizol és 1 ml trifluorecetsav keverékét 5 percig szobahőn állni hagyjuk, majd utána csökkentett nyomás alatt bepároljuk. A maradékot felvesszük kloroform-metanol 1:1 eleggyel és 5 g szilikagélen (körülbelül 5% víztartalommal) kromatografáljuk. 30-50% acetont tartalmazó metilénkloriddal az amorf 3-metoxi-7-béta-fenil-acetil-amino-3-cefem-4-karbonsavat eluáljuk, dioxánból liofilezzük. Ultraibolya abszorpciós spektrum (95%-os vizes etanolban): Xmax = 565 rrui (£ = 5800); infravörös abszorpciós spektrum (metilénkloridban): jellemző sávok 3,03, 5,60, 5,74, 5,92, 6,24 és 6,67 fi-nál, 3. példa. 0,257 g D-alfa-terc-butil-oxi-karbonil-amino-alfa(2-tienil)-ecetsav 25 ml metilénkloriddal készített és lehűtött oldatát 0,097 ml N-metil-morfolinnal és 0,129 ml klór-hangyasav-izobutil-észterrel elegyítjük és 30 percig nitrogénatmoszférában keverjük, majd lehűtjük -10°-ra és egymás után 0,300 g 7-béta-amin o - 3-metoxi-3-cefern-4-karbonsav-difenil-metil-észterrel és 0,085 ml N-metil-morfolinnal kezeljük. A reakcióelegyet 30 percig -10°-on és 30 percig 0 -on keverjük, majd hozzáadunk 20 ml vizet és a pH-t 40%-os vizes dikálium-hidrogén-foszfát-oldat hozzáadása által 7,9-re állítjuk be. A fázisokat elválasztjuk, 5 a vizes oldatot metilénkloriddal extraháljuk, és az egyesített szerves oldatokat telített vizes nátrium-klorid-oldattal mossuk, nátrium-szulfát felett szárítjuk és csökkentett nyomás alatt bepároljuk. Az olajos maradékot preparatív rétegkromatográfiával tisztítjuk (szi-10 likagél; rendszer: dietil-éter; azonosítás X = 254 nui-os ultraibolya-fénnyel). így rétegkromatográfiásan egységes amorf 7-béta-[D-alfa-terc-butil-oxi-karbonil-amino-alfa-(2-tienil)-acetil-amino]-3-metoxi-3-cefem-4-karbonsav-difenil-metil-észtert kapunk. Rétegkroma-15 togram (szilikagél; azonosítás X = 254 nv-os ultraibolya-fénnyel): Rf~0,34 (rendszer: dietiléter); [a] 2ß = +26° ± 1° (c = 0,86 kloroformban); ultraibolya abszorpciós spektrum (95%-os vizes etanolban): X max = 240 w (£ = 12 500) és 280 m/i (£ = 600); 20 infravörös abszorpciós spektrum (metilénkloridban): jellemző sávok 2,94, 5,62, 5,85, 6,26 és 6,72 /u-nál. 4. példa 0,200 g 7-béta-[D-alfa-terc-butil-oxi-karbonil-ami-25 no-alfa-(2-tienil)-acetil-amino]-3-metoxi-3-cefem-4-karbonsav-difenil-metil-észter, 0,5 ml anizol és 10 ml előre lehűtött trifluor-ecetsav elegyét 15 percig 0°-on keverjük, majd hozzáadunk 50 ml hideg toluolt és csökkentett nyomás alatt bepároljuk. A maradékot 30 dietil-éterrel elkeverjük és a por alakú csapadékot leszűrjük és szárítjuk. A 7-béta-[D-alfa-amino-alfa-(2-tienil)-acetil-amino]-3-metoxi-3-cefem4-karbonsav és a trifluor-ecetsav kapott sóját körülbelül 6 ml vízben feloldjuk, az oldat pH-ját 2 n sósav hozzáadásával 35 1,5-re állítjuk be, a vizes oldatot 20 ml ecetsav-etilészterrel mossuk és pH-ját metanollal készített 20%-os trietil-amin-oldat cseppenkénti hozzáadásával 5,0-re állítjuk be. Felhígítjuk 20 ml acetonnal és az elegyet 16 óráig 0°-on állni hagyjuk. A finom, színtelen és 40 mikrokristályos port leszűrjük, acetonnal mossuk és szárítjuk. 7-béta-[D-alfa-amino-alfa-(2-tienil)-acetilamino]-3-metoxi-3-cefem-4-karbonsavat kapunk belső só formájában. Olvadáspont 140° (bomlással); rétegkromatogram (szilikagél; azonosítás jódgőzzel): 45 Rf~0,22 (rendszer: n-butanol(ecetsav)víz 67:10:23) és Rf~0,53 (rendszer: izopropanol(hangyasav)víz 77:4:19); ultraibolya abszorpciós spektrum: Xmax = 235 m/i ( =11400) és Xváll = 272 rtiAt (£ = 6100) 0,1 N sósavban, és Xmax = 238 nyz (£ = 11800) és X vall 50 = 267 nv (£ = 650Ó) 0,1 N vizes nátrium-hidrogénkarbonát-oldatban. 5. példa 0,253 g D-alfa-terc-butil-oxi-karbonil-amino-alfa-55 (l,4-ciklohexadienil)-ecetsav 75 ml metilénkloriddal készült 0°-ra lehűtött oldatát 30 percig 0,097 ml N-metil-morfolinnal és 0,129 ml klór-ecetsav-izobutilészterrel nitrogénatmoszférában keverjük, majd —10°ra lehűtjük és egymás után 0,30 g 7-béta-amino-3-60 metoxi-3-cefem-4-karbonsav-difenil-metil-észtert és 0,085 ml N-metil-morfolint adunk hozzá. A reakcióelegyet 30 percig —10°-on és 30 percig 0°-on keverjük, hozzáadunk 30 ml vizet és pH-ját 40%-os vizes dikálium-hidrogén-foszfát-oldat hozzáadása által 65 7,9-re állítjuk be. A fázisokat szétválasztjuk, a vizes 20
