167999. lajstromszámú szabadalom • Eljárás 8-rövidszénláncú alkil-5-oxo-5,8-dihidro-pirido (2,3-d) pirimidin-6-karbonsavak előállítására
19 167999 20 Számított: Talált: C = 60,59%; N= 15,36%; C = 60,29%; N= 15,38%; H = 5,70%; Cl = 7,79%; H = 5,72%; Cl = 7,76%. A fenti észtert elszappanosítva a megfelelő savat állíthatjuk elő. A dimetüformamidos átkristályosítással tisztított sav olvadáspontja 216 °C. Az eljárás hozama 68%. Elemzés: (C21 H 22 C1N S 0 3 ) Ms: 427,5 Számított: C = 58,94%; H = 5,14%; N= 16,37%; Cl = 8,30%; Talált: C = 58,88%; H = 5,15%; N= 16,42%; Cl = 8,40%. 16. példa 2-[4-(p-Metoxibenzil)-piperazinil]-5-oxo-8-etil-5,8-dihidro-pirido[2,3-d]pirimidin-6-karbonsav. [(I) általános képletű vegyület, R (12) képietu csoport, R'=-C2H 5 ] 2- klór-5-oxo-6-karbetoxi 8-etil-5,8-dihidro pirido[2,3-d]pirimidint a 7. példában ismertetett módon l-(p-metoxibenzil)-piperazinnal kondenzálunk, majd a keletkezett 2-(p-metoxibenzil-piperazinil)-5-oxo-6-karbetoxi-8-etil-5,8-dihidro-pirido[2,3-d]pirímidint 1 :1 aceton-benzol elegyből átkristályosítjuk. A 70%-os hozammal kapott termék olvadáspontja 136 °C. Elemzés: (C24 H 29 N s 0 4 ) Ms: 451,51 Számított: C = 63,84%; H = 6,47%; N= 15,51%; Talált: C = 63,75%; H = 6,41%; N= 15,31%. A fenti észtert elszappanosítva a megfelelő savat állíthatjuk elő. A savat dimetilformamidban történt átkristályosítással tisztítjuk. A 60%-os hozammal előállított termék olvadáspontja: 200 °C. Elemzés: (C22 H 2S N s 0 4 ) Ms: 423,46 Számított: C = 62,40%; H = 5,95%; N = 16,55%; Talált: C = 62,42%; H = 5,93%; N= 16,55%. A találmány szerinti eljárással előállított vegyületek antimikrobiális hatását in vitro vizsgálatokkal igazoltuk. A vizsgálatok során a baktériumokat az alábbi összetételű táptalajokban tenyésztettük: 5 a) Triptikáz-szója tápközeg (TSZK). Ez a tápközeg igen kedvező a baktériumok többségének. A közeg összetétele: kazein tripszines emésztésével előállított peptonl5g szója papainos emésztésével előállított 10 pepton 5 g nátriumklorid 15 g í víz ad 1000 ml. A közeg pH-ja sterilizálás után 7,3. b) Közönséges agar-agar tápközeg (AAK). Ez a 15 közeg kevésbé gazdag tápelemekben, összetétele a következő: húsleves-kivonat 3 g pepton 5 g agar 15 g 20 víz ad 1000 ml. A közeg pH-ja 120 C°-on végzett sterilizálás után 6,8. Az I. táblázatban megadjuk a találmány szerinti eljárással előállított vegyületek Mg/ml egységben kifejezett gátló koncentrációját a kétféle közegben te-25 nyesztett mikroorganizmusokkal szemben. A vegyületeket 3 gramm-pozitív mikroorganizmuson (1-3. mikroorganizmusok) és 10 gramm-negatív mikroorganizmuson (4-13. mikroorganizmusok) vizsgáltuk. A vegyületek minimális gátló koncentrációit úgy hatá-30 roztuk meg, hogy a vegyületekből a kétféle tápközeggel sorozathígításokat készítettünk a 0,2-100 Mg/ml koncentrációtartományban, a töménységet 2 hatványai szerint növelve. A bouillonban 18 órán keresztül inkubált tenyészeteket ezerszeresre hígítottuk és a 35 törzseket többszörös átoltó berendezéssel vittük rá a táptalajra. A táptalajt tartalmazó Petri-csészéket 37 Cc -on inkubáltuk, a tenyésztés eredményét 18 órai inkubálás után olvastuk le. Minimális gátló koncentráció-40 nak azt a legkisebb koncentrációt tekintettük, amely még teljesen gátolta a kultúra növekedését. I. táblázat Törzsek 4. példa 5. példa 6. példa Törzsek TSZK AAK TSZK AAK TSZK AAK 1 Staphylococcus 209 P 50 1,6 100 3,1 12,5 3,1 2 Streptococcus „A" 12,5 12,5 6,2 25 12,5 3,1 3 BacÜlus subtilis 3,1 0,8 6,2 1,6 3,1 1,6 4 Bordetella bronchiseptica >100 100 100 50 >100 50 5 Pyocyanis A 22 >100 100 100 12,5 >100 50 6 Pypcyanis TUR >100 100 100 50 >100 50 7 Escherichia Coli 95 12,5 6,2 6,2 0,8 3,1 1,6 8 Klebsiella pneumoniae 0,8 0,4 6,2 0,4 1,6 0,4 9 Salmonella typni 12,5 6,2 3,1 3,1 6,2 12,5 10 Shigellia sonnei 12,5 3,1 1,6 0,8 1,6 1,6 11 Proteus vulgaris 12,5 3,1 6,2 1,6 6,2 50 12 Proteus mirabilis 25 12,5 6,2 6,2 12,5 3,1 13 Proteus morganii 0,8 0,4 1,6 0,8 1,6 1,6 10
