167402. lajstromszámú szabadalom • Új eljárás prosztaglandinok előállítására
167402 15 16 vékonyrétegkoromatográfiás vizsgálat alapján (eluálószer: 110:20:50 -.100 arányú etilacetát — ecetsav— izooktán—víz elegy) a 11,15-diepi-PGE^etilószternól kissé polárosabb, azonban nem annyira poláros, mint a PGE^etilészter. A termék 15-epi-PGE1 -etilészter. A 157—240. frakcióból 53 mg PGE^etilesztert különítünk el. A termék NMR spektrum alapján azonos a hiteles' mintával. (NMR = 1,21, 4,13, 4,20 5,7 ppm.) A PGEj-etilésztert a korábbiakban már ismertetett, önmagában ismert eljárásokkal, például észteráz-termelő mikroorganizmusokkal, így sütőélesztővel kezelve könnyen átalakíthatjuk PGEj-gyé. Hasonló eljárást ismertet a dl-15-dezoxiprosztaglandin-Ej-etilészter észter-csoportjának lehasítására a 2. példa. A 7. példa szerinti eljárás egyes lépéseit a (B) reakcióvázlaton szemléltetjük. 8. példa dl-ll-Dezoxi-prosztaglandin-E1 -metilészter előállítása. A 3-(l-etoxi-etoxi)-l-lítium-l-transz-oktén reagenst a korábban leírt módon állítjuk elő. 326 mg (1 mmól) 3-(l-etoxi-etoxi)-l-jód-l-transz-1-oktén 4 ml éterrel készített oldatát 0 °C-on 80 mg lítium-por 5 ml éterrel készített szuszpenziójával reagáltatjuk. A ,,vinillítium"-vegyületet tartalmazó éteres oldatot üveggyapot szűrőn keresztül 125 mg (0,32 mmól) tri-n-butil-foszfin — réz (I)jodid komplex 2 ml vízmentes dietiléterrel készített, acetonos szárazjég-fürdővel —78 °C-on tartott oldatába szűrjük. A kapott oldatot 20 percig —78°C-on keverjük, majd 107 mg (0,31 mmól) 2-(6'karbometoxihexil)-2-ciklopenten-l-on 2 ml éterrel készített oldatát adjuk hozzá. A reakcióelegyet —10 °C-ra hagyjuk melegedni, majd 1 órán át keverjük, és eközben a hőmérsékletet 0°C-ra hagyjuk emelkedni. A keverést 0 °C-on további 1 órán át folytatjuk. Ekkor az oldathoz 3 ml 20%-os, ammóniás ammóniumkloridoldatot (pH = 8,1) adunk, és az elegyet a fázisok elkülönüléséig keverjük. A sárga szerves fázist elválasztjuk a kék vizes fázistól, és a vizes fázist éterrel háromszor extraháljuk. Az éteres oldatokat egyesítjük, telített, vizes nátriumklorid-oldattal mossuk, magnéziumszulfát fölött szárítjuk, és bepároljuk. (+ )-15-(l-etoxi-etoxi)-ll-dezoxi-PGE1--metilésztert tartalmazó maradékot kapunk; NMR = 3,65, 3,2—3,75, 3,9—4,2, 4,5—4,9, 5,4—5,8 ppm. A kapott 280 g sötétvörös, olajos maradékot 1,9x30,5 cm méretű, 85 rész szilikagélt és 15 rész Celitet tartalmazó oszlopon kromatografáljuk. Az oszlopot gradiens-rendszerrel eluáljuk (400 ml 8:2 arányú benzol-etil-acetát elegy a szedőben és 400 ml benzol az elegyítőtartályban.) 6 ml-es eluátumfrakciókat gyűjtünk. A 92—134. frakciókból 53 mg terméket különítünk el, amelyet a védőcsoport eltávolítása érdekében sósavval kezelünk. Kromatográfiás tisztítás után 30 mg terméket kapunk, amelynek fizikai állandói a következők: tömegspektrum: molekula-ion 352 és 281 értéknél (M+, ül. M—71); NMR: ő = 3,65 (3H, s, CH3), 4,0 (1H, 5 m, C—15 karbinol-proton), 5,62 (2H, m, C—13 és C—14 vinü-protonok). A fenti adatok alapján a termék dl-11-dezoxi-prosztaglandin-Ej-metilészter. A 8. példa szerinti eljárás egyes lépéseit a (C) 10 reakcióvázlaton szemléltetjük. 9. példa dl-ll^ö-Didezoxi-prosztaglandin-Ej^ előállítása. 15 1,175 g réz(I)jodid — tri-n-butil-foszfin komplex (3,0 mmól) 2,5 ml vízmentes dietiléterrel készített oldatát 22,5 ml 0,27 mólos éteres transz-l-lítium-1--oktén-oldattal reagáltatjuk (e reagenst a korábban ismertetett eljárással, illetve a Zweifel-szakcikkben 20 leírt módon állítjuk elő). A 6,08 mmól lítium vegyületet tartalmazó oldatot fecskendővel csepegtetjük a nitrogénatmoszféra alatt tartott, —78 °C-os reakcióelegybe. Az elegyet 30 percig —78 °C-on keverjük, majd fecskendővel 450 mg (2 mmól) 2-(6'-25 4iarbometoxi-hexil)-2-ciklopenten-l-ont csepegtetünk hozzá. Az oldatot 0 °C-ra hagyjuk melegedni, ós jógfürdőn, 0°C-on további 2 órán át keverjük. Végül a reakcióelegyet szobahőmérsékletre hagyjuk melegedni. Mintegy 30 perc elteltével a sárga oldat 30 sötétedni kezd. Ekkor az elegyhez 20 ml, ammóniával telített, 20%-os, vizes ammóniumklorid-oldatot adunk. A kapott, 9-es pH-jú oldatot vákuumban leszűrjük. A szűrőlepényt 50 ml éterrel alaposan mossuk, majd a szűrletet és a mosófolyadékot egye-35 sítjük, választótölcsérben alaposan összerázzuk, és a fázisokat elválasztjuk egymástól. A vizes fázist 2X50 ml éterrel extraháljuk. Az éteres oldatokat egyesítjük, 50 ml telített, vizes nátriumkloridoldattal mossuk, magnéziumszulfát fölött szárítjuk, 40 és bepároljuk. A nyers, olajos maradékot 150 g szilikagélen kromatografáljuk. Az oszlopot gradiensrendszerrel eluáljuk; az eluálást tiszta benzollal kezdjük, majd a benzolhoz fokozatosan összesen 2 liter kloroformot adunk. Ezután az eluálást tiszta 45 kloroformmal folytatjuk. A kapott, körülbelül 500 mg nyers dl-lljlÖ-didezoxi-prosztaglandin-Ej^-metilésztert 5 ml víz ós 15 ml metanol elegyében 400 mg (10 mmól) nátriumhidroxiddal reagáltatjuk. A reakcióelegyet 15 órán át mágneses keverővel 50 keverjük, majd a metanolt lepároljuk. A vizes maradókot 5 ml vízzel hígítjuk, majd éterrel extraháljuk. A vizes fázist ezután sósavval megsavanyítjuk, és éterrel extraháljuk. Az éteres oldatokat egyesítjük, magnéziumszulfát fölött szárítjuk, és bepárol-55 juk. 255 mg terméket kapunk, amelynek fizikai állandói a következők: tömegspektrum: molekulaion 322,25058 értéknél (C20 H 34 O 3 képlet alapján számított érték: 322,25078); NMR: spektrum: 8 = 5,5 (2H, m, C—13 és C—14 vinil-protonok). 60 A fenti adatok alapján a termék dl-ll,15-didezoxiprosztaglandin-Er A kapott dl-ll,l5-didezoxi-PGEr et ismert módszerekkel (például a dl-15-dezoxi-PGE]^ átalakítására közölt eljárással) könnyen dl-ll-dezoxi-PGE1-65 gyé alakíthatjuk. Ezt a vegyületet ismert módon 8
