167336. lajstromszámú szabadalom • Eljárás 7-amino- vagy 7-acilamino-CEF-3-ÉM-4-karbonsav-származékok és 6-amino- vagy 6-acilamino-penam- 3-karbonsav-származékok előállítására
19 167336 20 17. példa Benzhidräl-7-(2-tienilacetoximetil)-7-amino-cefalosporanät 15,9 mg elpofított 2,4-dinitrofenilhidrazin, 13,5 mg p-toluolszulfonsav és 2 ml abszolút etanol elegyét 30 percen keresztül keverjük. Ezután hozzáadjuk 58 mg benzhidril-7-(2-tienilacetoximetil)-7-(4-nitrobenzilidénamino)-cefalosporanát 1,5 ml etanollal és 0,2 ml metilénkloriddal készített oldatát. Az elegyet 30 percen át keverjük, majd szűrjük és a szűrőlepényt etanollal alaposan kimossuk. A szűrletet csökkentett nyomáson, szobahőmérsékleten vagy az alatti hőmérsékleten bepároljuk és a keletkező szilárd anyagot éterrel többször mossuk. A szilárd anyagot 28 mg dikáliumhidrogénfoszfát, 2 ml víz és 4 ml éter elegyével kirázzuk, a fázisokat elválasztjuk és a vizes fázist éterrel újra extraháljuk. Az egyesített szerves fázisokat vízmentes magnéziumszulfáttal szárítjuk és nagy vákuumban gumiszerű anyaggá bepároljuk. A terméket preparatív vékonyrétegkromatográfiával tisztítjuk 1000// vastag szilikagél lemezen, ultraibolya fénnyel végezve az előhívást és eluensként 30%-os benzolos etilacetátot használva. A kívánt sáv helyzetét rövid- és hosszú hullámhosszúságú ultraibolya fény segítségével határozzuk meg, a kívánt sávot eltávolítjuk és etilacetáttal eluáljuk. A termék infravörös és MMR-spektruma a benzhidril-7-(2-tienilacetoximetil)-7-amino-cefalosporanát szerkezetet bizonyítja, vékonyrétegkromatográfiásan lényegében homogén. 18. példa Benzhidril-7-hidroximetil-7-(2--tienilacetamido)-cefalosporanát A tiszta benzhidril-7-(2-tienilacetoximetil)-7--amino-cefalpsporanát szobahőmérsékleten átrendeződik, (0-+N-acil átrendeződés). Amikor az átrendeződés megfelelő mértékben előre haladt, ezt vékonyrétegkromatográfiásan állapítjuk meg, a benzhidril-7-hidroximetil-7-(2-tienilacetamido)-cefalosporanát terméket preparatív vékonyrétegkromatográfiával különíthetjük el vagy pedig alumíniumoxidon végzett kromatográfiával. Infravörös spektrum (CHC13 párlat): OH, NH (2,85-3,05 /i),0-laktám (5,60 ju), észter (5,73 ju) és amid (5,99/x). MMR-spektrum (CDCl3 -ban, ppm-ben kifejezve, tms-től lefelé mérve): 440, 435, 430, 419, 415, 413 és 409 (15 protonkomplexe, koncentrációtól függő), 312, 209, 293 és 279 (2H), 305 (1H), 249 (B, 2H), 229 (2H), 204 (B, 2H), 120 (3H). A termék benzhidril-7-hidroximetil-7-(2-tienilacetamido)-cefalosporanát. 19. példa Nátrium-7-hidroximetil-7-(2-tienilacetamido)-cefalosporanát 586 mg benzhidril-7-hidroximetil-7-(2-tienilacetamido)-cefalosporanát 5 ml anizollal készített oldatát szobahőmérsékleten 15 ml trifluorecetsawal kezeljük. 10 .perc múlva a reakcióelegyet csökkentett nyomáson gumiszerű anyaggá bepároljuk és a maradékot kloroformban többször feloldjuk és 5 csökkentett nyomáson ugyanannyiszor gumiszerű anyaggá bepároljuk. Ezt követően a maradékot 25 ml kloroformban feloldjuk és 20 percen keresztül erőteljesen keverjük 25 ml vízzel és 0,17 g nátriumhidrogénkarbonáttal, ezután a fázisokat el-10 választjuk és a szerves fázist vízzel újra mossuk. A vizes fázisokat egyesítjük, metilénkloriddal kétszer mossuk és liofilizáljuk. így 501 mg porszerű, habszerű anyagot kapunk. MMR-spektrum (D2 O-ban, ppm-ben kifejezve, 15 tms-től lefelé mérve): 441, 438, 435, 421 és 417 (3H), 296 (1H), 286 és 284, a csúcsokat elnyomja az intenzív víz csúcs 280, 246 (2H), 232, (2H), 227, 209, 200, 162 (2H), 126, (3H)-pH = 7 értékű pufferben a só Xmax:237mju, E%: 196 és 20 Xjnf. :255 mju, E%:138. A termék nátrium-7-hidroximetil-7-(2-tienilacetamido) -cefalosporanát. 20. példa 7-Hidroximetil-7-(2-tienilacetamido)-cefalosporánsav 30 Ná t rium-7-hsdroximetil-7-(2-tienilacetamido)-cefalosporanát 20%-os vizes oldatát jégfürdőben lehűtjük és a számított mennyiségű foszforsav kétszeres mennyiségének 5 térfogatrész vízzel készített 35 jéghideg oldatával kezeljük. A kivált csapadékot 5 rész jéghideg etilacetáttal azonnal extraháljuk. Az extrakció befejezése után (az extrakciót 5 lépésben végezzük) a szerves fázist jégfürdőben levő lombikba adagolt vízmentes magnéziumszulfáthoz 40 adjuk közvetlenül. Az egyesített szerves extraktumot szűrjük és csökkentett nyomáson a hőmérsékletet 25 C° alatt tartva bepároljuk, így gumiszerű anyagot kapunk. Ezt kis mennyiségű etilacetátban azonnal felvesszük és centrifugacsőbe 45 visszük át, ahol nitrogénáramban bepároljuk. Az oldatot beoltjuk, ha a kristályosodás nem kezdődik meg spontán és néhány órán keresztül 0C°-on tartjuk. A terméket oly módon kristályosíthatjuk át, hogy kis mennyiségű metanolban feloldjuk, 50 többszörös mennyiségű etilacetáttal felhígítjuk, nitrogénáramban gumiszerű anyaggá bepároljuk és a maradékot kis mennyiségű etilacetátban felvesszük. Lehűtés és beoltás után csaknem színtelen kristályokat kapunk. A termék ultraibolya spektruma 55 7-es pH értékű pufferben Xmax: 237 m/x,E% :319 és Xinf ,: 257,5 E%: 229. A szilikagél rétegen 5:1:0,6 arányú benzol-metanol-ecetsav rendszerrel készített vékonyrétegkromatogram egy foltot mutat, szennyezés gyakorlatilag nincs, a folt lassabban 60 mozog, mint a cephalothin. A termék nátriumsójának MMR-spektruma D2 O-ban felvéve azonos, mint a hiteles mintáé. A termék 7-hidroximetil-7-(2-tienilacetamido)-ce-65 falosporánsav. 10
