167336. lajstromszámú szabadalom • Eljárás 7-amino- vagy 7-acilamino-CEF-3-ÉM-4-karbonsav-származékok és 6-amino- vagy 6-acilamino-penam- 3-karbonsav-származékok előállítására
7 metilformamidot. A keletkező smaragdzöldszínű oldaton rövid időn keresztül nitrogén-áramot bocsátunk át, majd formaldehidgázáramot, nitrogénben, amelyet úgy állítunk elő, hogy 50 mg paraformaldehidet nitrogénáramban melegítünk, majd a fenti Schiff-bázis oldatába vezetjük. A zöld szín gyorsan eltűnik, narancssárga vagy sárga színű oldat képződik, ezt nagy vákuumban gumiszerű anyaggá bepároljuk, majd kétszer tisztítjuk oly módon, hogy néhány csepp kloroformban feloldjuk és újra gumiszerű anyaggá bepároljuk. A keletkező anyagot preparatív vékonyrétegkromatográfiával tisztítjuk 1000 n vastag szilikagél lemezen (20%-os benzolos etilacetát rendszert alkalmazva) és a kiértékelést ultraibolya fényben végezzük. A sárga színű sávot, amely sötét sávot mutat mind a hosszú, mind a rövid hullámhosszú ultraibolya fényben és amelyet általában egy mély sárga (látható fény) sáv előz meg, eltávolítjuk és etilacetáttal eluáljuk. Az infravörös-spektrum (kloroformban) a hidroxilcsoport (2,8—3,1 ju)* fMaktám-csoport (5,65 p) és az észtercsoport (5,72 M) jelenlétét mutatja, az MMR-spektrum a benzilidén csoportot és a C5 -protonokat mutatja ki erős szingulettként 532 és 338ppm-en tms-től lefelé mérve CDCl3 -ban. Kitermelés: körülbelül 40% benzil-6-(4-rütrobenzilidénamino)-64üdroximetil-penicillanát. 2,4 g benzil-6-(p-nitrobenzilidénamino)-penicillanátból 10 ml abszolút etanolban 1 ml metilénkloriddal készített nyers benzil-6-(4-nitrobenzilidénamino)-6-hidroximetil-pemcillanátot beadagolunk 1,08 g finoman elporított 2,4-dinitrofenilhidrazin és 1,04 g p-toluolszulfonsavmonohidrát elegyébe, amelyet 10 ml abszolút etanolban 30 percen keresztül kevertünk, majd a keverést további 30 percen át folytatjuk és félidőben beadagolunk újra 10 ml abszolút etanolt. A narancsszínű szuszpenziót szűrjük és a szűrőlepényt ismételten mossuk abszolút etanol kis részleteivel, majd az egyesített szűrleteket csökkentett nyomáson szobahőmérsékleten vagy azalatti hőmérsékleten bepároljuk. A keletkező szilárd anyagot néhány csepp metilénkloridot tartalmazó éterrel szuszpendáljuk, majd a folyadékot dekantáljuk, szárítjuk, 2,4 g sót kapunk, amely alkalmas a további feldolgozásra. Etanolból és éterből végzett átkristályosítás után a benzil-6--hidroximetil-6-amino-peniciÜanát-tozilátsó olvadáspontja 168-169 C°. Elemzési eredmények C23 H2 9N 2 0 7 S2-re számítva: Számított: C =54,31%, H =5,55%, N =5,51%, S =12,61%, Talált: C = 54,01%, H = 5,59%, N =5,42%, S =12,54%. IR-spektrum (Nujol): NH, OH (2,85, 2,99, 3,7-4,3), 0-laktám (5,63 jtt), észter (5,77 /u). MMR-spektrum (DMSO-d6 ): 454, 446, 431, 422 (4H) 445 (5H) 330 (1H), 314 (2H), 274 (1H), 233 (2H), 138 (3H), 97 (3H) és 83 (3H) cps tms-től lefelé mérve. 2 ml víz, 3,5 ml éter és 0,5 ml etilacetát elegyét hozzáadjuk 100 mg benzil-6-hidroximetil-6-amino-penicillanát-hidrotozilát és 70 mg dikáliumhidro-8 génfoszfát elegyéhez. Az elegyet néhány percen keresztül erőteljesen rázzuk, majd a fázisokat elválasztjuk és a szerves fázist eltávolítjuk. A vizes fázist 5 ml éterrel újra extraháljuk, a szerves S fázisokat egyesítjük és vízmentes magnéziumszulfát felett szárítjuk. Ezután az elegyet leszűrjük, a szűrletet nagy vákuumban szobahőmérsékleten vagy az alatti hőmérsékleten gumiszerű anyaggá bepároljuk és azt oly módon tisztítjuk, hogy ismételten 10 feloldjuk kismennyiségű kloroformban, majd nagy vákuumban szobahőmérsékleten vagy az alatti hőmérsékleten bepároljuk. A kapott gumiszerű anyag benzil-6-hidroximetil-6-amino-penicillanát. IR-spektrum: NH-OH (2,8-3,4ju), 0-laktám és 15 észter (5,6-5,8 /i). MMR-spektrum (CDC13 ): 446 (5H), 325 (1H), 313 (2H), 268 (1H), 235 (2H), 145 (széles, 2H), 97 (3H) és 86 (3H). Vékonyrétegkromatografiásan vizsgálva 250jit-on 20 szilikagél lemezen lényegében egy foltot mutat 50%os, benzolos etilacetáttal kifejlesztve. 2. példa 25 Senzil-6-hidroximetil-6-fenoxiacetamido-penicillanát 1,2 g tozilát-sóból előállított benzil-6-hidroxi-metil-6-amino-penicillanátot 5 ml metilénkloridban 30 0C°-ra hűtünk, és erőteljesen keverjük 820 mg dikáliumhidrogénfoszfát 15 ml vízzel készített oldatával, miközben 1 perc alatt cseppenként hozzáadjuk 440 mg fenoxiacetilklorid 10 ml száraz metilénkloriddal készített oldatát. Az elegyet 15 percen 35 keresztül erőteljesen keverjük, majd a fázisokat elválasztjuk, a vizes fázist metilénkloriddal újra extraháljuk, az egyesített szerves fázisokat magnéziumszulfáttal szárítjuk, és az oldószert csökkentett nyomáson eltávolítjuk. így 1,16 g nyers ter-40 méket kapunk, amelyet tisztítás céljából 35 g szilikagélen kromatografálunk. Az 1-12. frakciót 20 ml kloroformmal, a 13-14. frakciót 30 ml 1%-os kloroformos etilacetáttal és a 15—21. frakciót 50 ml 2,5%-os etilacetáttal eluáljuk. Vékony-45 rétegkromatográfiával értékeljük ki a frakciókat, így az 5-17. frakciót egyesítve 676 mg tiszta benzil-6-hidroximetil-6-fenoxiacetamido-penicillanátot kapunk. IR-spektrum (CHC13 ): NH-OH (2,8-3,1//), 50 0-laktám (5,62 ju), észter (5,73 ju) és amid (5,96 ju). MMR-spektrum (CDC13 ): 452-408 (komplex UH, fő csúcsok 442 és 421), 338 (1H), 312 (2H), 272 (2H), 268 (1H), 253 (2H), 86 (3H) és 82 (3H) cps tms-től lefelő mérve. A tömegspektrum 55 szintén a kívánt szerkezetet bizonyította m/e 470-en. 3. példa 60 Nátrium-6-hidroximetil-7-fenoxiacetamidopenicillanát B e nzil-6-hidroximetil-6-fenoxiacetamido-penicilla-65 nátot vizes metanolban egyenlő súlyú 10%-os, 4
