167276. lajstromszámú szabadalom • Eljárás A-27106 jelű metabolit előállítására
167276 15 16 7 nappal a fertőzés után lemérjük az állatokat, leöljük és megvizsgáljuk őket, fertőzöttek-e vagy sem, látható-e bennük elváltozás. A coccidiosis mértékét önkényesen jelöljük 1—4-ig. A kóros elváltozás mértékét az egyes csoportokba tartozó állatokra vonatkoztatva adjuk meg. A „0" jel azt jelenti, hogy coccidiosis nem áll fenn. Az „1" jel jelentése: a megfigyelhető legkisebb coccidiosisos elváltozás. A ,,2" azt jelenti, hogy közepes mértékű kórkép, kevés vagy nem látható hemorrágia és nincs szöveti elváltozás. A „3" jel jelentése: hemorrágia, a vakbél duzzanata és kiterjedt szöveti elváltozás. A „4" jel azt jelenti, hogy hemorrágia áll fenn, alvadt vérből és roncsolt epitheliás sejtekből álló vakbél. A „4" vagy ennél kisebb számmal jelölt állatok további fertőzés hiányában általában gyógyulnak. A fenti kísérlet eredményeit a II. táblázatban adjuk meg. II. táblázat A 27106 Átlagos a táplá- súlynöve- Elváltozás mér-Csoport Fer- lékban kedés teke tőzve (mg/kg) (g/csibe) 0 12 3 4 1 nem 0 162 15 0 0 0 0 2 igen 0 67 0 0 0 0 015 3 igen 100 157 4 1 0 3 7 4 igen 150 150 3 3 1 1 7 5 igen 200 166 5 0 0 0 10 A nagy elváltozásokat mutató kezelt állatok ürüléke ritkán, vagy egyáltalán nem véres, és az állatok jó kondícióban vannak. Ezek megfelelő súlynövekedése jelentősebbnek tekinthető, mint az elváltozások megjelenése. A vizsgálatokból kiderül, hogy az A 27106 metabolit az Eimeria tenella sejteket a gazdasejtbe kerülés első fázisában általában elpusztítja, így előnyösen megelőzően (profilaktikusan) használjuk. Más vizsgálatok szerint az A 27106 metabolit a csirkék számára ízletesebb és kevésbé toxikus hatású, mint a monensin. Több más vizsgálatot is végeztünk egyrészt az A 27106 metabolittal, másrészt ezzel és a monensin keverékével. Ezek szerint a vizsgálatok szerint az A 27106 0,04%-os mennyiségben adagolva ugyan nem biztosít nagyobb súlynövekedést, mint 0,01%os mennyiségben, de magasabb koncentrációban csökken a caecalis elváltozások mértéke. A magasabb koncentrációk mellett toxikus tünetek nem figyelhetők meg. A hatásos mennyiségeken belül a takarmányba kevert monensin és A 27106 metabolit hatása legalábbis additive érvényesül, a toxicitás szempontjából viszont nincs összegeződés. A keverék toxicitása kisebb mint a keverékben levő monensin saját toxicitása. 6. példa Coccidiosis-ellenes hatású, A 27106-ot tartalmazó csirketáp előállítása 5 Kiegyenlített, sok energiadús összetevőt tartalmazó, a csirkék gyors súlynövekedését kiváltó csirke tápot készítünk a következő anyagokból: 10 Őrölt sárga kukorica 50% 454 kg Szójaliszt, oldószerrel extrahált, hámozott, finomra őrölt szójából __ 50% fehérjetartalmú 31,08% 282 kg 15 Állati zsír (marhafaggyú) 6,5% 59 kg Szárított halliszt, oldható elemekkel (60% fehérje) 5,0% 45 kg A kukorica oldható alkatrészeinek desztillátuma 4,0% 36 kg 20 Dikalciumfoszfát, takarmányhoz használatos minőségben 1,8% 16,kg CaC03 0,8% 7,25 kg Vitamin-premix 0,5% 4,5 kg 25 (tartalmaz A-, D-, E-, Kr, B12 -vitamint, kolint, niacint, pantoténsavat, riboflavint és biotint, glükóz hordozóval együtt) 30 Nyomelem ásványi-premix 0,2% 1,8 kg (MnS04 , ZnO, KJ, FeS0 4 , CaC03 ) 2-amino-4-hidroxivajsav 0,1% 0,9 kg A 27106 metabolit 0,02% 0,18 kg 35 A fenti anyagokat a takarmánykészítés ismert módszereit alkalmazva keverjük. Ezzel a táppal etetett, vízzel szükség szerint ellátott csirkék vé-40 dettek a coccidiosis-os fertőzés ellen, súlynövekedésük hasonló, mint a coccidiosis-os fertőzéstől mentes és a fentiekhez hasonló, de hatóanyagot nem tartalmazó táppal etetett csirkék súlynövekedése. 45 7. példa Az A 27106 metabolit savas alakjának előállítása 100 mg, az 1. és 2. példában megadott eljárással előállított A 27106 metabolitot (nátriumsó alakban) 50 metanol és víz 1:1 arányú elegyének 100 ml-ében oldunk. Az oldathoz cseppenként addig adunk 1 n hidrogénklorid oldatot, míg pH-ja 3 lesz. Csökkentett nyomáson, desztillációval eltávolítjuk a metanolt. 55 A desztillációs maradékként kapott oldatot 2X 100 ml kloroformmal extraháljuk. Magnéziumszulfáttal vízmentesítjük a kloroformos extraktumot és csökkentett nyomáson desztilláljuk, amikor 60 desztillációs maradékként 85 mg savas A 27106 metabolitot kapunk. A sav alakú A 27106 fehér színű amorf anyag, molekulasúlya 832. A sav biológiai aktivitása közel 65 azonos a nátriumsó biológiai aktivitásával. 8
