167276. lajstromszámú szabadalom • Eljárás A-27106 jelű metabolit előállítására
167276 17 18 8. példa Az A 28106 metabolit céziumsójának előállítása. A 9. példában ismertetett eljárással előállítottsavalakú A 27106 metabolit 97,3 mg-ját 50 ml metanol és 50 ml víz elegyében oldjuk. Az oldathoz cseppenként addig adunk céziumhidroxidot, míg pH-ja 7,1 lesz. Csökkentett nyomáson kivitelezett desztillációval eltávolítjuk a metanolt. A desztillációs maradékként kapott oldatot kétszer azonos térfogatú kloroformmal extraháljuk. Magnéziumszulfáttal vízmentesítjük a kloroformos extraktumot és csökkentett nyomáson desztilláljuk, amikor desztillációs maradékként fehér színű amorf terméket kapunk. A termék elemanalízise szerint, 13% fémet tartalmaz. 9. példa Az A 27106 metabolit lítiumsójának előállítása A 10. példában megadott eljárást ismételjük meg, azzal a különbséggel, hogy a cézium hidroxid helyett lítiumhidroxidot használunk. Az A 27106 lítiumsója fehér színű, szilárd halmazállapotú anyag, amely kristályosítható, azonban röntgendiffrakciós képe nem áttekinthető. 10. példa Az A 27106 metabolit ammóniumsójának előállítása A 10. példában megadott eljárást ismételjük meg, azzal a különbséggel, hogy a cóziumklorid helyett ammónium-hidroxidot használunk, amikor megkapjuk az A 27106 metabolit ammóniumsóját. Ennek a terméknek a többihez hasonló általános tulajdonságai vannak és hasonlóképpen használható. Szabadalmi igénypontok 1. Eljárás a II képletű A 27106 metabolit, valamint a nátrium helyén hidrogén, ammónium-, lítium-, kálium-, rubidium- vagy cézium csoportot tartalmazó analógjának előállítására, amely vegyület fehér színű, kristályos anyag, rövidszénláncú alkanolokban viszonylag jól, azonban rövidszénláncú alkánokban gyakorlatilag nem oldódik, és amelynek a) tömegspektrometrisan meghatározott molekulasúlya: 854; b) elemösszetétele: C: 58,78, H: 8,51, 0:7,85 és Na: 3,63%; c) tapasztalati képlete: C42 H 71 0 16 Na; d) kloroformban meghatározott infravörös abszorpciós spektruma 1. ábrán megadott; e) tömegspektrumában m/e 854,44680-nál molekulaionmaximum és m/e 836,44129-, 779,44690- és 761,44740-nél jellemző maximum látszik és 5 f) szilikagél-vékonyrétegkromatográfiás R-értéke benzol és metanol 7:3 arányú elegyóvel vizsgálva: 0,49 és 10 amely vegyület savas alakjának színe fehér, halmazállapota szilárd, molekulasúlya 832, és amely egy, pKa :7,2-vel jellemezhető titrálható csoportot tartalmaz, azzal jellemezve, hogy 15 a) Streptomyces candidus NRRL 5449 mikroorganizmust felhasználható szén- és nitrogénforrást, továbbá szervetlen sókat tartalmazó fermentációs táptalajon, süllyesztett, levegőztetett körülmények 20 között, glükóz és 2:{5-[5-(3,5-dimetil-6-hidroxi-6--hidroximetil-2-tetrahidropiranil)-3-metil-2-tetrahidrofuril]-5-etil-2-tetrahidrofuril}-9-hidroxi-/?-metoxi-a, y,2,8-tetrametil-l,6-dioxaspiro [4,5]dekán-7-vajsav jelenlétében tenyésztünk, vagy 25 b) Streptomyces candidus NRRL 5449 törzset felhasználható szén és nitrogénforrást, továbbá szervetlen sókat tartalmazó fermentációs táptalajon süllyesztett, levegőztetett körülmények között te-30 nyésztünk, a tenyészlé folyékony részét elkülönítjük, fagyasztva szárítjuk, a maradékot vizes pufferben oldjuk, ós az oldathoz glükózt és 2-{5-[3,5-dimetil-6-hidroxi-6-hidroximetil-2-tetrahidropiranil)-3-metil-2-tetrahidrofuril]-5-etil-2-tetrahidrofuril}-35 -9-hidroxi-/3-metixo-a,y2,8-tetrametil-l,6-dioxaspiro[4,5]dekán-7-vajsavat adunk, és az elegyet inkubáljuk, vagy c) Streptomyces candidus NRRL 5449 törzset 40 felhasználható szén és nitrogénforrást, továbbá szervetlen sókat tartalmazó termentációs táptalajon süllyesztett, levegőztetett körülmények között tenyésztünk, a tenyószléből elkülönítjük a sejteket, ezeket ultrahangos kezeléssel, centrifugálással és 45 dialízissel tisztítjuk, és a dializátumot vizes pufferben glükózzal és 2-{5-[5-(3,5-dimetíl-6-hidroxi-6--hidroximetil-2-tetrahidropiranil)-3-metil-2-tetramdrofuril]-5-etil-2-tetrahidrofuril}-9-hidroxi-/?-metoxi-a,y,2,8-tetrametil-l,6-dioxaspiro [4,5]dekán-7-50 -7-vajsavval inkubáljuk, és a keletkezett II képletű A 27106 metabolitot elválasztjuk, és kívánt esetben a nátrium helyén hidrogén-, ammónium-, lítium-, kálium-, rubidium-55 vagy céziumcsoportot tartalmazó analógjává alakítjuk át. 2. Az 1. igénypont a) eljárásváltozata szerinti eljárás foganatosítási módja azzal jellemezve, hogy 60 fermentációs táptalajként azt a tenyészlevet használjuk, amelyben a 2-{5-[3,5-dimetil-6-hidroxi-6--6-hidroximetil-2-tetrahidropiraml)-3-metil-2-tetrahidrofuril]-5-etil-2-tetrahidrofuril}-9-hidroxi-/?-metoxi-oc,y,2,8-tetrametil-l,z-dioxaspiro [4,5]dekán-7-65 -vajsav előállítására süllyesztett, levegőztetett fer-9
