167271. lajstromszámú szabadalom • Eljárás az aminocsoporton alkiniloxi-karbonil-csoporttal védett aminosavak és peptidek előállítására
167271 19 20 bonil)-L-fenilalanin-N-hidroxi-szukcinimidésztert dimetilformamidban L-valil-L-glutaminil-L-triptofil-L-leuCinnal reagáltatunk körülbelül —5 °C és 10 °C hőmérsékleten. A reakcióelegyet lassan szobahőmérsékletre hagyjuk emelkedni, majd körülbelül 80—90 órán át keverjük, így N-(3-metil-l-butin-3-oxikarbonil)-L-fenilalanil-L-valil-L-glutamiminil-L-triptofil-L-leucint kapunk. Ezután az így kapott N-védett pentapeptidet oldószerben, így dimetilformamidban reagáltatjuk az L-metionil-L-L-aszparaginil-L-treonin-di-O-terc-butilészter tripeptid fragmenssel a leucin karboxilcsoportja N-hidroxiszukcinimidészterének pentapeptiddé történő in situ előállítása és reakciója útján, így a glükagon N-védett 22—29. fragmensét kapjuk, az N-(3-metil-l-butin-3-oxikarbonil)-L-fenilalanil-L-L-valil-L-glutaminil-L-triptofil-L-leucil-L-metionil-L-aszparaginil-L-treonin-di-O-terc-butilésztert. 5. példa A glükagon 27—29. fregmensét oly módon állítjuk elő, hogy N-(3-metil-l-butin-3-oxikarbonil)-L-metionintL-aszparaginil-L-treonin-di-O-terc-butilészterrel hozunk reakcióba az N-etoxikarbonil-2--etoxi-l,2-dihidrokinolin (EEDQ) kondenzáló-szer jelenlétében tetrahidrofuránban, így N-(3-metil-l-butin-3-oxikarbonil)-L-metionin-L-aszparaginil-L-treonin-di-O-terc-butilésztert kapunk. Az N-védett tripeptid katalitikus hidrogenolízisével a tripeptidet kapjuk, amelyet a fenti módon kapcsolhattunk az N-védett pentapeptid fregmenssel. Az acetilén-kötést tartalmazó halogénformiátok és fenil-szénsavészterek előállítását az alábbi 6—10. példákkal szemléltetjük. 6. példa l-fenil-3-metil-l-butin-3-il-fenil-karbonátot a következőképp állíthatjuk elő: 16 g (0,1 mól) 1-fenil-3-metil-l-butin-3-ol és 12 ml piridin 100 ml metillénkloriddal készített oldatát —10 °C-ra hűtjük és cseppenként hozzáadjuk 15,2 ml fenil-klórformiát 50 ml metilénkloriddal készített oldatát. Az adagolás befej ezése után az elegyet 7 órán keresztül 0 °C-on keverjük és éjszakán át 4 °C-on tároljuk. Ezután az elegyet 150 ml jeges vízbe öntjük és a metilénkloridos fázist elválasztjuk. A vizes fázist 75 ml metilénkloriddal extraháljuk, a szerves fázisokat egyesítjük, kétszer 100 ml vízzel mossuk, vízmentes nátriumszulfát felett szárítjuk és vákuumban olajszerű anyaggá bepároljuk. 100 ml petroléterből kristályosítva 12,5 g (44,6%) l-fenil-3-metil-l-butin-3-il-fenil-karbonátot kapunk 61,5—63 °C olvadásponttal. 7. és 8. példa A 6. példa szerinti módon eljárva egyéb fenil-szénszénsavésztereket állítottunk elő az alábbi módon: 2,4,5-triklórfenil-klórformiát és 3-metil-l-butin-3-ol, valamint piridin metilénkloridban megvalósított reakciójával 3-metil-l-butin-3-il-2,4,5-triklórfenilkarbonátot kapunk, olvadáspontja: 82— 82,5 °C. Elemzési eredmények C12 H 9 0 3 C1 3 képlet alapján: számított: C% 46,85, H% 2,94, 0% 15,62, Cl% 34,59; talált: C% 46,65, H% 3,02, 0% 15,82, 5 Cl% 34,51. 2,4,5-triklórfenil-klórformiát és 3-metil-l-pentil-3-ol és piridin metilénkloridban megvalósított reakciójával 3-metil-l-pentin-3-il-2,4,5-triklórfe-10 nil-karbonátot kapunk, olvadáspontja: 55—57 °C. Elemzési eredmények a C^íIjjOgClg képlet alapján: számított: C%48,55, H% 3,45, Cl% 33,08; talált: C% 48,38, H% 3,69, Cl% 33,42. 15 9. példa A 3-metil-l-butin-3-oxikarbonil-kloridot a következőképpen állíthatjuk elő: 40 g (2,45 mól) foszgén 20 400 ml benzollal készített oldatához hozzáadjuk 8,9 g (0,106 mól) 3-metil-l-butin-3-ol és 12 g (0,152 mól) piridin 200 ml benzollal és 400 ml éterrel készített oldatát. Az adagolást cseppenként végezzük két óra alatt keverés közben és eközben a hő-25 mérsékletet hűtéssel 20 °C alatt tartjuk. Az elegyet további 2 órán keresztül szobahőmérsékleten keverjük, a piridin-hidrokloridot szűrjük és a szűrletet 500 ml jeges vízbe öntjük. A szerves fázist elválasztjuk, 500 ml vízzel mossuk, magnéziumszul-30 fát felett szárítjuk és vákuumben olajszerű anyaggá bepároljuk. Az olajszerű anyagot további tisztítás nélkül felhasználjuk. 10. példa 35 A 9. példa szerinti módon állítjuk elő az alábbi vegyületet. 1-Etinil-ciklohexanolt és piridint benzol és éter elegyében foszgén benzolos oldatával hozzuk reak-40 cóba, így 1-etinil-ciklohexil-oxikarbonil-kloridot kapunk. 11. példa 45 ]SÍ-(l-Etinil-ciklohexil-oxikarbonil)-L-metionin-diciklohexilaminsót a következőképpen állíthatunk elő: 11,6 g (77,8 mmól) L-metionin és 11,0 g (104 mól) 50 nátriumkarbonát 165 ml vízzel készített oldatához 0—5 °C hőmérsékleten 90 mmól 1-etinil-ciklohexil-oxikarbonil-kloridot adunk és az elegyet 20 órán keresztül 0—5 °C hőmérsékleten keverjük. Ezután az elegyet éterrel háromszor extraháljuk és 55 a vizes oldatot tömény sósavval pH = 1 értékre savanyítjuk. Az olajszerű anyagot háromszor 100 ml etilacetáttal extraháljuk, az extraktumokat háromszor 100 ml vízzel, 10%-os sóoldattal mossuk és vízmentes nátriumszulfát felett szárítjuk. Az etil-60 acetátot vákuumban lepároljuk, a visszamaradó olajszerű anyagot 100 ml éterben feloldjuk és hozzáadunk 14 g (77,3 mmól) N,N-diciklohexilamint. Az étert vákuumban lepároljuk, a kapott olajszerű anyagot petroléterrel háromszor eldörzsöl-65 jük és éter-pentán elegyből kristályosítjuk. így 10
