167271. lajstromszámú szabadalom • Eljárás az aminocsoporton alkiniloxi-karbonil-csoporttal védett aminosavak és peptidek előállítására
167271 27 28 3,41 (S, =C—H), kvantitatívaminosavelemzés, savhidrolízis, Asp (0,96), Ser (0,76), Glu (0,95), Ala (1,00), Arg (1,97). Elemzési eredmények a C41 H 73 N 13 0 13 C1 2 képlet alapján: számított: C% 47,95, H%7,16, N% 17,73, 0% 20,25, Cl% 6,90; talált: C% 47,69, H% 7,36, N% 17,81, 0% 20,50, Cl% 6,66. 30. példa N-(3-Metil-l-butin-3-oxikárbonil)-S-benzhidril-L-ciszteinil-glicin-etilésztert a következőképpen állítunk elő: 2,88 g (5 mmól) N-(3-metil-l-butin-3-oxikarbonil)-S-benzihidril-L-cisztein-2,4,5-triklórfenilészter és 0,7 g (5 mmól) glicin-etilészter 80 ml metilénkloriddal készített és kevert elegy éhez egy óra alatt hozzáadjuk 0,7 ml (5 mmól) trietilamin 20 ml metilénkloriddal készített oldatát. Az elegyet éjszakán át szobahőmérsékleten keverjük, majd az oldószert vákuumban lepároljuk, így olajszerű maradékot kapunk. Ezt etilacetátban feloldjuk és a trietilamin-hidroklorid eltávolítása céljából szűrjük. Az etilacetátos szűrletet vákuumban bepároljuk és a keletkező olajszerű anyagot etilacetát-petrolóter elegyébol kristályosítjuk, majd vákuumban szárítjuk, így 1,41 g (58,3%) terméket kapunk, amelynek olvadáspontja 98—100 °C. Vékonyrétegkromatogram: 1 folt (klórtoluidin), Rf 0,82 [kloroform-metanol-ecetsav (75:24:1)]. Elemzési eredmények a C26 H 30 N 2 O 5 S képlet alapján: számított: C% 64,61, H% 6,27, N% 5,80, S% 6,64; talált: C% 64,75, H% 6,43, N% 5,75, S% 6,78. 31. példa N-(3-metil-l-butin-3-oxikarbonil)-S-tritil-L-ciszteinil-glicin-etilésztert a következőképpen állíthatunk elő: 4,99 g (1,63 mmól) N-(3-metil-l-butin-3-oxikarbonil)-S-tritil-L-cisztein-diciklohexilaminsóhoz és 1,07 g (7,63 mmól) glicin-etilészter-hidrokloridhoz 15 ml metilénkloridban 0 °C-on keverés közben hozzáadunk 1,57 g (7,63 mmól) N,N-diciklohexil-karbodiimidet. A keverést 0 °C-on folytatjuk, majd a reakcióelegyet éjszakán át állni hagyjuk. A diciklohexil-karbamidot kiszűrjük és a szűrletet vákuumban habszerű anyaggá bepároljuk . A habszerű anyagot 30 ml etilacetátban feloldjuk és az oldatot 10-10 ml 1 n nátriumhidrogén karbonát oldattal, nátriumklorid oldattal, 10%-os citromsav oldattal és 10%-os nátriumklorid-oldattal mossuk. A mosott oldatot nátriumszulfát felett szárítjuk, szűrjük és vákuumban bepároljuk. így 3,52 g (82,6%) fehér habszerű anyagot kapunk, amely nem kristályosítható. NMR-spektrum (CDC13 ) 1,25 (t, 3, J=7H2 , —OCH 2 CH 3 ),l,66 (S, 6, — C=C—C I I (CH3) 2 0), 2,49 (%, 1, H—C=C—), 2,67 (dublett vagy dublettek, 2, J = 6 és 7, H2 , — CH2 S—), 3,95 (d,2,J=7H2 ,— OCONH—), 6,49(m,l — CONH—), 7,35 (M,15%). Elemzési eredmények a C32 H 34 N 2 0 5 S képlet 5 alapján: számított: C% 68,80, H% 6,14, N% 5,02, 0% 14,31, S% 5,73; talált: 10 C% 68,56, H% 6,42, N% 5,00, 0% 14,28, S% 5,83. 32. példa 15 N-(3-metil-l-butin-3-oxikarbonil)-L-fenilalanil-S-tritil-L-ciszteinil-glicin-etilésztert a következőképpen állítunk elő: 1,24 g (2 mmól) S-tritil-L-ciszteinil-glicin-etilészter-tozilátsó és 0,912 g (2 mmól) N-(3-metil-l-20 -butin-3-oxikarbonil)-L-fenilalanin-diciklohexilaminsó 10 ml metilénkloriddal készített elegyéhez keverés közben 0 °C-on hozzáadunk 0,412 g (2 mmól) N,N-diciklohexil-karbodiimidet. A keverést 0 °C-on néhány órán át folytatjuk, majd a re-25 akcióelegyet éjszakán át szobahőmérsékletre hagyjuk melegedni. Ezután az elegyet leszűrjük és a szűrletet vákuumban szárazra pároljuk. A maradékot feloldjuk 40 ml etilacetátban, az oldatot szűrjük, 1 n nátriumhidrogénkarbonát-oldattal, 10%-os 30 nátriumklorid-oldattal, 10%-os citromsay-oldattal és újra 10%-os nátriumklorid-oldattal mossuk. A megmosott oldatot nátriumszulfát felett szárítjuk, leszűrjük és vákuumban szárazra pároljuk. A maradékot etilacetát és petroléter elegyébol át-35 kristályosítva 0,74 g (52,4%) terméket kapunk, amelynek olvadáspontja 181—181,5 °C (bomlás). Elemzési eredmények a C41 H 43 N 3 0 6 S képlet alapján: számított: 40 c% 69,77, H% 6,14, N% 5,95, 0% 13,60, S% 4,54; talált: C% 69,51, H% 6,27, N% 6,04, 0% 13,71, S% 4,67. 45 33. példa N-(3-metil-l-butin-3-oxikarbonil-L-triptofil-L-metionil-L-aszparagil-L-fenilalanin-amidot a kö-50 vetkezőképpen állítunk elő: 1,165 g (2,56 mmól) N-(3-metil-l-butin-3-oxikarbonil)-L-triptofán-2,4,5-triklórfenilószter, 1,0 g (2,33 mmól) L-metionil-L-aszpartagil-L-fenilalanin-amid-monohidrát és 0,26 ml (2,33 mmól) trietil-55 amin 15 ml dimetilformamiddal készített elegyét 8 órán át —15 °C-on és 60 órán át szobahőmérsékleten keverjük. Ezalatt az idő alatt oldat képződik. A reakcióelegyet 50 ml jeges vízbe öntjük és a hideg vizes oldatot telített yizes citromsav-oldattal 60 pH = 3 értékre savanyítjuk. A csapadékként képződő reakcióterméket szűrjük és vízzel mossuk. Ezután a terméket 50 ml abszolút etanollal forraljuk, hogy eltávolítsuk a yizet és a 2,4,5-triklórfenolt. A reakcióterméket a lehűtött etanolról leszűr-65 jük és vákuumban káliumhidroxid fölött szárítjuk. 14
