167271. lajstromszámú szabadalom • Eljárás az aminocsoporton alkiniloxi-karbonil-csoporttal védett aminosavak és peptidek előállítására
167271 29 30 így 1,09 g (66%) terméket kapunk, amely körülbelül 209—210 °C-on olvad bomlás közben. A termék vékonyrétegkromatogramja 1 foltot mutat (ninhidrin és klórtoluidin); Rf érték: 0,79 (tetrahidrofurán:ciklohexán:víz 94:7:5). Elemzési eredmények a C35 H 42 N 6 0 8 S képlet alapján: számított: C% 59,47, H% 5,98, N% 11,98, O%18,10, S%4,53; talált: C% 59,15, H% 6,21, N% 11,87, 0% 18,42, S% 5,00. 1,01 g (1,42 mmól) reakcióterniéket feloldunk 20 ml dimetilformamidban és 4 órán keresztül hidrogénezzük 0,142 g 5%-os, szénre felvitt palládium felett. Ezután a katalizátort kiszűrjük és dimetilformamiddal mossuk. A szűrletet szénnel derítjük és vákuumban szárazra pároljuk. A hidrogenolízis termékét, az L-triptofil-L-metioml-L-aszparagil-L-fenilalanin-amidot 20 ml forró dimetilformamidból és 15 ml etilacetátból kristályosítjuk, így 0,25 g (17,7%) terméket kapunk körülbelül 224—226 °C olvadásponttal. Vékonyrétegkromatogram: 1 folt (ninhidrin és klórtoluidin), Rf-érték: 0,30 (tetrahidrofurán:ciklöhexán:víz 94:7:5). Kvantitatív aminosav analízis, majd savas hidrolízis tioglikolsav jelenlétében: Trp (0,99). Asp (1,00), Met (0,93), Phe (0,90). Elemzési eredmények a C25 H 36 N 6 0 6 képlet alapján: számított: C% 58,37, H% 6,08, N%14,08; talált: C% 58,10, H% 6,38, N% 13,80. 34. példa N-(N-Metil-l-butin-3-oxikarbonil)-L-metionin-L-aszparagil-L-fenilalanin-amidot a következőképpen állítunk elő: 3,4 g (7,75 mmól) N-(3-metil-l-butin-3-oxikarbonil)-L-metionin-2,4,5-triklórfenilészter és 2,16 g (7,75 mmól) L-aszparagil-L-fenilalanin-amid 30 ml dimetilformamiddal készített elegyét 0 °C-ra hűtjük és keverés közben hozzáadunk 1,09 ml trietilamint, ezután a reakcióelegyet 9 órán keresztül 0 °C-on, majd 10 órán keresztül szobahőmérsékleten keverjük. Ezt követően a reakcióelegyet 115 ml jeges víz, 0,45 ml ecetsav és 39 ml ciklohexán elegyébe öntjük. A gumiszerű szilárd anyagot szűrjük, yízz el mossuk, majd 39 ml etanolban 50 °C és 60 °C közötti hőmérsékleten melegítjük. A reakcióterméket szűrjük, vízzel mossuk és vákuumban káliumhidroxid granulátum felett szárítjuk, így 2,47 g (61,2%) terméket kapunk, amelynek olvadáspontja körülbelül 203—204 °C (bomlás). Vékonyrétegkromatogram: 1 folt (klórtoluidin), Rf-érték: 0,56 (kloroform:metanol-ecetsav 75:24: :1). Elemzési eredmények a C24 H 32 N 4 0 7 S képlet alapján: számított: C% 55,37, H% 6.20, N% 10,76, S% 6,16; talált: C% 55,61, H% 6,39, N% 10,71, S% 6,37. 35. példa L-Metionil-L-aszparagil-L-fenilalanin-amid-monohidrát 5 N-(3-Metil-l-butin-3-oxikarbonil)-L-metionil-L-aszparagil-L-fenilalanin-amidot (2,36 g, 4,53 mmól) 200 ml 80%-os ecetsavban hidrogénezünk 2,5 órán keresztül 0,454 g, aktív szénre felvitt 5%-os palládium felett. A katalizátort kiszűrjük, a szűrle-10 tet vákuumban olajszerű anyaggá bepároljuk. A visszamaradó olajszerű anyagot vákuumban azeotrop desztillációnak vetjük alá háromszor 50 ml benzollal és a keletkező szilárd anyagot 50 ml metanolban forraljuk, szűrjük és káliumhidroxid fe-15 lett vákuumban szárítjuk. így 1,16 g (62,4%) terméket kapunk, amelynek olvadáspontja 211— 214 °C. Elemzési eredmények a C18 H 2& N 4 0 5 SH 2 0 képlet 20 alapján: számított: C% 50,45, H% 6,59, N% 13,08, S% 7,48; talált: C% 50,63, H% 6,86, N% 12,92, S% 7,39. 26 36. példa N-(3-Metil-l-pentin-3-oxikarbonil)-L-metionil-L-aszparaginil-L-treonin-di-O-terc-butilésztert a 30 következőképpen állítunk elő: 2,27 g (5 mmól) N-(3-metil-l-pentin-3-oxikarbonil)-L-metionin-diciklohexilaminsó 30 ml dimetilformamiddal készített oldatát —15 °C-ra hűtjük és 35 0,625 ml pivaloilkloriddal kezeljük. Az elegyet 15 percen keresztül —15 °C-on keverjük és 1,55 g (4,5 mmól) L-aszparaginil-L-treonin-di-O-terc-butil-észter 15 ml dimetilformamiddal készített és —15 °C-ra hűtött oldatával kezeljük. Az elegyet 40 2,5 órán keresztül 0 °C-on keverjük és 15 ml 1 n nátriumhidrogénkarbonát-oldattal kezeljük. 5 percen át keverjük, a hideg oldatot 145 ml 90%-os nátriumklorid-oldatba öntjük és 15 percen keresztül keverjük. A keletkező csapadékot szűrjük és vízzel, 45 majd telített nátriumhidrogénkarbonát-oldattal mossuk. A terméket feloldjuk 100 ml etilacetátban és a diciklohexilamin-hidroklorid eltávolítása céljából szűrjük. A szűrletet kétszer 30 ml 10%-os citromsav-oldattal, majd háromszor 50 ml vízzel 50 mossuk, majd nátriumszulfát felett szárítjuk-A megszárított szűrletet vákuumban bepároljuk, így 1,65 g terméket kapunk szilárd habszerű anyag alakjában. Vékonyrétegkromatogram: 1 folt (klórtoluidin), Rf-érték: 0,44 (kloroform-metanol-ecet-55 sav 75:24:1). Elemzési eredmények C28 H 4g N 4 0 8 S képlet alapján: 60 számított: C% 55,98, H% 8,05, N% 9,33, 0% 21,30, S% 5>34; talált: C% 56,20, H%8,22, N% 9,08, 0% 21,01, 65 S% 5,54. 15
