167256. lajstromszámú szabadalom • Eljárás orgotein tisztítására

MAGYAR NÉPKÖZTÁRSASÁG ORSZÁGOS TALÁLMÁNYI HIVATAL SZABADALMI LEÍRÁS Bejelentés napja: 1972. XI. 30. (DA-302) Amerikai Egyesült Államok-beli elsőbbsége: 1972. VII. 19. (273,278) Közzététel napja: 1975. IV. 28. Megjelent: 1976. VIII. 31. 167256 Nemzetközi osztályozás C 07 g 7/04 Feltalálók: Huber Wolfgang vegyész, San Francisco, Saifer Mark Gary vegyész, Berkeley, Chow Silver Heung vegyész, Sunnyvale, Kalifornia Amerikai Egyesült Államok Tulajdonos: Diagnostic Data, Inc., Mountain View, Kalifornia Amerikai Egyesült Államok Eljárás orgotein tisztítására A találmány tárgya új eljárás orgotein tisztítására. Orgoteinnek nevezzük azokat a fémtartalmú proteineket, amelyek vízoldhatók, más proteineket nem tartalmaznak, és így injektálhatok. (United States Adopted Name Council elnevezése szerint). Az utóbbi években megjelent közlemények alapján megállapítható, hogy az „orgotein" névvel öszszefoglalt fémtartalmú proteinek számos korábban különböző tisztaságban elkülönített és más néven nevezett termékkel azonosak. így e vegyületek megegyeznek a hemokupreinnel és hepatokupreinnel [Mann és Keilin, Proc. Royal, Soc. for Biol. Sei., 126, 303 (1939)]; a cerebrokupreinnal [Porter és Ainsworth, J. Neorochen., 1, 260 (1957)]; az eritrokupreinnal [Markovitz és munkatársai, J. Biol. Chem., 234, 40 (1959)]; a citokupreinnal [Carriso és Deutsch, J. Biol. Chem., 244 6087 (1969)]. Az orgoteint ismertetik a következő szerzők is; Mohamed és Greenberg [J. Gen. Physiol. 37, 433 (1954)], Porter és Folch [Arch, Neurol. Psychiat. 77 8 (1957)]. Porter és Ainsworth [J. Neurochem., 5, 91 (1959)]; Krímmel és munkatársai [J. Biol. Chem., 234, 46 (1959)]; Wyman [Biochem. Biophys. Acta, 45, 387 (I960)]; Shields és munkatársai, [J. Clin. Inv., 40, 2007 (1961)]; Markowitz és munkatársai, [Anal. Chem., 33, 1954 (1961)]; Porter és munkatársai [Arch. Biochem. Bioph., 105, 319 (1964)]; Stansell és Deutsch [J. Biol. Chem., 240, 4299 (1965)]; ibid, 240, 10 15 20 25 30 4306 (1965); Stansell és Deutsch, [Clin. Chem. Acta, 14, 598 (1966)]; McCord és Fridovich, [J. Biol. Chem., 244, 5733 (1969)]; Hartz és Deutsch, [J. Biol. Chem., 244, 4565 (1969); McCord és Fridovich, [J. Biol. Chem., 244, 6056 (1969)]; Carrico és Deutsch, [ibid, 245, 723 (1970)]. Egyes ismertetett fémtartalmú proteinek rendkívül nagy szuperoxid-diszmutáz hatással rendelkeznek [McCord és Fridovich, J. Biol. Chem., 244, 6049 (1969)]; Keele, McCord és Fridovich, [J. Biol. Chem., 245, 6176 (1970)]; ibid, 246, 2875 (1971)]. Az 1 160 151 számú Nagy-Britanniai szabadalmi leírásban és a 3 637 640, továbbá a 3 579 495 számú USA szabadalmi leírásban többlépéses eljárást ismertetnek orgotein oldható protein-keverékből történő elkülönítésére. A 3 637 641. és a 3 624 251 számú USA szabadalmi leírás pedig nyomnyi menynyiségű protem-jellegű szennyezések orgoteinből történő eltávolítására közöl eljárást. Az eljárás lényege az, hogy az orgoteint kb. 70 °C-on hőkezelés^ nek vetik alá vagy gyengén bázisos ioncserélő gyantán (DEAE-cellulózon) az ionerősség fokozatos változtatása mellett kromatografálják. A találmány szerinti eljárás előnye ezekkel az eljárásokkal szemben a rendkívüli egyszerűség. A találmány szerinti eljárás lényege az, hogy az orgoteint tartalmazó proteinkeveréket proteolitikus enzimek hatásának tesszük ki, s így a keverék nem kívánatos protein jellegű anyagait enzimatikusan lebontjuk. 167256