167141. lajstromszámú szabadalom • Eljárás 7-helyettesített 7-acilamino-CEF-3-EM-4-karbonsav-származékok előállítására
89 167141 90 59. példa 7a-metil-7j3-(2-tienilacetamido)-cefalosporánsav-nátriumsó A) 7a-metil-7/J-amino-cefalosporánsav-benzhidrilészter 10 Az alábbi ismertetendő módon előállított 330 mg 7a-metil-7|3-(p-nitro-benzilidénamino)-cefalosporánsav-benzhidrilészterhez 109 mg 2,4-dinitro-fenilhidrazin és 106 mg p-toluolszulfonsav-hidrát 10 ml etanollal készített oldatát adjuk és az 15 elegyet 1/2 óra hosszat reagálni hagyjuk. Ezután leszűrjük és a szűrőn maradt szilárd anyagot etanollal néhányszor mossuk. A szűrletet vákuumban bepároljuk, 8 pH-értékű vizes pufferoldatot adunk hozzá és éterrel kétszer extraháljuk. Az 20 egyesített éteres oldatot vízmentes magnéziumszulfáttal szárítjuk, leszűrjük, a szűrletet bepároljuk és a maradékot 10 g szilikagélen kromatografáljuk. Kloroform és etilacetát 4 :1 arányú elegyével eluálunk. Ily módon 81 mg tiszta 7a-metil-7j3-amino- 25 -cefalosporánsav-benzhidrilésztert kapunk, amely vékonyréteg-kromatográfiával, a fentivel egyező oldószer-rendszerben 0,25 Rf-értéket mutat. Magmágneses rezonancia-színkép: 5-értékek: 1,6 30 (7a-metil), 1,95 (acetil), 3,05, 3,35, 3,4, 3,7 (SCH2 ), 4,58, 4,72, 4,85, 5,07 (C&OAc), 3,6 (6a-H), 6,86 (benzhidril), 7,3 (aromás). Infravörös abszorpciós színkép: 5,63 (/3-laktám) és 5,76 (észter-karbonil) mikron, ms: 452, 382, 35 285. B) 7a-metil-7/3-(2-tienilacetamido)-cefalosporánsav-benzhidrilészter 40 80 mg 7a-metil-7/3-amino-cefalosporánsav-benzhidrilésztert 3 ml metilénkloridban oldunk és 0,1 ml piridint, majd 27 mg 2-tienil-acetilkloridot adunk hozzá. A reakcióelegyet 5 percig hagyjuk állni 45 25 C° hőmérsékleten, majd 25 ml benzolt adunk hozzá, az oldatot 2pH-értékű vizes foszfát-pufferoldattal, azután vízzel, majd 8 pH-értékű vizes pufferoldattal mossuk. A szerves oldószeres fázist azután elkülönítjük, vízmentes magnéziumszulfáttal 50 szárítjuk, szűrjük és a szűrletből az oldószert elpárologtatjuk. Dy módon 98 mg maradékot kapunk, ezt 5g szilikagélen történő kromatografálással tisztítjuk, majd kloroform és etilacetát 4 :1 arányú elegyével eluálunk. 78 mg tiszta 7a-me- 55 t il - 7 ß - (2-tienilace tamido)-cefalosporánsav-benzhidrilésztert kapunk. Magmágneses rezonancia színkép, 5-értékek: 1,8 (7a-metil), 1,97 (acetil), 3,35 (SCHr ), 3,75 (tie- 60 nil-CH2), 4,78 (6a-H), 4,6, 4,83, 4,94, 5,16 (CH2 OAc), 6,9, 6,95 (benzhidril és tíenil 0-H), 7,3 (aromás és tienil a-H). Infravörös abszorpciós" színkép: 2,9—3,0 (NH), 5,62 03-laktám), 5,74 (észter), 5,97 (amid) mikron. 65 C) 7a-metil-7/3-(2-tienilacetamido> -cefalosporánsav-nátriumsó 78 mg 7a-metil-7|8-(2-tienilacetamido)-cefalosporánsav-benzhidrilészterhez 0 C° hőmérsékleten 0,1 ml anizolt és 0,5 ml trifluorecetsavat adunk. Az elegyet 4 percig reagálni hagyjuk, majd a trifluorecetsavat 0 C° hőmérsékleten, 0,1 Hgmm-oszlop nyomáson, az anizolt pedig 30 C° hőmérsékleten, 0,1 mm nyomáson ledesztilláljuk. Ezután a trifluorecetsav teljes eltávolításának biztosítása érdekében újabb 1 ml anizolt adunk a maradékhoz és ezt is ledesztilláljuk a fenti módon. A maradékhoz 13 mg nátriumhidrogénkarbonát lml vízzel készített oldatát adjuk, metilénkloriddal kétszer mossuk, majd az elkülönített vizes fázist liofilizáljuk. Ily módon 43 mg tiszta 7a-metil-7j3-(2-tienilacetamido)-cefalosporánsav-nátriumsót kapunk. Magmágneses rezonancia-színkép (D2 O-ban, HOD 4,6 ő-értéknél): 1,7 (7a-metil), 2,02 (acetil), 2,95, 3,25, 3,4, 3,7 (SCH2), 3,75 (tienil-CH 2 ), 4,8 (6a-H), 4,72, 4,8 (CH2 OAc), 6,9, 6,95 (tienil 0-H), 7,18, 7,23, 7,28 (tienü a-H). Infravörös abszorpciós színkép: 3 (NH), 5,65 03-laktám), 5,72 (észter), 6 (amid), 6,2 (COONa) mikron. A fenti eljárás során kiindulóanyagként felhasználásra kerülő 7a-metil-7j3-(p-nitro-benzilidénamino)-cefalosporánsav-benzhidrilésztert az alábbi módon alítjuk elő: 7 a-amino-cefalosporánsav-benzhidrilészter és 4-nitro-benzaldehid ekvimolekuláris elegyét nitrogén-áramban melegítjük, 1 g aldehidra számítva 200 ml benzolban, és a reakció folyamán képződő vizet azeotropos desztillációval folyamatosan eltávolítjuk. A reakcióterméket a reakcióelegy csökkentett nyomáson történő bepárlása útján nyerjük ki, ily módon 7-(p-nitro-benzilidénamino)-cefalosporán sav-benzhidrilésztert kapunk. 286 mg fenti módon kapott észtert 8 ml tetrahidrofuránban oldunk és az oldathoz —78 C° hőmérsékleten, nitrogén-légkörben 0,218 ml tetrahidrofurános 2,3 mólos fenillítium-oldatot adunk. Az így kapott 7a-lítio-7/3-(p-nitro-benzilidénamino)-cefalosporánsav-benzhidrilészter-oldathoz —78 C° hőmérsékleten, nitrogén-légkörben 0,4 ml metiljodid 10 ml dimetilformamiddal készített oldatát adjuk. Az elegyet 5 percig keverjük -78 C° hőmérsékleten, majd 1/2 óra alatt szobahőmérsékletre hagyjuk felmelegedni. 100 ml benzolt adunk a reakcióelegyhez, majd a szerves oldószeres fázist vízzel hatszor mossuk, a második mosófolyadékot 2 pH-értékű foszfát-pufferrel előzetesen megsavanyítjuk, az ötödik mosófolyadékot pedig 8pH-értékű foszfát-pufferrel erre a. pH-értékre állítjuk be. Végül az így mosott benzolos oldatot vízmentes magnéziumszulfáttal szárítjuk, leszűrjük és vákuumban bepároljuk. Maradékként .330 mg 7a-metil-7j3-(p-nitro-benzilidénarnino)-cefalosporánsav-benzhidrilésztert kapunk. 45
