166686. lajstromszámú szabadalom • Eljárás új, hipokalcémiás hatású dotriakontapeptidamidok előállítására
3 166686 4 amino- vagy karboxilcsoport lehasítható védőcsoporttal védett, a védőcsoportot vagy védőcsoportokat lehasítjuk, vagy b) valamely II általános képletű SH 12 3 456789 10 11 R-CH-CO-Gly-Asn-Leu-Ser-Thr-Cys-X-Leu-Gly-Thr-12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 -Tyr-Thr-Gln-Asp-Phe-Asn-Lys-Phe-His-Thr-Phe-Pro-24 25 26 27 28 29 30 31 32 -Gln-Thr-Ala-Ile-Gly-Val-Gly-Ala-Pro-NH, vegyületet, ahol R és X a fent megadott jelentésű és ahol a merkapto-csoportok szabadok, az —SH csoportoknak —S—S— csoportokká való oxidálására ismert oxidálöszerekkel reagáltatunk, vagy ha a merkaptocsoportok tritilcsoporttal védettek, jóddal reagáltatunk, és kívánt esetben a szabad Na -aminocsoportot tartalmazó vegyületeket valamely legfeljebb 5 szénatomos alkánsavval, vagy ennek egy reakcióképes származékával a legfeljebb 5 szénatomos N^-alkanoil-származékká alakítjuk át, és kívánt esetben a keletkezett vegyületeket savaddíciós sóikká alakítjuk át. A találmány szerinti eljárás a) változatában alkalmazott kiindulási anyagok előállításánál, valamint a mindkét változatban szükséges közbenső termékekben is védőcsoportként főleg a hosszúláncú peptid-szintézisnél ismert, valamint néhány új védőcsoport jön számításba, melyek például hidrolízissel, redukcióval, aminolízissel vagy hidrazinolízissel könnyen lehasíthatok. így pl. aminovédőcsoportként acil- vagy aralkil-csoportokat, pl. formil-, trifluoracetil-, ftaloil-, benzolszulfonil-, p-toluolszulfonil-, o-nitrofenilszulfenil-, 2,4-dinitrofenilszulfenil-csoportokat (ezek a szulfenil-csoportok az 1 104 271 sz. brit szabadalmi leírás szerint nukleofil reagensek, pl. szulfitok, tioszulfátok hatására is lehasíthatok), adott esetben szubsztituált, pl. rövidszénláncú alkoxi-csoportokkal, főleg o- vagy p-metoxicsoportokkal szubsztituált benzil- vagy difenil- vagy trifenilmetilén-csoportokat, szénsavból származtatható csoportokat, pl. adott esetben az aromás gyűrűn pl. halogénatomokkal, mint klór- vagy brómatomokkal, nitrocsoportokkal, rövidszénláncú alkil- vagy rövidszénláncú alkoxicsoportokkal, vagy színképzőcsoportokkal, pl. azocsoportokkal szubsztituált arilmetoxikarbonil-csoportokat, melyekben a metiléncsoportok további aril- és/vagy egy vagy adott esetben két rövidszénláncú alkilcsoporttal lehetnek szubsztituálva, pl. benzil-, benzhidril- vagy 2-fenil-izopropil-oxikarbonil-csoportokat, pl. karbobenzoxi-, p-bróm- vagy p-klórkarbobenzoxi-, p-nitrokarbobenzoxi- vagy p-metoxikarbobenzoxi-, p-fenilazo-benziloxikarbonil- és p-(p'-metoxi-fenilazo)-benziloxikarbonil-, 2-tolilizopropiloxikarbonil- és főleg 2-(p-bifenilil)-izopropiloxikarbonil-csoportokat (lásd az 1 554 051 sz. francia szabadalmi leírást), valamint alifás oxikarbonil-csoportokat, pl. adamantiloxikarbonil-, ciklopentiloxikarbonil-, triklóretiloxikarbonil-, terc-amiloxikarbonil- vagy mindenekelőtt terc-butiioxikarbonilcsoportokat használunk. Az aminocsoportokat enaminok képzésével is védhetjük, az aminocsoportot 1,3-diketonokkal, pl. benzoilacetonnal, acetilacetonnal vagy dimedonnal reagáltatva. Karboxilcsoportokat pl. amid- vagy hidrazidképzéssel, vagy észterezéssel védhetünk. Az amid- vagy hidrazid-csoportok adott esetben szubsztituáltak lehetnek, az amidcsoport pl. 3,4-dimetoxibenzil- vagy bisz-(p-metoxi-fenil)-metil-csoportokkal, a hidrazid-csoport pl. 5 karbobenzoxi-csoporttal, triklóretiloxikarbonil-csoporttal, trifluoracetil- vagy tritilcsoporttal, terc-butiloxikarbonil-csoporttal vagy 2-(p-bifenilil)-izopropiloxikarbonil-csoporttal. Eszterezésre alkalmasak pl. a rövidszénláncú, adott esetben szubsztituált alkanolok, pl. meta-10 nol, etanol, ciánmetilalkohol, benzoilmetilalkohol, vagy főleg a terc-butanol, továbbá az aralkanolok,, pl. az aril-(rövidszénláncú)-alkanolok, mint adott esetben rövidszénláncú alkil- vagy rövidszénláncú alkoxi-csoportokkal vagy halogénatomokkal szubsztituált benzil-15 vagy benzhidrilalkoholok, mint pl. a p-nitrobenzilalkohol, p-metoxibenzilalkohol vagy 2,4,6-trimetilbenzilalkohol, adott esetben elektronfelvevő szubsztituensekkel szubsztituált fenolok vagy tiofenolok, pl. a tiofenol, tiokrézol, p-nitrotiofenol, 2,4,5- és 2,4,6-triklórfenol, 20 pentaklórfenol, p-nitrofenol, 2,4-dinitrofenol, p-cianofenol vagy p-metánszulfonilfenol, továbbá pl. az N-hid-roxiszukcinimid, N-hidroxiftálimid, N-hidroxipiperidin vagy 8-hidroxikinolin. A Ser-, Thr- és Tyr-csoportok hidroxilcsoportjait pl. 25 észterezéssel vagy éterezéssel védhetjük. Eszterezésre alkalmas acilcsoportok pl. a rövidszénláncú alkanoilcsoportok, mint az acetilcsoportok, aroilcsoportok, pl. benzoilgyök és mindenekelőtt a szénsavból származó csoportok, pl. a benziloxikarbonil- vagy etiloxikarbonil-30 gyök. Éterezésre alkalmas csoportok pl. a benzil-, tetrahidropiranil- vagy terc-butilcsoportok. Alkalmasak továbbá hidroxilcsoport védésére a Ber. 100 3838—3849 (1967) cikkben leírt 2,2,2-trifluor-l-terc-butiloxikarbonilamino- vagy -1-benziloxikarbonilaminoetil-csoportok 35 (Weygand). A hidroxil-csoportokat azonban nem feltétlenül szükséges védeni. A Cys-csoportok merkapto-csoportjait pl. acilezéssel vagy alkilezéssel védjük. Acilezésre alkalmas pl. az acetil- vagy benzoilcsoport, az etilkarbamoil-, vagy az 40 adott esetben szubsztituált karbobenzoxicsoport. Alkilezésre szolgáló csoport pl. a terc-butil- vagy benziltiometilcsoport, vagy adott esetben szubsztituált arilmetil-csoportok, pl. benzil-, p-nitrobenzil-, difenilmetil-, dimetoxibenzhidril- vagy tritil-csoport, továbbá 45 a fenilciklohexil-, tienil(2)-ciklohexil-csoport [lásd Ber. 101 681 (1968)]. A hisztidin iminocsoportját nem feltétlenül szükséges védeni, előnyös lehet azonban a csoportot pl. benzil-, tritil-, karbobenzoxi-, adamantiloxikarbonil-csoporttal vagy a fentiekben említett 50 Weygand-csoportokkal védeni. A találmány szerinti eljárás a) kiviteli változatában az oldallánc karboxil-csoportjának védésére előnyösen terc-butilészter-csoportot, az oldallánc aminocsoportjának védésére terc-butiloxikarbonil-csoportot, a Ser-, 55 Thr- és Tyr-csoportok hidroxilcsoportjainak védésére, amennyiben azokat egyáltalában védeni kell, terc-butiléter-csoportot, és ha szükséges, a His-csoport iminocsoportjának védésére 2,2,2-trifluor-l-terc-butiloxikarbonilaminoetil-csoportot használunk. Az összes védő-60 csoportot, ha szükséges, egy lépésben savas hidrolízissel, pl. trifluorecetsavval vagy sósavval hasíthatjuk le. Az a) eljárási változatban kiindulási anyagként használt védett dotriakontapeptid felépítésekor trifluorecetsavval vagy sósavval lehasítható védőcsoportok használata 65 mellett a merkaptocsoportokat előnyösen benzil- vagy 2
