166159. lajstromszámú szabadalom • Eljárás szabad, vagy N-szubsztituált 7-amino-CEF-3-EM-4-karbonsav-vegyületek előállítására

3 A találmány további alapja, hogy a találmány szerinti eljárással a cefalosporin C vizes oldatából magas kitermeléssel különíthető el. A találmány további alapja az a felismerés, hogy előnyös eljárással a cefalosporin C-ből N-izoborniloxikarbonil-cefalosporin C és N-izoborniloxikarbonil-cefalosporin C-észter keletkezik, amelynek decilezése és egy észterhasítási reakció után 7-aminocefalosporánsav keletkezik. Az izoborniloxikarbonil-cefalosporin C-t úgy állítjuk elő, hogy a cefalosporin C-t izoborniloxikarbonilkloriddal vagy 1-izoborniloxikarbonilpiridiniumkloriddal reagáltatjuk. Az 1-izoborniloxokarbonilpiridiniumklorid piridin-gyűrűje egy vagy több szubsztituenssel szubsztituálva lehet, ez a reakciót nem zavarja. így az izoborniloxikarbonilpiridiniumklorid például 1-izoborniloxikarbonil - 4- dimetilaminopiridiniumklorid, 1 - izoborniloxikarbonil - 4 - amino - piridiniumklorid stb. lehet. Az 1 - izoborniloxikarbonilpiridinium - származék szubsztituensei előnyösen a piridin-gyűrű 2- vagy 4-es helyzetében szubsztituáltak, és előnyösen elektron-donor tulajdonságú csoportok, például amino-, alkilezett amino- (például metilamino-, etilamino-, dimetilamino), hidroxil- vagy hasonló csoportok. A találmány szerinti eljárás kivitelezésekor az 1-izoborniloxikarbonilpiridiniumklorid az izoborniloxikarbonilkloridnál előnyösebben használható, ugyanis az izoborniloxikarbonilklorid vízben gyengén oldódik, víz és egy szerves oldószer, például aceton, dioxán vagy tetrahidrofurán elegyében reakcióképesebb, mint vizes oldatként, ugyanakkor az 1-izoborniloxikarbonilpiridiniumklorid-származékok vízoldhatók és szerves oldószer jelenléte nélkül is igen reakcióképesek. Az 1 -izoborniloxikarbonilpiridiniumklorid-származékokat úgy állítjuk elő, hogy az izoborniloxikarbonilkloridot a megfelelő piridin-vegyülettel a kvaterner piridiniumsók előállításának ismert módszere szerint reagáltatjuk. Mind az izoborniloxikarbonilklorid, mind az 1-izoborniloxikarbonilpiridiniumklorid racém vagy optikailag aktív alakban lehet. A cefalosporin C vizes oldatban használható. A vizes oldat cefalosporin C-t termelő mikroorganizmusok tenyésztő táptalajából is származhat (a táptalaj szűrlete). A tenyésztő táptalajt az ismert eljárások szerint állíthatjuk elő. Ilyen fermentációs eljárásokat, illetve táptalajokat ismertetnek az US 3 139 388 és az US 3139 sz. szabadalmi leírások. A tenyésztő táptalaj vagy szűrlete nagy mennyiségű vízben oldódó szennyeződést vagy zsírban oldódó szennyeződést (például cefalosporin N, cefalosporin P, habzásgátlók stb.) tartalmazhat. Ilyen esetben a vizes oldatot előnyösen úgy állítjuk elő, hogy a tenyésztő táptalajt vagy szűrletét előzőleg az ismert tisztítási eljárásokkal kezeljük, például kromatográfiás úton vagy szerves oldószerrel (etilacetát, metiletilketon vagy hasonlók). Az izoborniloxikarbonilkloridot vízzel elegyedő oldószerben — amely a reakcióban nem vesz részt — oldva adhatjuk a reakciórendszerhez. Ilyen oldó-4 szerként acetont, dioxánt, tetrahidrofuránt stb. használunk. Az 1-izoborniloxikarbonilpiridiniumkloridot vizes oldatként adjuk a reakcióelegyhez. 5 A reakciót előnyösen megfelelő oldószerben végezzük. Ilyen oldószer például a víz, egy szerves oldószer, előnyösen vízzel elegyedő oldószer, például aceton, dioxán, tetrahidrofurán stb., vagy egy szerves oldószer, előnyösen vízzel elegyedő oldó-10 szer, például aceton, dioxán, tetrahidrofurán stb., vagy egy szerves oldószer és víz elegye. A reakciót előnyösen olyan oldatban végezzük, amelynek pH-ja 6,5 és 11 között, előnyösebben 7 és 10, legelőnyösebben 8 és 9 között van. 15 A reakcióelegy pH-ját előnyösen szervetlen sóval vagy bázissal, például nátriumhidrogénkarbonáttal, nátriumhidroxiddal, káliumhidroxiddal, lítiumhidroxiddal, kalciumhidroxiddal vagy magnéziumhidroxiddal, vagy szerves bázissal, például trietilamin-20 nal, tributilaminnal, N-metilmorfolinnal vagy piridinnel állítjuk be. A reakciót hűtés közben vagy szobahőmérsékleten, és bizonyos körülmények között melegen is kivitelezhetjük. Előnyösen a reakciót —5 és 50 °C 25 közötti hőmérséklettartományban, előnyösebben 0 ós 35 °C hőmérsékletek között végezzük. A fent említett reakciókörülmények között a reakció rendszerint 10 perc és 4 óra közötti idő alatt végbemegy. 30 Az N-izoborniloxikarbonil-cefalosporin C-t a reakcióelegyből úgy különítjük el, hogy szervetlen savakkal, például sósavval, kénsavval stb. savanyítjuk azt (pH 2—3), majd vízzel nem elegyedő szerves oldószerrel, például éterekkel (dietiléter), 35 alkoholokkal (n-butanol), észterekkel (etilacetát), ketonokkal (metiletilketon), klórozott szénhidrogénekkel (metilénklorid) extraháljuk. Az extraktum bepárlása után megkapjuk a terméket. Ha az N-izoborniloxikarbonil-cefalosporin C koncentrá-40 ciója az oldatban viszonylag magas, a termék úgy is elkülöníthető, hogy a reakcióelegy pH-ját szervetlen savval 1 és 3 közé állítjuk be, és a kivált csapadékot — az N-izoborniloxikarbonil-cefalosporin C-t — elkülönítjük. 45 A fenti eljárással kapott izoborniloxikarbonil-cefalosporin C a zsírban oldódó antibiotikumok, még inkább a savas, zsírban oldódó antibiotikumok ismert tisztítási eljárásához hasonló módon tisztítható. Például úgy, hogy a hatóanyagot gyengén 50 megsavanyított oldatából előnyösen szerves oldószerrel extraháljuk, lúgos pH-értéken (előnyösen pH 8 és 9 között) vizes fázisba, majd savas pH-értéken (előnyösen pH 1 és 3 között) ismét szerves fázisba extraháljuk. A fentiek mellett természetesen 55 használhatunk más tisztítási eljárásokat is, például ellenáramú extrakciót, ellenáramú megoszlást, adszorpciót, ioncserélő kromatográfiai, gélszűrést stb., vagy ezek előnyös variációit abból a célból, hogy tiszta N-izoborniloxikarbonil-cefalosporin C-t kap-60 junk. Ahogy fentebb említettük, a cefalosporin C-tartalmú femrentlé cefalosporin C-tartalmú oldatként fogható fel, annak ellenére, hogy ez rendszerint cefalosporin N-t is tartalmaz. A cefalosporin N el-65 távolítására felhasználjuk azt, hogy a cefalosporin N 2