166156. lajstromszámú szabadalom • Eljárás monoszacharidok elválasztására diszacharidokat és oligo szacharidokat tartalmazó keverékekből
5 166156 6 A megoszlási együtthatót (KD) a következő egyenlettel számíthatjuk ki: 2. táblásat KD = ^-Vo vt _Li__y ahol Ve = a kromatográfiás csúcsnak megfelelő oldott anyagot tartalmazó eluens térfogata, Vt = a gyantaágy térfogata, V0 = a gyantaágy gyantamentes térfogata, V> = a gyantaágy térfogategységére jutó gyantamentes térfogat. A fenti számítás szerint a mono-, di- és magasabbrendű szacharidok megoszlási együtthatói a következők : 0,30 mm szemcsemóretű gyantán: KD (Na+) KD (Ca 2 +) Triszacharidok 0,10 0,10 Diszacharidok 0,26 0,26 Monoszacharidok 0,43 0,38 Glükóz 0,39—0,41 0,35 Fruktóz 0,44—0,49 0,48 0,42 mm szemcseméretű gyantán: KD (Na+) Triszacharidok 0,08 Diszacharidok Monoszacharidok Glükóz 0,26 4,43 0,37 Fruktóz 0,46 25 30 Attól függően, hogy az ábrán bemutatott görbe melyik szakaszán gyűjtöttük a frakciót, a monoszacharidok részaránya a végtermékben megközelítheti a 100%-ot. Az 1. táblázatban a végtermék monoszacharid-tartalmát, a teljes szárazanyag-kitermelést, illetve a monoszacharid-kitermelést tüntetjük fel. 1. táblázat Végtermék monoszacharidtartalma, % Teljes szárazanyagkitermelés, % Monoszacharidkitermelés, % 100 92,5 96,3 99,6 95,6 99,6 98,8 96,8 99,9 Az oszlopban azonos, körülbelül 0,15—0,84 mm átlagos szemcseméretű gyantát alkalmazunk. Előnyösen 0,2—0,6 mm átlagos szemcseméretű gyantát használunk. 2. példa Gyanta: Zeolit 225 (Na-forma) Oszlop méretei: magasság: 3,5 m, átmérő: 22,5 cm Betáplálási sebesség: 56 liter/óra Tápoldat: 36 súly% szárazanyagot tartalmazó Isomerose-oldat (a szárazanyag 42,2% fruktózt, 48,8% glükózt és 9,0% oligoszacharidot tartalmaz) Az elválasztás eredményét a 2. táblázatban kö-Frakoió száma Szárazanyag, g Fruktóz g Glukóz g Oligoszacharidok, g 10 15 20 1 10,7 — — 10,7 2 22,4 — — 22,4 3 35,0 — — 35,0 4 32,2 — — 32,2 5 33,6 — — 33,6 6 27,1 — — 27,1 7 41,1 — — 41,1 8 53,6 — — 53,6 9 56,4 — 2,1 54,3 10 174,9 7,4 103,2 66,3 11 439,9 58,7 333,5 47,7 12 758,5 203,6 530,5 24,4 13 966,6 476,6 484,6 5,4 14 918,1 470,6 447,5 — 15 758,5 441,5 317,0 — 16 541,1 340,4 200,7 — 17 222,5 150,2 72,3 — 18 4,1 4,1 — — 35 40 45 Megjegyzés: a frakciókat 5 percenkéntgyűjtöttük. Az 1—9., 10—14. és 15—18. frakciókat egyesítjük, és az egyesített frakciókat rendre „a"-val, „b"-vel, illetve „c"-vel jelöljük. Az „a" frakció tartalmazza az oligoszacharidok legnagyobb részét, a „b" frakció pedig glükózban dús, míg a „c" frakció fruktózban dús oldat. Az egyes frakciók száraz anyag-összetételét a 3. táblázatban közöljük. 3. táblázat Frakció jele Szárazanyag, g Fruktóz /o Glükóz Oligoszacharidok, % a 312,2 — 0,7 99,3 b 3258,0 37,3 58,3 4,4 c 1526,0 61,3 38,7 — A komponensek mennyiségét gázkromatográfiás elemzéssel határoztuk meg. Egy további eljárásváltozat szerint az 1—13. és 14—18. frakciókat egyesítjük, és így az „A" és „B" jelű két főfrakciót kapjuk. Az „A" frakció tartalmazza az oldatban jelenlévő összes di-, tri- és oligoszacharidot kevés glükózzal és fruktózzal együtt, míg a fruktózban dús „B" frakció fruktózon kívül már csak glükózt tartalmaz. Eljárhatunk úgy is, hogy a di-, tri- és oligoszacharidokat, a glükóz főtömegét és kismennyiségű fruktózt tartalmazó frakciókat egyesítjük, és az ezután következő frakciókat külön fogjuk fel. Ekkor lényegében tiszta fruktózt tartalmazó frakciót különíthetünk el. 3. példa Oligoszacharidok kromatográfiás elválasztása keményítő-hidrolizátumból 15% diszacharidot, triszacharidot, illetve ma-65 gasabbrendű szacharidot tartalmazó búzakeményí-50 55 60 3
