165659. lajstromszámú szabadalom • Eljárás kanamycin származékok előállítására
17 165659 18 Vékonyrétegkromatogram (szilikagél F2 5 4 , ninhidrin) oldószer rendszer Rf-érték 6'-kbz-kanamycin A kanamicin A n-propanol-piridin-ecetsav-víz (15:10:3:12) aceton-ecetsav-víz (20 :6 : 74) kloroform-metanolc.NH4 0H-víz(l :4:2:1) metilacetát-n-propanolc.NH4 OH(45:105:60) Megjegyzés: +: antron-kénsawal jelezve 0,42 0,33 0,15 (fő) (gyenge) 0,24 0,76 0,22+ 7. példa AL-(—)-7-hidroxivajsav előállítása ambutirozin vagy B-ből vagy azok keverékeiből 5,0 g ambutirozin A-t (3 541 078 számú Amerikai Egyesült Államok-beli szabadalmi leírás) visszafolyató hűtő alkalmazásával egy órán át forralunk 160 ml 0,5 n nátriumhidroxi-oldattal. A hidrolizátumot 6 n sósav-oldattal semlegesítjük és CG-50 típusú oszlopon (NHß típusú) kromatografáljuk. A kívánt L-(-)-7-amino-a-hidroxivajsavat úgy különítjük el, hogy az oszlopot vízzel kifejlesztjük és a vizet fagyasztva szárítással eltávolítjuk. Az L-(—)-y-amino-a-hidroxivajsav kristályos anyag, amelynek olvadáspontja 212,5-214,5 C° (lásd 3 541 078 számú Amerikai Egyesült Államok-beli szabadalmi leírás 2. oszlopa, 31-38. sorai). 8. példa 0,04 0,14 0,50 0,04+ 20 6'-Karbobenzoxikanamycin B előállítása 8,1 g (0,0168 mól) kanamycin B 120 ml vízzel 45 és 80 ml 1,2-dimetoxietánnal készített, lehűtött oldatához keverés közben cseppenként hozzáadjuk 4,2 g (0,0168 mól) N-(benziloxikarboniloxi)szukcinimid 40 ml 1,2-dimetoxietánnal készített oldatát. A reakcióelegyet éjszakán át keverjük, 50 majd csökkentett nyomáson bepároljuk. A maradékot feloldjuk 100 ml vízben és kétszer 50 ml vízzel telített n-butanollal kirázzuk. A vizes fázist elválasztjuk és 100 ml térfogatú CG-50 gyantaoszlopon (NH4 típusú) adszorbeáljuk. Az oszlopot 55 200 rnl vízzel mossuk és 0,055 n ammóniumhidroxid-oldattal eluáljuk. 10 ml térfogatú eluátum frakciókat gyűjtünk össze. A 121—180. frakciókat egyesítjük, bepároljuk és fagyasztva szárítjuk. így 1,58 g (15%) kívánt terméket kapunk. Az 1-120 60 frakciókat bepároljuk és CG-50 típusú gyantaoszlopon (NH4 típusú) újra kromatografáljuk. így 1,21 g (12%) terméket kapunk. Olvadáspont: 151-152 C° (bomlás), [aß 4 =+104° (c = 2,5, vízben). IR-spektrum: PC=O: 1710 cm" 1. 65 Elemzési eredmények C26 H43N40 12 -re vonatkoztatva: 25 számított: talált: C 50,56%, N 11,34, C 50,71%, N 11,48%. H 7,02% H 7,38%, 30 Vékonyrétegkromajpgráfiás eredmények (szilikagél F254): Rf = 0,03 n-propanol-ecetsav-víz (15 :10 : 3 :12) rendszerben, Rf = 0,16 aceton-ecetsav-víz 35 (20 : 6 :74) rendszerben. 9. példa 1-(L—)-(-7-Benziloxikarbonilamino-a-hidroxibuti-40 ril)-6'-karbobenzoxikanamycin B előállítása 1,85 g (3,0 mól) 6'-karbobenzoxikanamycin B 40 ml vízzel és 50 ml 1,2-dimetoxietánnal készített oldatához keverés közben, 5 C°-on egyszerre hozzáadunk 1,1 g (2,1 mmól) N-(L-7-karbobén z oxi amino-a-hidroxibutiriloxi)-szukcinimidet. A reakcióelegyet éjszakán át szobahőmérsékleten keverjük, majd a karbobenzoxi-származék elkülönítése nélkül hidrogenolízisnek vetjük alá. Vékonyrétegkromatográfiás eredmények (szilikagél F254): Rf=0,06 (kiindulási anyag), 0,41, 0,57 (n-propanol-piridin-ecetsav-víz 15:10:3:12 rendszerben). Rf = 0,ll (kiindulási anyag), 0,21, 0,34, 0,46 (aceton-ecetsav-víz 20 : 6 : 74 rendszerben). 10. példa B l-(I^-)-(-7-Amino-a-hidroxibutiril)-kanamycin előállítása A 9. példa szerinti módon előállított oldathoz 0,2 g, 10% palládiumot tartalmazó aktív szenet adunk. Ezután az elegyet atmoszférikus nyomáson 9
