165408. lajstromszámú szabadalom • Eljárás 3-helyettesített 7béta-(D-5-amino-5-karboxi-vaIeramido)-7-metoxi-cef-3-em-4-karbonsav-származékok előállítására

165408 51 52 -amino-5*-karboxi-valeramido)-3-(«-metoxi-p-szulfoxi-cinnamoiloximetil)-7-metoxi-cef-3-em-4-karbonsavat (Ic) kapunk. E termék ibolyántúli abszorpciós színképe a következő jellemző adatokat mutatja: 0,1 n HCl-ben: 1^, 285 (EJ ^ 16t}

)A jelen leírásban ismertetett biológiai kísérletekben alkalmazott különféle vizsgálati mikroorganizmus-törzsek az American Type Culture Collection gyűjteményében letétbe helyezett és a nyilvánosság számára a következőkben felsorolt ATCC nyilvántartási számok alatt hozzáférhető törzsek Escherichia coli W—MB—«0 ATCC 9637 Proteus vulgaris MB—838 ATCC 21000 Alcaligenes faecalis MB ATCC 212 Alcaligenes viscosus MB—12 ATCC 337 Vibrio peroolans MB—1272 ATCC 8461 Bacillus subtilis MB—964 ATCC 6633 A fenti leírás során különböző kereskedelmi termékeket említettünk táptalaj-alkotórész vagy egyéb felhasználásra kerülő segédanyag gyanánt. Ezek a leírásban kereskedelmi néven említett termékek a következőkben megadott gyártócégek termékei: az alábbiakban megadjak a szóban forgó termékek rövid jellemzését is: Amber Yeast No. 300: autolizált sörélesztő egyik frakciója; gyártja; Amber Laboratories, Juneau, Wisconsin. Mobil par—S: olajalapú habzásgátló szer (öszszetételét a forgalomba hozó cég nem ismerteti): gyártó: Mobil Oil Company, 150 E. 42nd Street, New York, N. Y. Poliglikol 2000: polipropilénglikol-polimer alapú habzásgátló szer, átlagos molekulasúlya 2000; gyártó: Dow Chemical Company, Midland, Michigan. Biogel P—2: gél szűrésre alkalmas szűrőközeg; metilén-bisz-akrilamiddal térhálósított poliakrilamid; gyártó: Bio-rad Laboratories, Richmond, California. Dowex 50: polisztirol^szulfonsav alapú kationcserélő gyanta; gyártó: Dow Chemical Company. Michigan. Analtech G. F. Plates: kalciumszulfát-kötőanyagot tartalmazó szilikagél lemez, fluoreszcencia-indikátorral; vastagsága 250 mikron; gyártja: Analtech Inc., Wilmington. A találmány szerinti eljárással előállított 810A antibiotikum alkotórészei szabad karbonsavak, amelyek akár együtt, akár egymástól elkülönített alakban önmagukban ismert kémiai módszerekkel a megfelelő sókká vagy észterekké alakíthatók át. A só-képzés a szokásos módon a szabad karbonsavnak a megfelelő bázissal való reagáltatása útján történik. Észterek előállítása céljából a szabad karbonsavat vagy esetleg annak sóját, adott esetben az egyéb reakcióképes csoportok megvédésével, a megfelelő, önmagában ismert észterezőszerrel reagáltatjuk, például a következőkben ismertetett módon: 14 mg 7/SM(D-5-amino-5-karboxi-valeramido)-3-(a-metoxi-p-'hidroxi-cinnamoiloximetil)-7--metoxi-cef-3-em-4-karbonsavat 0,5 ml ,50

/(ros dmátrium-hidrogén-foszfát-oldatban oldunk, és 5 az oldatot 10 pH-értékre állítjuk, majd jégfürdőben hűtjük, és hozzáadjuk 7 mg triklór-etoxi.karbonil-klorid 0,1 ml acetonnal készített oldatát. Az elegyet 10 percig keverjük, majd 1 ml etilacetáttal egyszer extráinál juk. Az elkülönített !* etilacetátos oldathoz diazo-metán feleslegét adjuk, majd az elegyet bepároljuk. A maradékot szilikagél lemezen, kromatografáljuk, és 5% metanolt tartalmazó kloroformmal eluálunk. A kromatogramról a 0,54 Rr

értéknek megfelelő fősá-15 vot kivesszük és etilacetáttal eluáljuk. Az eluátumból 7/HD-5-amino-5-karboxi-valeramido)-3-(_a-metoxi-p-hidroxi-cinnamoiloximetil)-7-metoxi-cef-3^em-4-karbonsav-metilészternek az aminocsoporton 2,Q,2-triklóretoxi-csoporttal védett 20 származékát kapjuk. A kapott termék ibolyántúli abszorpciós színképe 194, 363, 543 és 587 millimikronnál mutat jellemző sávokat. A fent leírttal egyező módon, de észterezőszerként diazo-metán helyett difenil-diazo-me-25 tán alkalmazásával állítjuk elő a megfelelő benzhidrilésztert is, amelynek Rr

értéke szilikagélen 25% etilacetátot tartalmazó kloroformban 0,3. 30 Szabadalmi igénypontok 1. Eljárás új cefem-vázas antibiotikumok, « 7/?-(D-5-amino-5-karboxi-valeramido)-3-(a-met~ oxi-p-iSzulfoxi-cinnamoiloximetil)-7-metoxi-cef-35 -3-em-4-karbonsav és 7/>'-(D-5-amino-5-karboxi -valeramido)-3-(a-metoxi-p^hidroxi-cinnamoiloximetil)-7jmetoxi-cef-3-em-4-karbonsav elegye tartalmazó fermentációs terméknek, és adót esetben e két elkülönített vegyületnek, valamin 40 ezek észtereinek előállítására, azzal jellemezv« hogy a következőkben felsorolt és az U. S. De partment of Agriculture, Northern Utilizatio; Research and Development Branch (Peoria, Ilii nois) hivatalos nyilvános gyűjteményében a ke 45 vetkezőkben megadott NRRL szám alatt letétb helyezett Streptomyces törzsek: Streptomyces griseus MA—,2837 (NRRL 3851) Streptomyces griseus MA—446© (NRRL 395.1) 50 Streptomyces griseus MA—4174 (NRRL 3953) Streptomyces griseus MA—4171 (NRRL 3952) Streptomyces viridochromogenes MA—4177 (NRRL 3970) Streptomyces viridochromogenes MA—4178 55 (NRRL 3971) Streptomyces viridochromogenes MA—4180 (NRRL 3972) Streptomyces viridochromogenes MA—4164 (NRRL 3966) 60 Streptomyces viridochromogenes MA—4165 (NRRL 3967) Streptomyces viridochromogenes MA—4166 (NRRL 3968) Streptomyces viridochromogenes MA—4167 65 (NRRL 3969)