165147. lajstromszámú szabadalom • Eljárás új pregnán-21-sav-származékok előállítására
165147 5 desztilláltvízből, 5 rész éterből és 10 rész 4%-os éteres krotonolajoldatból álló szerben oldottuk. Evvel a tesztoldattal tárgylemezcsipesz belső oldalára erősített nemez szalagot itatunk át, és ezt 15 másodpercig enyhe nyomással 100—160 g súlyú hímpatkányok jobb fülére szorítjuk. A nem kezelt bal fül szolgál összehasonlításul. Az alkalmazás után 3 órával az állatokat megöljük, és fülükből 9 mm átmérőjű korongokat vágunk ki. A jobb és baloldali fülből kivágott korongok közötti súlykülönbség a képződött ödéma mértéke. Meghatározzuk a vizsgálandó anyag azon dózisát, amelynél ödémaképződés nem lép fel. Ebből a dózisból a találmány szerinti vegyületek relatív hatékonyságát a 6a-fluor-ll|3,21-dihidroxi-16-a- metil-1,4-pregnadién-3,20-dion (Fluocortolon) hatékonyságához viszonyítva közöljük. Anyag va 6a-fluor-l 16a-metiltilészter 6a-fluor-l 16a-metiltilészter 6a-fluor-l 16a-metiltilészter 6a-fluor-l 16a-metiltilészter 1 j3,20aF -dihidroxi-3-oxo-1,4-pregnadién-21 -sav-me-10,2O/3F -dihidroxi-3-oxo-1,4-pregnadién-21 -sav-me-10,2OaF -dihidroxi-3-oxo-1,4-pregnadién-21 -sav-bu-10,2O0F -dihidroxi-3-oxo-1,4-pregnadién-21 -sav-bu-0,7 0,6 1,2 1,0 Hasonló eredményeket kapunk, ha a találmány szerinti vegyületek helyi gyulladásgátló hatását embereken érszűkülésvizsgálatban határozzuk meg. Ezenkívül az (I) általános képletű vegyületek olyan meglepő tulajdonságokkal rendelkeznek, amelyeket az ismert gyulladásgátló hatású kortikoidoknál még soha nem figyeltek meg. Azt találtuk, hogy a vizsgált vegyületek szisztematikusan teljesen hatástalanok, mint az alább leírt farmakológiai vizsgálatok igazolják. 130-150 g súlyú SPF-patkányok jobb hátsó talpába 0,1 ml 0,5%-os Mycobacterium butyricum szuszpenziót (a Difco cég készítménye) fecskendezünk gyulladásos góc kialakítására. Az injekció előtt megmérjük a patkányok talpának nagyságát, majd az ödéma méretének meghatározására az injekció után 24 órával ezt ismételten lemérjük. Ezután a patkányokba szubkután 29% benzilbenzoát és 72% ricinusolaj elegyében oldott különböző mennyiségű vizsgálandó anyagot fecskendezünk. További 24 óra elteltével a talp nagyságát ismét megmérjük. A kontroll állatokat azonos módon kezeljük, de azokba vizsgálandó anyagot nem tartalmazó ben-10 15 Relatív hatékonyság a 20 Fluocortolonhoz viszonyít-25 30 35 40 45 50 55 60 zil-benzoát-ricinusolaj-keveréket fecskendezünk. A kapott talpnagyságokból a százalékos ödémagátló hatást szokásos módon számoljuk. Ezeknél a kísérleteknél összehasonlító anyagként ugyancsak az ismert 6a-fluor-ll/J, 21-dihidroxi-16ametil-l,4-pregnadién-3,20-diont használjuk. Ez a vegyület testsúlykilogramonként 1,0 mg dózisban alkalmazva kb. 40%-os ödémagátló hatású. Ha a kísérletekhez testsúlykilogramonként 0,3 mg, 1,0 mg, 3,0 mg vagy 10 mg 6a-fluor-ll|3, 20c^-dihidroxi-3-oxo-16 a -metil-1,4-pregnadién-21 -sav-metilésztert, 6a-fluor-11/3, 20/3F-dihidroxi-3-oxo- -16a-metil-l,4-pregnadién-21-sav-metilésztert, 6a-fluor-l 10,2OaF- dihidroxi-3-oxo-1 ócMiietil-1,4-pregnadién-21 -sav-butilésztert 6a-fluor-110,2Oj3F -dihidroxi-3-oxo-16a-metil-l,4-pregnadién-21-sav-butilésztert használunk, minden esetben 0%-os ödémagátló hatást kapunk, ezek a vegyületek tehát szisztematikusan nem gyulladásgátló hatásúak. A timolitikus hatás meghatározására 70—120 g súlyú SPF-patkányok mellékvesekérgét éternarkózisban eltávolítottuk. 6 állat alkot egy vizsgálati csoportot, amelyekbe 3 napon át szubkután 29% benzilbenzoát és 71% ricinusolaj keverékében oldott, meghatározott mennyiségű vizsgálandó anyagot fecskendezünk. A negyedik napon az állatokat megöljük, és megmérjük a thymus-uk súlyát. A kontroll állatokat azonos módon kezeljük, de vizsgálandó anyag nélküli benzilbenzoát-ricinusolaj-keveréket kapnak. A kapott Thymus-súlyokból állapítjuk meg a timolitikus hatást. összehasonlító anyagként ismét a 6a-fluor-11/3,21-dihidroxi-16a-metil-l,4-pregnadién-3,20-diont használjuk, amely testsúlykilogramonként 1,0 mg dózisban alkalmazva mintegy 35%-os timolízist okoz. Ha a kísérletekhez testsúlykilogramonként 0,3 mg, 1,0 mg, 3,0 mg vagy 10 mg 6a-fluor-110, 20aF-dihidroxi-3-oxo- 16a-metil-1,4-pregnadién-21 -sav-metilésztert, 6ä-fluor-110, 20/3F-dihidroxi-3-oxo-16a-metil-1,4-pregnadién-21 -sav-metilésztert, 6ce-fluor-l lß,20a F-dihidroxi-3-oxo-16a-me til-1,4-pregnadién-21 -savbutilésztert vagy 6a-fluor-ll|3,20|3F-dimdroxi-3-oxo-16a-metil-l,4-pregnadién-21-sav- butilésztert használunk, minden esetben 0%-os timolitikus hatást kapunk. Az, hogy az (I) általános képletű vegyületek szisztematikus mellékhatással nem rendelkeznek, az eozinofil, glokogén vagy mátrium-kálium retenciós vizsgálatokkal is bizonyítható. A találmány szerinti eljárással tehát olyan topikálisan kiváló gyulladásgátló hatású vegyületeket szintetizáltunk, amelyek azonban szisztematikusan hatástalanok. Ezek a vegyületek tehát alkalmasak bőrgyulladások kezelésére, a véráramba jutva azonban meglepő módon teljesen hatástalanok. A bőrgyulladások kezelésére korábban alkalmazott kortikoidok topikális hatásuk mellett mindenkor szisztematikus hatással is rendelkeztek. Ezek a kortikoidok topikális alkalmazás esetében a gyulladt bőrön keresztül történő reszorpció vagy bőrsérülés következtében a véráramba juthatnak, ahol azok 3
