164882. lajstromszámú szabadalom • Eljárás 7-acilamino- 3-szubsztituált -tiometil- cefalosporánsav- származékok előállítására
164882 13 14 színtelen csapadék alakjában nyerjük a 7-[(4-terc-amiloxikarbonÜ-amino-piridinium)-acetilamino]-3--(l-metil-tetrazol-5-u-tio)-metil-cef-3-ern-4-karbonsavat. Vékonyrétegkromatográfiás vizsgálat, szilikagélen: Rfs2 A=0,26, Rf, 01 =0,53, Rf 69 =0,39 (a kimutatást káliumjodidos jódoldattal végezzük). E termék védőcsoportját úgy hasítjuk le, hogy ötszörös mennyiségű trifíuorecetsavban oldjuk, az oldatot rövid ideig állni hagyjuk, majd éterbe permetezve kicsapjuk. Éterrel történő többször átmosással a trifluoracetátot csaknem színtelen csapadék alakjában nyerjük. Ezt vízben oldjuk, a pH-t hígított vizes ammóniaoldattal 5-re állítjuk, majd kis térfogatra pároljuk be és etanollal kicsapjuk. A csapadékot kevés 1 :1 arányú víz-metanol elegyben oldjuk, és fölös mennyiségű tanol hozzáadásával ismét kicsapjuk. így a 7-[(4-aminopiridinium)-acetilamino]-3-( 1 -metü-tetrazol-5-ü-tio)-rnetil-cef-3-em-4-karbonsavat kapjuk, amely megegyezik az 1. példában leírt eljárás szerint előállított anyaggal. A kiindulási anyagot a következőképpen állíthatjuk elő: Egy 2,5 literes szulfuráló lombikban 50 g 4-aminopiridint oldunk 160 ml dioxán és 160 ml víz elegyében, majd 0°-ra hűtjük le. Ezután erős keverés és további hűtés közben kb. 5 perc alatt 95 g terc-amiloxikarbonilklorid 480 ml toluolos oldatát folyatjuk hozzá. A reakcióelegyet ezután lasan szobahőmérsékletre melegítjük, majd összesen 390 ml 2 n nátriumhidroxidoldat folyamatos hozzáadása és a pH 10-re történő beállítása közben a reakciót 24 órán át folytatjuk. A két fázist elválasztjuk, a toluolos fázist tömény konyhasóoldattal többször utánamossuk, nátriumszulfát felett szárítjuk és vákuumban szárazra pároljuk, így nyers kristályos állapotban kapjuk a reakcióterméket. A vizes fázist kloroformmal extraháljuk, így mét további kívánt terméket nyerünk. Az egyesített extraktumokat 100 ml etanolban oldjuk, szűrjük, vákuumban kb. 25 ml-re pároljuk be, majd lassan keverés közben 60 ml vizet adunk hozzá, így színtelen, tűs kristályú anyag alakjában nyerjük a 4-terc-amiloxikarbonil-aminopiridint. Olvadáspont: 107-108°. Vékonyrétegkromatográfiás vizsgálat, szilikagélen: Rf52A=0,48, Rf, i o=0,86, Rf, 0 1 =0,69 (a kimutatást káliumjodidos jódoldattal végezzük). Ultraibolya spektrumban (etanolban) Xmax= 242 nm ( e =19 800). 9. példa 50,8 7-[(para-aminopiridinium)-acetilamino]-cefalosporánsavat és 29,0 g 5-merkapto-l-metil-tetrazolt 300 ml vízben szuszpendálunk, majd 800 ml 10%-os dikáliumhidrogénfoszfátoldat hozzáadásával oldatba visszük, és a pH-t 6,5-re állítjuk. A reakcióelegyet 6 órán át nitrogénatmoszférában 60°-on keverjük. Ezután 0°-ra hűtjük le, majd 11 liter -5°-ra hűtött metanolba folyatjuk és a pH-t 50 ml 20%-os foszforsav hozzáadásával 7,7-re állítjuk. A reakcióelegyet egy fél órán át keverjük 0°-on és a kikristályosodó foszfátot leszűrjük. A szűrletet vákuumban először 2 liter térfogatra pároljuk be, majd a víz eltávolítása céljából összesen 3 liter abszolút etanol kapillárison át történő folyamatos hozzáadása közben vákuumban kb. 1,6 liter végtérfogatra pároljuk be. Ezután dekantáljuk a felülúszót a lombikból a kicsapódó világosbarna gyantáról. A felülúszóhoz keverés közben í ,8 liter etanolt és végül 3,6 liter etilacetátot adunk. Az elegyet egy órán át 0 -on állni hagyjuk, szűrjük, a szűredéket etilacetáttal mossuk, így már egy nagyon tiszta csapadékot nyerünk. Ezt 40 ml vízben oldjuk, a pH-t 1,1 ml 1 n sósavval 6,2-re állítjuk, majd 55 ml kloroform és 20 ml etanol hozzáadása után egy fél órán át erősen rázzuk. Nemsokára kristályosodás indul meg. A kristályos anyagot tizenötszörös mennyiségű 1 :9 térfogatrészarányú etanol-víz elegyben oldjuk, szűrjük, és a szűrletet vákuumban óvatosan bepárolva vagy liofilizálással 40-50 ml térfogatra sűrítjük be. Ezután 50 ml kloroformmal és 20 ml etanollal jól összerázzuk, így azonnal megindul a kristályképződés. Az elegyet két órán át hagyjuk állni 0°-on, majd a kristályos anyagot szűrjük, a szűredéket kevés 80%-os etanollal, majd abszolút etanollal mossuk és nagyvákuumban szárítjuk. Kitermelés: 21,2 g. így a 7[(para-aminopiridinium)-acetilamino]-3-(l-metil-tetrazol-5-il-tio)-metil-cef-3-em-4-karbonsavat kapjuk, színtelen, tűs kristályú anyag alakjában, bomláspont 171° (vákuumban megolvad). A szilikagélen végzett vékonyrétegkromatográfiás vizsgálat, az ultraibolya abszorpciós spektrum felvétele és az optikai forgatóképesség mérése során kapott értékek megegyeznek az 1. és 2. példában megadott értékekkel. 10. példa 1,01 g 4-terc-amÜoxikarbonil-aminopiridiniumecetsavat oldunk 6 ml dimetilformamidban, az oldatot 6 ml tetrahidrofuránnal hígítjuk, 0,435 ml trietilairtínt adunk hozzá, —10°-ra hűtjük le és erős keverés közben 0,42 ml klórhangyasav-izobutilésztert csepegtetünk hozzá. 1,23 g 7-amino-3-(l-metil-tetrazol-5-il-tio)-metil-cef-3-em-4-karbonsavat és 0,488 ml trietilamint oldunk 5 ml tetrahidrofurán és 5 ml víz elegyében, ezt az oldatot 0°-ra hűtjük le és 15 perc múlva hozzáadjuk a fenti reakcióelegyhez. Egy órán át 0°-on és másfél órán át szobahőmérsékleten tovább keverjük, a pH-t 6,5-re állítjuk, majd a tetrahidrofuránt vákuumban ledesztilláljuk. A visszamaradó oldatot 80 ml etilacetáttal extraháljuk, ezt az extraktumot elöntjük, majd háromszor extraháljuk 100—100 ml 4 :1 arányú etilacetát-etanol eleggyel, a szerves fázist nátriumszulfát felett szárítjuk és vákuumban szárazra pároljuk. A maradékot kloroformmal extraháíjuk, és a kevés Norit-tal színtelenített extraktumot egy Hyfío Supercel-lel töltött rövid oszlopon szűrjük át. A szűrletet vákuumban kis térfogatúra pároljuk be, majd feleslegben adunk a maradékhoz étert, így enyhén elszíneződött csapadék alakjában nyerjük a 7-[(4-terc-amiloxikarbonil-aminopi ri di niu m)-acetilamino]-3-(l-metil-tetrazol-5-il-tio)-metil-cef-3-em-4-karbonsavat, amelynek szilikagélen végzett vékonyrétegkromatográfiás vizsgálata során nyert Rf-értékei olyanok, mint a 8. példában leírt eljárás szerint előállított anyagé: Rf5 2 A = 0>26, Rf6 9 =0,39, Rf,O ,=0,53 (a kimutatást káliumjodidos jódoldattal végezzük). 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 f
