164452. lajstromszámú szabadalom • Eljárás 6-alfa-amino-alfa-fenil-acetilamino-penam-3-karbonsav előállítására
164452 7 8 oldunk és az oldathoz keverés közben, 20 C° hőmérsékleten cseppenként hozzáadunk 2,00 ml (0,02 mól) n-butilamint. A reakcióelegyet 90 percig keverjük, majd először 0,5 n vizes sósavoldattal, azután telített vizes nátriumklorid-oldattal mossuk és így a reagálatlan n-butilamint vízben oldódó hidroklorid-só alakjában eltávolítjuk a reakcióelegyből. A szerves oldószeres fázist szilikagéllel szárítjuk, majd csökkentett nyomáson bepároljuk. A bepárlási maradékot kevés benzolban oldjuk és ezt az oldatot egy 350 g szilikagéllel töltött oszlopra öntjük, majd benzol és etüacetát 20 : 1 arányú elegyével eluáljuk az oszlopot. Az eluátum-frakciókat hidroxámsavas módszerrel, vékonyréteg-kromatográfiával vizsgáljuk és a kívánt pt-(N-tritilamino)-benzil-penicillin-fenacilésztert tartalmazó frakciókat egyesítjük, majd liofüizálással szárazra pároljuk. Az így kapott száraz terméket etilacetát és petroléter elegyéből átkristályosítjuk; 2,2 g kristályos a-i(N-tritilamino)-benzil-penicillin-fenacüésztert kapunk. Ez a mennyiség az elméleti hozam 15,5%-ának felel meg; op.: 202—204 C°. A kapott termék infravörös színképe abszorpció-maximumokat mutat 35350, 1785, 1720, 1685, 1590 és 1525 cm-1 -nél. A magmágneses rezonancia-j színkép abszorpció-értékei: 1,66 (s, 3H), 1,75 (s, 3H), 3,3 i(b, 1H), 4,38 <b, 1H), 4,56 (b, 1H), 5,12 (d, 1H), 4,5 c/s), 5,28, 5,35, 5,42 (t, 3H), 7,3—8 <m, 25H) cm"1 . Elemzési adatok: a C43H39N3O5S képlet alapján számított C: 72,56%, H: 5,54%, N: 5,92%, talált C: 72,88%, H: 5,68%, N: 5,99%. 2. példa: 2,13 g (0,003 mól) ^(N-tritüamino)-benzil-penicülint 7 ml frissen desztillált dimetilf ormamidban oldunk. Ehhez az oldathoz 70 perc alatt hozzácsepegtetjük 0,79 g {0,006 mól) nátrium-tiofenilát 3 ml frissen desztillált dimetilformamiddal készített oldatát. Ezután 20 ml etilacetátot adunk a reakcióelegyhez, majd az elegyet először vizes 10%-os ecetsav-oldattal, majd vizes n nátriumhidrogénkarbonát-oldattal mossuk, a reagálatlan nátrium-tiofenolát és a visszamaradt dimetUformamid eltávolítása céljából. Az elkülönített szerves oldószeres fázist szilikagéllel szárítjuk, majd 0,43 g 2-etü-4iexánsav-nátriumsó 2 ml vízmentes etilacetáttal készített oldatát adjuk hozzá. Az elegyet csökkentett nyomáson betöményítjük és petrolétert adunk hozzá. Az ennek hatására levált terméket szűréssel elkülönítjük, mossuk és szárítjuk. Ily módon 2,13 g «j (N-tritilamino)-benzil-jpenicillin-nátriumsót kapunk. A fenti módon kapott nyers terméket 10 ml etilacetátban oldjuk és az oldathoz keverés közben, 20 C° hőmérsékleten 0,8 ml triiluorecetsavat adunk, majd a reakció teljessé tétele céljából a reakcióelegyet ugyanezen a hőmérsékleten 10 percig állni hagyjuk. Ezután nagymennyiségű petrolétert adunk hozzá, majd a kivált olajszerű terméket elkülönítjük, etilacetátban oldjuk, trietilaminnal semlegesítjük, majd ismét nagymennyiségű petrolétert adunk hozzá. 5 Az ennek ihatására kivált olajszerű terméket vízben oldjuk, a vizes oldatot etilacetáttal mossuk és liofilizáljuk. Ily módon termékként 450 mg a^amino-benzilpenicillint i(ampicillint) kapunk. 1° Ez a termék vékonyréteg-kromatográfiai (R/ •= 0,72) és bioautográfiai vizsgálat alapján azonosnak bizonyul a kereskedelmi forgalomban levő standard ampicillinnel. Infravörös színképében a laktam abszorpciós maximuma 1760 15 cm -1 értéknél mutatkozik. A kapott termék aktivitása 340 meg/mg. 3. példa: 20 20 g (24,1 mülimól) N^(N'-trittl-D-fenilglicil)-benzilpenicillin-fenacilésztert 50 ml vízmentes benzolban oldunk. Ehhez az oldathoz szobahőmérsékleten, 20 perc alatt hozzáosepegtetjük 3,0 ml (24,1 mülimól) 3-dimetüaminorpropilamin 25 12 ml vízmentes benzollal készített oldatát. Az elegyet azután a reakció teljessé tétele érdekében 50 C° hőmérsékleten 2 óra hosszat állni hagyjuk, majd a reagálatlan 3-dimetilamino-propilamin vízben oldódó foszfát alakjában való eltávolítása céljából a reakcióelegyet először nátriumkloriddal telített vizes 10%-os foszforsavoldattal, majd n nátriumhidrogénkarbonát-oldattal mossuk. Az elkülönített szerves oldószeres fázist vízmentes nátriumszulfáttal szárítjuk, majd csökkentett nyomáson bepároljuk. A kapott koncentrátumhoz 100 ml metanolt adunk és éjjelen át hűtőszekrényben állni hagyjuk. A kristályos alakban levált iCH('N-tritüami-40 no)-benzil-penicillint elkülönítjük és megszárítjuk. 11 g kristályos terméket i(az elméleti hozam 64,3%-a) kapunk, amely 202—203 C°-on olvad. Elemzési adatok: a C43H39N3O5S képlet alapján 45 számított C: 72,76%, H: 5,54%, N: 5,92%; talált C: 72,57%, H: 5,59%, N: 5,92%. Az infravörös színkép (nujolban) az 1600— 50 1800 cm-1 tartományban 1692, 1727 és 1795 cm_1 -nél mutat jellemző abszorpció-sávokat. 4. példa: 55 20 g (28,2 mülimól) «-(N-tritilamino)-benzil-penicillin-fenacilésztert 50 ml frissen desztillált dimetilf ormamidban oldunk, majd az oldathoz szobahőmérsékleten, keverés közben hozzáadjuk 16 g í(121 mülimól) nátrium-tiofenolát 30 60 ml desztillált dimetilformamiddal készített oldatát. A reakcióelegyet a reakció teljessé tétele érdekében szobahőmérsékleten egy óra hosszat állni hagyjuk, majd először 10%-os vizes ecetsav-oldattal, azután telített vizes nátriumklorid-65 oldattal mossuk a reagálatlan tiofenolátnak, va-4
