164403. lajstromszámú szabadalom • Eljárás rovarok metamorfózisát szabályozó szteroid hormonok előállítására
164403 7 8 gébb vízoldhatóságát kihasználva oldjuk meg. Egyszerű, többszöri desztillált vízből történő kikristályosításával tökéletesen tiszta ekdizonhoz jutunk. Ennek fizikai és kémiai jellemzői: olvadáspont = 160—163 C°, az olvadás után 5 a folyadék megszilárdul, majd 230—240 C° hőmérsékleten újra olvad. [a]20 D = +65,7° ±1° >(c = 1,033, etanolban). Amax = 242 m/í (log £= 1,1 960); 1 órán át tartó forró savas kezelés után két új abszorp- 10 ciós maximum figyelhető meg: 244 és 297 <m./j,~ on. Xmax (KBr) 3650—3100, 1650, 1450, 1385, 1055, 880 cm"1 . Ha az ekdizont piridinben ecetsavarihidrid 15 feleslegben levő mennyiségéivel kezeljük, egy 85—95 C° olvadásporitú triaoetil-származékot kapunk. Ezután a >(B) oldhatatlan termékből először metanolból, majd kromatográfiás tisztaságig 1% 20 vizet tartalmazó metanolból történő ismételt kristályosítással tiszta makiszteron A-t állítunk elő. Az ily módon nyert makiszteron A olvadáspontja 258—26)0 C°, forgatása [a]20 D = +65° ± 1° (c = 0,5, metanol). Piridinben, ecetsavanhidrid- 25 del kezelve, egy 237 C°-on olvadó aoetil-származékot kapunk. A többszöri ..kristályosítás után visszamaradó anyalúgot egyesítjük, és alacsony hőmérsékleten szárazra pároljuk (D). A desztillációs maradé- 30 kot i(D) a C termékkel egyesítjük, és metanolban oldjuk. Az oldatot csökkentett nyomáson, alacsony hőmérsékleten ledesztilláljuk, és a desztillációs maradékot . (E), vagy újra kezdve a fenti eljárást, vagy egyesítve egy új kristá- 35 lyos (T) termékkel ismét feldolgozzuk. A i(D) és (C) termékeket más polilhidroxil-szteroidok tiszta formában történő előállítására is [felhasználjuk. A (D) termék a fenti kromatográfiás vizsgálat szerint egy R/ 0,23-mal jellemezhető, zöld színű folt alakjában jelentkező új terméket tartalmaz, amit xnuriszteronnak neveztünk el. Ezt az új anyagot a '(D) termékből szilikagél-kromatográfiás úton különíthetjük el, az 5—10% metanolt tartalmazó kloroformos eluátum tartalmazza. Az eluátum szárazra párolása után nyert desztillációs maradékot étilacetátból kikristályosítjuk, amikor egy 227—230 C°-on olvadó terméket kapunk. Ez vízben oldódik, tapasztalati képlete C27H44O8. Ha a muriszteront piridinben ecetsavanhidriddel kezeljük, egy tetra-acetilszármazékot ka- 55 punk, amelyet etilaoetát-lhexán 1 : 1 arányú elegyéből kikristályosítva, 236—238 C° olvadáspontú termékhez jutunk. A találmány szerinti eljárást a következő, a találmány oltalmi körét nem korlátozó pél- 60 dákkal magyarázzuk. 1. példa: 20 g Kaladana magot korongos malomban 65 megőrölünk, majd '60—90 C° forráspontú ligroinnal hidegen extráhálva zsírtalanítunk. Keverés közben, 5 órán át háromszor, egyenként 35 liter gazolinnal extrahálunk. A zsírtalanított anyagot ezután keverés közben, kétszer egymás után, 60 liter 9 :0,-9 :0,1 arányú kloroform-metanol-ammóniumhidroxid eleggyel extraháljuk. Az extrakciókat 12 órán át, szobahőmérsékleten végezzük. Két egymás utáni extrakció következik, egyenként 50 liter kloroformmal, keverés közben, 3 órán át, szobahőmérsékleten. Az extraktumokat minden esetben csökkentett nyomáson történő szűréssel elkülönítjük a szilárd őrleménytől. Az összes extraktumot egyesítjük, és 40 C°nál alacsonyabb hőmérsékleten, csökkentett nyomáson bepároiljuk. A koncentrátumot néhány napon át hűtés közben állni Ihagyjuk mindaddig, míg további kristályosodást nem figyelünk meg. A keletkező kristályokat 'csökkentett nyomáson, szűréssel elkülönítjük, kevés kloroformmal, majd petroléterrel mossuk, majd csökkentett nyomáson szárítjuk. További nyers terméket kapunk, ha az anyalúgot bepároljuk és hűtés közben állni hagyjuk. A keletkező nyers termék összsúlya 140 g. Szilikagélen i(G), 80 : 19 : 1 arányú kloroform-etanol-^víz oldószerrendszerrel kivitelezett vékonyrétegkromatográfiás analízissel (előhívás vanillin-kénsav reagenssel, 120 C°, 10 perc) az előzőekben leírt foltokat figyelhetjük meg. amelyek R/-értékei: 0,22 , ,(kék színű); 0,20 (ibolya színű); 0,15 (sárga színű folt). 2. példa: 120 g, az 1. példa szerinti eljárással előállított kristályos (T) terméket 1000 ml desztillált vízbe szuszpendálunk. A zavaros szuszpenziót 25 C° hőmérsékleten 1 órán át keverjük, majd csökkentett nyomáson megszűrjük. A szűrletet félre tesszük, a szűrési maradékot a fenti eljárás szerint újabb vizes kezeléseknek vetjük alá. Minden esetben 1000 ml térfogatú vizet használunk. Négy vizes kezelés után az előbbiekben leírt módon kivitelezett vékonyrétegkromatográfiás vizsgálat azt mutatja, hogy a vízzel mosott szűrési maradékban a krusztekdizonnak megfelelő sárga színű folt lényegesen gyengébb, mint a makiszteron A-nak megfelelő ibolya színű, és az ekdizonnak megfelelő kék színű folt. Az egyesített vizes szűrletekhez (4000 ml) metanolt adunk i(1600 ml), és az oldatot 35 C°nál alacsonyabb hőmérsékleten, csökkentett nyomáson 1100 ml térfogatúra bepároljuk. A visszamaradó tömény oldatot jeges vízfürdőben lehűtjük, és a kivált kristályokat szűréssel elkülönítjük (30 g). Az így kapott terméket (C) vékonyrétegkromatográfiásan vizsgáljuk; makiszteron A-ból és krusztekdizonból áll. A C kristályos termék anyalúgját 35 C°-nál alacsonyabb hőmérsékle-10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 4
